吡啶联异噁唑啉类杂环衍生物的合成及生物活性.DOC

1、吡 啶 联 异 噁 唑 啉 类 杂 环 衍 生 物 的 合 成 及 生 物 活 性杨洪亮 1,2，金 博 1，陈俭清 1,2，盛尊来 1,2*（ 1.东 北 农 业 大 学 动 物 医 学 学 院 , 黑 龙 江 哈 尔 滨 150030; 2.黑 龙 江 省 重 点 实 验 室 动 物 疾 病 防 控 技术 与 制 剂 创 制 实 验 室 ， 黑 龙 江 哈 尔 滨 150030）摘要：以 2-氯-5- 氯甲基吡啶为原料，合成了 12 个吡啶联异噁唑啉类杂环衍生物（al），其结构经1HNMR、 13CNMR、MS 及 IR 确证。体外抗菌活性测试结果表明所得目标化合物对金黄色葡萄球菌(ATC

2、C25923)、肺炎链球菌(ATCC49619)和粪肠球菌(ATCC29212)都有抑制作用。其中，化合物f 和l对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）均为 16 mg/L，对肺炎链球菌和粪肠球菌的 MIC 值均为 32 mg/L，抗菌效果最佳；体外驱虫活性测试结果表明：目标化合物都有驱虫效果，在质量浓度 2 g/L 下化合物ab 和gh 对蚯蚓的麻痹时间和死亡时间均明显少于阿苯达唑，驱虫效果明显强于阿苯达唑。关键词：吡啶联异噁唑啉；合成；抗菌活性；驱虫活性；构效关系；医药与日化原料中图分类号： O626 文献标识码：ASynthesis and Biological Activity of

3、 Pyridinyl-4,5-2H-isoxazole Heterocyclic DerivativesYANG Hong-liang1,2, JIN Bo1, CHEN Jian-qing1,2, SHENG Zun-lai1,2*(1. College of Veterinary Medicine, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, Heilongjiang, China; 2. Heilongjiang Key Laboratory for Animal Disease Control and Pharmaceutical

4、 Development, Harbin 150030, Heilongjiang, China)Abstract：Twelve pyridinyl-4,5-2H-isoxazole heterocyclic derivatives (al) were synthesized from 2-chloro-5-chloromethylpyridine and their structures were characterized by 1HNMR, 13CNMR, MS and IR. Antibacterial activities results indicated all of compo

5、unds exhibited potent activities against Staphylococcus aureus (ATCC25923), Streptococcus pneumonia (ATCC49619) and Enterococcus faecalis (ATCC29212). Especially, compounds f and l showed the best activities, the minimal inhibitory concentration (MIC) values of f and l against Staphylococcus aureus

6、were 16 mg/L, the MIC values of f and l against Streptococcus pneumonia and Enterococcus faecalis were 32 mg/L. All the target compounds displayed excellent anthelmintic activities, paralyzing time and death time of compounds a, b, g and h were significantly less than those of albendazole against In

7、dian earthworm at 2 g/L concentration, indicating that these four compounds had much stronger anthelmintic effects than 收稿日期：2018-00-00; 定用日期：2018-00-00; DOI: 10.13550/j.jxhg.20180640基金项目：国家自然科学基金（31802227） ；黑龙江省青年科学基金（QC2016025） ；黑龙江省普通本科高等学校青年创新人才培养计划(UNPYSCT-2017003)；东北农业大学“青年才俊”项目(17QC13)作者简介：杨洪

8、亮（1987），男，讲师，电话：0451-55190874 ，E-mail：hongl_；联系人：盛尊来（1979），男，副教授，E-mail： 。albendazole.Key words：pyridinyl-4,5-2 H-isoxazole; synthesis; antibacterial activity; anthelmintic activities ; structure-activity relationship; drug and cosmetic materialsFoundation items：National Natural Science Foundation o

9、f China (31802227); Youth Natural Science Foundation of Heilongjiang Province (QC2016025); University Nursing Programs for Young Scholars with Creative Talents in Heilongjiang Province (UNPYSCT-2017003);“Young Talents” Project of Northeast Agricultural University (17QC13) 细菌耐药性问题已成为全球面临的非常严峻的公共卫生安全问

10、题，临床上多种耐药菌引起的感染性疾病已成为威胁人类健康的重大隐患。由于细菌能够不断产生新的耐药机制，现有药物的有效抗菌能力正在下降，人类正在加速进入“后抗生素时代” 1-2，对新型抗菌药物的需求已迫在眉睫。此外，寄生虫病是威胁人类健康的一大类疾病，其中，蛔虫病是一种普遍的人畜共患病，该病分布广泛，但以贫穷落后、卫生条件差的地区多见，热带和亚热带地区更多，对人类健康造成重大危害 3-4。目前，驱虫药物的发展比较缓慢且应用受限，因此，急需开发更加安全、有效的驱虫药物。利萘唑胺(linezolid)（结构如下所示）是近几十年来上市的一种人工全合成的噁唑烷酮类抗菌药物，临床证实有很好的疗效。人们对利萘

11、唑胺进行了大量的结构修饰和改造研究 5-9，虽然在疗效等方面有所改善，但药代动力学性质仍然不够理想，毒性也较大，因而一直没有新的药物上市。阿苯达唑(albendazole)，又名丙硫咪唑，为苯并咪唑类结构，是治疗多种寄生虫病的首选药物。但阿苯达唑在水及多种有机溶剂中溶解性较差，生物利用度较低，在一定程度上影响了其抗寄生虫疗效，因而需要开发能够提高药物溶解性及生物利用度的新的抗寄生虫药物。本课题组前期研究发现，吡啶联异噁唑和吡啶联异噁唑啉类杂环衍生物有很好的生物活性10-11。因此，本文在前期研究基础上，分析总结利奈唑胺和驱虫药阿苯达唑的结构特点，设计合成了一系列吡啶联异噁唑啉类杂环衍生物（结构

12、如下所示） ，并对目标化合物的体外抗菌效果和驱虫效果进行了测试。本文为后续开发新颖的抗菌及驱虫药物提供了实验基础。NONHNRONNOHNO OF利 NHS O利利利1 实验部分1.1 试剂与仪器二氯甲烷（DCM ）在使用前经过 CaH2 干燥后蒸馏得到；三乙胺（TEA） 、二甲亚砜（DMSO）和 N,N-二甲基甲酰胺（ DMF）使用前经过分子筛干燥得到，均为化学纯，天津市天力化学试剂有限公司，其它试剂和药品均为市售 AR，除特殊说明外未经进一步处理。薄层色谱用硅胶 G，台州市路桥四甲生化塑料品厂；柱色谱用硅胶， 200300 目，青岛海洋化工有限公司；水解酪蛋白（Mueller-Hinton

13、，MH ） 肉汤培养基，青岛高科园海博生物技术有限公司。Agilent 1100 型液相色谱-质谱联用仪 (LC/MS)，美国 Agilent 公司；400 MHz 核磁共振波谱仪，美国 Varian 公司,TMS 为内标；WRS-1A 数字熔点仪，上海世诺物理光学仪器有限公司；ZF-2 型三用紫外分析仪，上海市安亭电子仪器厂；MCO-20AIC 型二氧化碳培养箱，日本SANYO 公司；Agilent Cary 630 FTIR 红外光谱仪，美国 Agilent 公司。1.2 合成步骤目标化合物的合成路线如下所示。 NHOCl NNCl OHNONCl HNBoc N2OH.l CSNHBoc

14、 NONNH2NCl Cl NCl O NCl OHNONHNBocO OKOAc90Na2O3MeH Py.SO3TEADM/ Et NONHNO RTFA DMF05TEADM0rt DCM0mrphline10oCR=OOOONOOCF3 a b c d e fOOSOSOHNOHNOCl g h i j k l123456 1245以 2-氯-5- 氯甲基吡啶为起始，经取代、酯基水解、氧化、成肟、3+2 环加成反应得中间体，吡啶环上取代吗啉后脱掉 Boc 保护基团得重要中间体，然后分别形成酰胺、磺酰胺及脲类衍生物，合成 12 个目标化合物。1.2.1 化合物的合成化合物的合成参照文献1

15、2，中间体的合成参照文献10-11。1.2.2 目标化合物ah 合成合成方法参照文献13。分别将化合物 210 mg ( 0.8 mmol)，有机酸（乙酸、环己基甲酸、苯丙酸、烟酸、糠酸、对三氟甲基苯甲酸、异戊酸、四氢糠酸）1.2 mmol, 4-二甲氨基吡啶(DMAP) 50 mg (0.4 mmol)和 1-(3-二甲氨基丙基)-3- 乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI) 230 mg (1.2 mmol)溶于 10 mL DMF 中，室温搅拌过夜，TLCV(DCM) : V(MeOH) : V(TEA) = 60 : 2 : 1 监测反应完全，用乙酸乙酯(EtOAc)萃取(20 mL 3)，合

16、并有机相，无水 Na2SO4 干燥，减压蒸干有机溶剂，重结晶得目标化合物。N-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基乙酰胺( a)：产率 66.4%，白色固体，m.p. 198.0198.2 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.31 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.10 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.90 4.64 (m, 1H), 3.74 3.64 (m, 4H), 3.57 3.49 (m

17、, 4H), 3.44 3.29 (m, 1H), 3.25 3.21 (m, 2H), 3.10 3.04 (m, 1H), 1.82 (s, 3H)；13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 170.1, 159.8, 155.0, 146.9, 135.6, 115.2, 107.2, 79.3, 66.3, 45.2, 42.3, 37.7，23.0; IR (KBr), v/cm-1: 3309(-NH), 2905(-CH), 1649(C=O), 1612(C=N), 1504(C=C), 1381(-CH), 1112(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值(

18、理论值): 305.2 (304.2)M+H +。N-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基环己甲酰胺(b) ：产率 47.6%，灰色固体，m.p. 144.6147.3 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.30 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.92 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.81 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.70 4.63 (m, 1H), 3.74 3.61 (m, 4H), 3.57 3.46 (m, 4H), 3.4

19、1 3.34 (m, 1H), 3.29 3.26 (m, 2H), 3.09 3.03 (m, 1H), 2.14 2.08 (m, 1H), 1.66 1.57 (m, 5H), 1.35 1.20 (m, 5H)； 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 176.2, 159.8, 154.9, 146.9, 135.6, 115.3, 107.2, 79.4, 66.3, 45.3, 44.3, 37.6, 29.5, 25.7, 14.6；IR (KBr), v/cm-1: 3308(-NH), 2927(-CH), 1638(C=O), 1610(C=N), 15

20、07(C=C), 1258(C-N), 1118(C-O)；ES-MS: m/Z实测值(理论值): 373.3 (372.2) M+H+。N-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基-3-苯丙酰胺(c)：产率 68.4%，白色固体，m.p. 178.3181.4 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.30 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.11 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 9.2, 2.0 Hz, 1H), 7.26 7.14 (m, 5H), 6.90 (d, J = 9.2 Hz, 1

21、H), 4.69 4.61 (m, 1H), 3.74 3.62 (m, 4H), 3.57 3.46 (m, 4H), 3.28 3.17 (m, 2H), 3.06 2.98 (m, 2H), 2.80 2.76 (m, 2H), 2.41 2.38 (m, 2H). 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 172.4, 159.8, 155.0, 146.9, 141.7, 135.6, 128.7, 125.4, 115.2, 107.2, 79.3, 66.3, 45.3, 42.3, 37.5, 31.6；IR (KBr), v/cm-1: 3313(-NH),

22、2980(-CH) ,1638(C=O), 1612(C=N), 1500(C=C), 1388(-CH), 1112(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值(理论值): 395.1 (394.2) M+H+。N-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基烟酰胺( d)：产率 38.6%，白色固体，m.p. 169.7170.9 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.99 (s, 1H), 8.93 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.70 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 2.4 Hz, 1H),

23、8.22 8.14 (m, 1H), 7.83 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.0, 1H), 6.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.88 4.81 (m, 1H), 3.73 3.63 (m, 4H), 3.56 3.51 (m, 4H), 3.50 3.40 (m, 3H), 3.25 3.19 (m, 1H). 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 165.8, 159.8, 155.0, 152.4, 148.9, 147.0, 135.7, 135.5, 130.2, 123.9, 115.2,

24、 107.2, 79.0, 66.3, 45.2, 43.1；IR (KBr), v/cm-1: 3317(-NH), 2916(-CH) ,1618(C=O), 1608(C=N), 1507(C=C), 1288(C-N), 1152(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值( 理论值): 368.3 (367.2) M+H+。N-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基呋喃 2-甲酰胺 (e) ：产率 58.2%，淡黄色固体，m.p. 155.9157.2 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.56 (t, J = 5.6 Hz, 1H)

25、, 8.32 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.83 7.81 (m, 2H), 7.13 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 3.2, 1H), 4.83 4.76 (m, 1H), 3.73 3.63 (m, 4H), 3.58 3.49 (m, 4H), 3.48 3.29 (m, 3H), 3.22 3.16 (m, 1H)； 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 159.8, 158.6, 154.9, 147.8, 146.9, 145.6, 135.7, 115.2

26、, 114.1, 112.3, 107.2, 79.0, 66.3, 45.2, 38.0；IR (KBr), v/cm-1: 3302(-NH), 2922(-CH), 1653(C=O), 1612(C=N), 1507(C=C), 1315(-CH), 1112(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值(理论值): 357.1 (356.2) M+H +。N-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基-4-(三氟甲基) 苯甲酰胺(f)：产率 67.2%，白色固体，m.p. 190.9191.9 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.97 (

27、t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.85 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.82 (dd, J = 9.2, 2.0 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.89 4.82 (m, 1H), 3.72 3.65 (m, 4H), 3.56 3.51 (m, 4H), 3.51 3.39 (m, 3H), 3.25 3.19 (m, 1H)； 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 166.0 , 159.8 , 155.

28、0 , 147.0 , 138.4 , 135.7, 128.6 (q, JC-F = 255.2 Hz) , 125.8 , 115.2 , 107.2 , 78.9 , 66.3, 45.2, 43.2 , 38.0；IR (KBr), v/cm-1: 3298(-NH), 2903(-CH), 1638(C=O), 1612(C=N), 1505(C=C), 1336(-CH), 1246(C-F), 1112(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值(理论值): 435.2 (434.2) M+H +。3-甲基-N-3-(6-吗啉吡啶-3-基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基丁酰胺(

29、g) ：产率 61.3%，白色固体，m.p. 160.7162.2 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.30 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.03 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.81 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.69 4.66 (m, 1H), 3.74 3.64 (m, 4H), 3.57 3.47 (m, 4H), 3.40 3.36 (m, 1H), 3.30 3.17 (m, 2H), 3.10 3.04 (m, 1H), 1.96 1.90 (m

30、, 2H), 1.93 1.86 (m, 1H), 0.85 0.81 (m, 6H)； 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 172.5, 159.8, 154.9, 146.9, 135.6, 115.3, 107.2, 79.4, 66.3, 45.1, 42.1, 37.7, 26.0, 22.7；IR (KBr), v/cm-1: 3308(-NH), 2961(-CH), 1641(C=O), 1612(C=N), 1504(C=C), 1386 (-CH), 1112(C-O)；ES-MS: m/Z实测值( 理论值): 347.3 (346.2) M+H+。N

31、-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基四氢呋喃-2-甲酰胺(h) ：产率 64.2%，白色固体，m.p. 151.0153.3 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.91 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 9.2, 2.0 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.76 4.69 (m, 1H), 4.23 4.19 (m, 1H), 3.86 3.80 (m, 1H), 3.74 3.72 (m, 1H), 3.70

32、3.65 (m, 4H), 3.58 3.49 (m, 4H), 3.44 3.32 (m, 1H), 3.30 3.07 (m, 3H), 2.17 1.96 (m, 1H), 1.90 1.58 (m, 3H)； 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 173.5, 159.8, 154.8, 146.9, 135.6, 115.2, 107.2, 78.9, 78.1, 69.0, 66.3, 45.2, 41.9, 30.5, 25.3；IR (KBr), v/cm-1: 3293(-NH), 2953(-CH), 1656(C=O), 1612(C=N), 1509

33、(C=C), 1317(-CH), 1120(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值(理论值): 361.3 (360.2) M+H+。1.2.3 目标化合物ij 合成合成方法参照文献14。冰水浴下，将化合物 262 mg (1.0 mmol)，磺酰氯 1.05 mmol, DMAP 24.4 mg (0.2 mmol)和三乙胺 0.28 mL (2.0 mmol)溶于 10 mL DMF 中，自然升至室温搅拌约 2 h， TLC V(DCM) : V(MeOH) : V(TEA) = 60 : 1 : 1监测反应完全，用乙酸乙酯 (EtOAc)萃取(20 mL 3) ，合并有机相，无水 Na

34、2SO4 干燥，减压蒸干有机溶剂，重结晶得目标化合物。N-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基甲磺酰胺(i)：产率 47.2%，白色固体，m.p. 180.4181.4 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.33 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.28 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.76 4.69 (m, 1H), 3.73 3.64 (m, 4H), 3.57 3.50 (m, 4H), 3.4

35、8 3.44 (m, 1H), 3.23 3.10 (m, 3H), 2.92 (s, 3H)； 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 159.9, 155.0, 147.0, 135.7, 115.1, 107.2, 79.5, 66.3, 45.9, 45.2, 37.6；IR (KBr), v/cm-1: 3281(-NH), 2981(-CH), 1612(C=N), 1505(C=C), 1384(-CH), 1241(S=O), 1114(C-O)；ES-MS: m/Z实测值( 理论值): 340.9 (340.1) M+H+。N-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)

36、-4,5-2 H-异噁唑-5-基甲基苯磺酰胺(j)：产率 55.4%，白色固体，m.p. 168.6169.8 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.29 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.96 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 7.83 7.77 (m, 3H), 7.66 7.56 (m, 3H), 6.90 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.70 4.63 (m, 1H), 3.73 3.63 (m, 4H), 3.58 3.48 (m, 4H), 3.44 3.37 (m, 1H), 3.18 3.12 (m, 3H)； 13C

37、NMR (100 MHz, DMSO-d6), : 159.8, 154.9, 146.9, 141.0, 135.6, 132.9, 129.7, 126.9, 115.1, 107.2, 79.1, 66.3, 46.1, 45.2；IR (KBr), v/cm-1: 2927(-CH), 1608(C=N), 1504(C=C), 1332(-CH), 1244(S=O), 1120(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值(理论值): 403.1 (402.1) M+H +。1.2.4 目标化合物kl 合成合成方法参照文献15。冰水浴下，将化合物 262 mg (1.0 mmol)，环己

38、基异氰酸酯 250.4 mg (2.0 mmol) 或 4-氯苯基异氰酸酯 307.6 mg (2.0 mmol),三乙胺 0.21 mL (1.5 mmol)溶于 10 mL DMF 中，自然升至室温搅拌约 34 h，TLCV(DCM) : V(MeOH) : V(TEA) = 60 : 1 : 1监测反应完全，用乙酸乙酯萃取(20 mL 3)，合并有机相，无水 Na2SO4 干燥，减压蒸干有机溶剂，重结晶得目标化合物。1-环己基-3-3-(6-吗啉吡啶-3- 基)-4,5-2H-异噁唑-5-基甲基脲( k)：产率 70.4%，白色固体，m.p. 187.0187.8 ； 1HNMR (40

39、0 MHz, DMSO-d6), : 8.31 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 8.8, 2.0 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.91 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 5.86 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.68 4.61 (m, 1H), 3.70 3.68 (m, 4H), 3.54 3.51 (m, 4H), 3.40 3.33 (m, 2H), 3.21 3.19 (m, 2H), 3.10 3.05 (m, 1H), 1.73 1.70 (m, 4H), 1.63 1.60 (m

40、, 4H), 1.52 1.49 (m, 2H)； 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 160.2, 157.9, 155.1, 146.9, 135.6, 115.2, 107.2, 80.2, 66.3, 48.1, 45.3, 42.9, 37.4, 33.7, 25.3；IR (KBr), v/cm-1: 3326(-NH), 2931(-CH), 1627(C=O), 1578(C=N), 1504(C=C), 1312(-CH), 1244(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值(理论值): 388.3 (387.2) M+H+。1-(4-氯苯基 )-3-3-

41、(6-吗啉吡啶 -3-基)-4,5-2H-异噁唑-5- 基甲基 脲(l)：产率 75.7%，白色固体，m.p. 228.0229.4 ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6), : 8.70 (s, 1H), 8.33 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.83 (dd, J = 9.2, 2.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6

42、.38 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.78 4.70 (m, 1H), 3.69 3.67 (m, 4H), 3.53 3.51 (m, 4H), 3.46 3.40 (m, 1H), 3.36 3.33 (m, 1H), 3.30 3.26 (m, 1H), 3.15 3.09 (m, 1H)； 13CNMR (100 MHz, DMSO-d6), : 159.8, 155.7, 155.1, 146.9, 139.8, 135.6, 129.0, 125.1, 119.6, 115.2, 107.2, 79.8, 66.3, 45.2, 42.7, 37.5；IR (KBr

43、), v/cm-1: 3302(-NH), 2968(-CH), 1651(C=O), 1610(C=N), 1511(C=C), 1315(-CH), 1246(C-F), 1116(C-O)；ES-MS: m/Z 实测值(理论值): 416.4 (415.1) M+H+。1.3 目标化合物的生物活性测试1.3.1 抗菌活性测试 16将目标化合物及阳性对照药(利奈唑胺)用 DMSO 溶解后加 MH 肉汤培养基稀释，制得质量浓度为 512 mg/L 的抗菌药物工作液，备用。从 -80冰箱中取已传代菌液，接种于已灭菌的 MH肉汤培养基中，37培养箱中培养 1824 h。用灭菌的接种环取斜面菌种在

44、平皿上划线，分离单菌落，装于含有 MH 培养基的烧瓶中，37培养 1015 h。借助麦氏比浊仪，用 MH 肉汤稀释培养菌液使其浊度达到 0.5 麦氏比浊标准，此时菌液浓度约 l 1011 CFU/L，再将其稀释 100 倍，作为测试菌液，最终浓度为 l 109 CFU/L。MIC 采用肉汤稀释法进行测定：在 96 孔板上，每孔加入 100 L肉汤培养基，第一列每孔加入 100 L抗菌药物工作液，然后进行倍比稀释，稀释至第 10 列，吸出 100 L弃去，浓度梯度为：256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5 mg/L，最后两列分别为阴性对照孔（仅含菌液）和空白对照孔（仅含培养基）

45、 。按上述方法将各孔中抗菌药物工作液与菌液混合好后，再将 96 孔板置于恒温培养箱中37培养（18 2）h，当阴性对照孔的细菌有足够生长 (如明显的纽扣状生长或绝对的浊度)，未接种的空白对照孔没有生长，同时阳性药物的 MIC 必须在规定的质控范围内（24 mg/L）时，才可以读取微量稀释板的结果。每个孔中细菌生长的程度均应和阴性对照孔进行对比，并且能够明显抑制细菌生长的最小浓度认定为 MIC。1.3.2 驱肠虫活性测试由于蚯蚓与机体肠道内蛔虫在解剖学和生理学特性上具有很高的相似度，因此，选取成年印度蚯蚓(Pheretima posthuma)来评估目标化合物的体外驱虫效果 17-18。将长度

46、34 cm、宽度0.10.2 cm 的蚯蚓用生理盐水清洗蚯蚓上泥土及排泄物，目标化合物及阳性对照药阿苯达唑用最少量的 DMSO 溶解，再用生理盐水稀释，制得质量浓度为 2 g/L 的待测液，将待测液置于灭菌平板中( 直径 6 cm)，阴性对照组平板中加入等量生理盐水。将蚯蚓放入平板中(每组 6 只，每个平板 2 只)，观察蚯蚓的活动情况，并在 1h 内记录各组蚯蚓的麻痹时间和死亡时间。当摇动蚯蚓没有观察到明显运动，只有剧烈摇动才能观察到运动时，记录该时间为麻痹时间。当剧烈摇动或将其浸入 50 水中均没有观察到运动时，记录该时间为死亡时间，计算各组的平均麻痹时间和平均死亡时间 19-21。2 结

47、果与讨论2.1 化合物结构解析本文通过 9 步反应合成 12 个目标化合物，其结构均经 1HNMR、 13CNMR、MS 及 IR 确证。此处以化合物a 为例，进行结构解析。氢谱中 8.31 处（d，1H，J = 2.4 Hz）为吡啶环上 2 位氢； 8.10 处（t，1H ，J = 5.6 Hz）为酰胺氮上的氢； 7.82 处（dd，1H，J = 9.2 和 2.4 Hz）为吡啶环上 4 位的氢； 6.90 处（d，1H，J = 9.2 Hz）为吡啶环上 5 位的氢； 4.90 4.64 处（m, 1H）为异噁唑啉环上 CH 的氢； 3.743.64 和 3.573.49 处（m，4H）为吗

48、啡啉环上的两组 CH2 上氢； 3.443.29 和3.103.04 处(m，1H)为异噁唑啉环上 CH2 的氢，由于这两个氢分别处于环上和环下，化学环境有所不同，出现两个峰； 3.253.21 处(m，2H)为与酰胺氮相连的 CH2 上的氢； 1.82 处(s，3H) 为 CH3 上的氢。碳谱中 170.1 处为羰基碳； 159.8 107.2 处 6 个峰为吡啶环上碳和异噁唑啉环上双键碳； 79.3 处为异噁唑啉环上 CH 的碳， 66.3 和 45.2 处为吗啡啉环上两组 CH2 上的碳； 42.3 处为环外 CH2 上的碳； 37.7 处为异噁唑啉环上 CH2 的碳； 23.0 处为 CH3 上的碳。红外光谱中，3390 cm-1 处为酰胺 NH 伸缩振动峰