荧光分光光度法课件.ppt

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第三章第三章 荧光分光光度法荧光分光光度法(Fluorescence Spectrophotometry)(5)荧光的熄灭荧光的熄灭荧光分子与溶剂分子或其它溶质分子的相互作用引起荧光强度降低的现象称为荧光荧光熄灭熄灭。这些引起荧光强度降低的物质称为熄灭熄灭剂剂。导致荧光熄灭作用的主要类型:(a)碰撞熄灭)碰撞熄灭:碰撞熄灭是荧光熄灭的主要原因。它是指处于单重激发态的荧光分子M*与熄灭剂Q发生碰撞后,使激发态分子以无辐射跃迁方式回到基态,因而产生的熄灭作用。碰撞熄灭的定量方程定量方程:F0/F-1=k Q 上式称为Stern-Volmer方程式。式中:k为熄灭常数;Q为熄灭剂浓度,单位mol/L;F0、F分别为熄灭剂不存在时和存在时,溶液的荧光强度。)k与体系的粘度有关系,粘度越大,k越小;)k与体系的温度有关系,温度升高,k也升高;温度每升高1C,k值增加在2%以下;)熄灭剂的浓度Q不得大于10mol/L。(b)组成化合物的熄灭)组成化合物的熄灭有些荧光熄灭现象不能用碰撞熄灭理论来解释。例如例如:某些荧光物质溶液在加入一些熄灭剂之后,(*)溶液的吸收光谱有了显著的改变,(*)溶液的荧光

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