双荧光素酶报告系统双荧光素酶报告系统报告基因报告基因 (reporter gene):(reporter gene):是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。一般的，把报告基因的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。u在动物基因表达调控的研究中，报告基因被广泛应用。如绿色荧光蛋白(GFP）和荧光素酶。一、概述一、概述荧光素酶（荧光素酶（LuciferaseLuciferase）：是能够催化不同底物氧化发光的一类酶的统称，哺乳细胞无内源性荧光素酶。荧光素酶报告基因的优点荧光素酶报告基因的优点u蛋白不需要翻译后加工，所以一旦翻译立即产生报告活性。u在所有的化学发光反应中，它的光产物具有最高的量子效率，因而非常灵敏。另外，在宿主细胞及检测试剂中均检测不到背景发光。u检测快速，每个样品只需几秒钟。构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。二、实验原理二、实验原理
