1、天冬氨酸氨基转移酶（AST）检测性能验证1 目的验证 AST 检测性能是否满足临床要求，满足客户需求。2 材料2.1 仪器 日本TOSHIBA公司TBA-120FR型全自动生化分析仪。 2.2 试剂 湖南圣湘AST(速率法 )试剂，朗道多项生化校准品水平 2、BIO-RAD质控品水平1、水平2。3 方法3.1 精密度参考EP15-A用户对精密度和准确性能的核实实验 -批准指南 ；允许总误差参考卫生部临床检验中心室间质量评价标准，采用 2 个浓度的样本（质控物），每天分析 1 批，每批对 2 个浓度样本重复测定 4 次，连续测定 5 天。统计数据，计算批内精密度（Sr）和实验室内精密度（总精密度
2、）（Sl），进一步计算批内 CV(%)、总 CV(%)，与允许范围比较， 判断验证是否通过 。项目名称/单位 AST/ U/L检测设备/编号 TBA-120FR/SWE-CH-001检测试剂/批号 湖南圣湘 AST 试剂 A2015006校准品/批号 RANDOX CAL2350-1004UN质控品/批号 BIO-RAD 14481检测方法 速率法分析物浓度 浓度水平U/L 批内 10 实验室内 10厂家声称精密度值 CV（%） 批内 5% 实验室内 5%第 1 批 第 2 批 第 3 批 第 4 批 第 5 批日期/操作人员第一次测量( )1x34.8 33.8 34.9 35.1 33.9
3、第二次测量( )234.6 33.6 36.9 34.1 33.7第三次测量( )334.2 35.0 35.6 35.1 35.3第四次测量( )435.2 33.6 35.6 35.4 34.6天内均值 34.70 34.00 35.75 34.93 34.38总均值 34.75S 批内 0.42 0.67 0.83 0.57 0.73S 实验室内（总） 0.87批内 CV(%) 1.20% 1.98% 2.33% 1.63% 2.12%总 CV(%) 2.51%结论：TBA-120FR 所测项目 AST 批内精密度、实验室内精密度均在允许范围内。项目名称/单位 AST/ U/L检测设备/
4、编号 TBA-120FR/SWE-CH-001检测试剂/批号 湖南圣湘 AST 试剂 A2015006校准品/批号 RANDOX CAL2350-1004UN质控品/批号 BIO-RAD 14482检测方法 速率法分析物浓度 浓度水平U/L 批内 10 实验室内 10厂家声称精密度值 CV（%） 批内 5% 实验室内 5%第 1 批 第 2 批 第 3 批 第 4 批 第 5 批日期/操作人员第一次测量( )1x206.3 207.6 210.5 210.0 211.0第二次测量( )2208.0 207.7 209.8 209.2 211.0第三次测量( )3208.6 206.9 209.
5、7 209.6 209.0第四次测量( )4208.2 208.7 211.2 209.1 210.0天内均值 207.78 207.73 210.30 209.48 210.25总均值 209.11S 批内 1.01 0.74 0.70 0.41 0.96S 实验室内（总） 1.45批内 CV(%) 0.49% 0.36% 0.33% 0.20% 0.46%总 CV(%) 0.69%结论：TBA-120FR 所测项目 AST 批内精密度、实验室内精密度均在允许范围内。3.2 正确度采用室间质评回报结果作为评价指标。最近一次参加的卫生部室间质评样本编号 测试均值 靶值 允许范围 与靶值偏倚（%
6、）评价结果201611 35 35 28-42 0.00% 通过201612 173 173 138-208 0.00% 通过201613 73 73 58-88 0.00% 通过201614 283 286 229-343 -1.05% 通过201615 108 107 86-128 0.93% 通过判断标准：GB/T 20470-2006正确度验证结果： 满足要求 不满足要求结论：TBA-120FR 分析检测系统所检测的该项目正确度在允许范围内，保证检验结果准确可靠，可以满足临床需求。3.3 参考区间取 40 个健康人群的检测数据，其中有不超过 4 个数据落在参考区间以外，则可确定该项目的
7、参考区间。样本序号 姓名年龄/性别测定结果 样本序号 姓名年龄/性别测定结果1 王辉 43/男 25.9 21 王晨琨 17/男 18.92 谭逸轩 17/男 35.7 22 刘贝贝 33/女 13.23 陈国圣 44/男 31 23 梁翠 35/女 27.24 李程 30/男 22.6 24 谭凯文 21/男 31.25 邓兴平 53/男 20.6 25 陈翠风 30/女 26.96 潘永刚 33/男 27.6 26 刘玉香 46/女 22.37 张四玉 66/女 26.7 27 李素贞 54/女 36.48 陈小军 35/男 28.7 28 刘淑珍 66/女 24.49 刘益慧 56/女
8、26.4 29 王瑛 36/女 29.910 陈梅艳 34/女 22 30 刘良辉 45/男 46.811 王满春 64/女 29.1 31 谢新娘 36/女 27.212 邓月娥 63/女 21.8 32 金波 40/男 16.413 谭丽霞 35/女 21.5 33 邓云莲 88/女 22.614 孙玉荣 46/女 25.5 34 肖端和 70/女 2415 易恒远 65/男 36.6 35 何田英 73/女 26.816 龚慧玲 67/女 20.5 36 李华英 32/女 22.517 唐美姣 68/女 33.2 37 简君成 69/男 30.218 谭宇扬 49/男 32.3 38 余
9、绍雄 74/男 30.719 丁三君 33/女 32.8 39 余培兰 82/男 2820 刘艳 38/女 20.6 40 张伦 23/男 31.7厂家参考区间 0-40U/L 超出数据个数 1结果判断： 为合格%90总 测 定 例 数 的 例 数测 定 结 果 在 参 考 范 围 内RR 值：97.5% 满足要求 不满足要求 结论：厂家提供参考范围可用。3.4 分析测量范围取评价项目的高、低值病人标本各一份，（高值标本为接近线性范围上限或高于线性上限 10%15%的标本，低值标本为接近线性范围下限的标本）。低值标本为 1 号，高值标本为 6 号，低高值标本 4：1 混和为 2 号， 3：2
10、混和为 3 号，2： 3 混和为 4 号，1：4 混和为 5 号。每个编号标本重复测定 2 次，实际测定值/理论值100在 90-110之间均可以接受。经统计后拟合回归线 Y=bX+a。判断标准：相关系数 R20.95，b 在 0.97-1.03 范围；在直线回归方程可接受基础上，如果验证线性范围小于厂家申明的线性范围，是由于没有找到更高浓度的标本，没有验证全部线性范围，将验证的上限扩展为（上限+上限*10% ），验证下限扩展为（下限- 下限*50%）；若验证上限超出厂家声明上限，以厂家线性范围上限为准，若没有超出厂家声明上限，以自行验证为准。项目名称/单位 AST/ U/L检测设备/编号 T
11、BA-120FR/SWE-CH-001检测试剂/批号 湖南圣湘 AST 试剂 A2015006校准品/批号 RANDOX CAL2350-1004UN检测方法 速率法厂家声明线性范围：0-300 U/L 样本编号 配制比例 测定值1 测定值2 测定值3 测定均值 预期值 偏倚%1 50 -0.1 0.5 0.1 0.17 0.00 /2 41 58.7 58.6 58 58.43 58.00 0.75%3 32 115.4 115.7 115.4 115.50 116.00 -0.43%4 23 175.1 174.4 172.7 174.07 174.00 0.04%5 14 235.5 2
12、34.2 233.1 234.27 232.00 0.98%6 05 292 291.9 290.3 291.40 290.00 0.48%平均斜率 b b=0.9940采用线性回归，以预期值为 X，以按比例稀释的实测均值为 Y，得线性方程：Y=0.9940X+0.2408 线性回归散点图：回归方程：0.9940X+0.2408 b 在 0.97-1.03 范围内 b不在 0.97-1.03 范围内R2：0.9999 R20.95 R20.95直线回归方程是否可接受 可接受 不可接受线性范围延伸： 在直线回归方程可接受基础上，如果验证的线性范围小于厂家申明的线性范围，将验证的上限扩展为（上限+
13、上限*10% ），验证下限扩展为（下限- 下限*50%）； 若验证上限超出厂家声明上限，以厂家线性范围为准，若没有超出厂家声明上限，以自行验证为准；结论：在标本状态良好无干扰的情况下，已验证 AST 测定结果在 0300U/L 范围内呈线性，进行线性范围延伸后，可使用的线性范围为 0-300 U/L。3.5 临床可报告范围收集接近线性范围高值的标本，用生理盐水进行系列稀释（3-5 个浓度），每个浓度重复测定2 次，以样品未稀释结果作为预期值，将样品进行稀释后测定结果为实测值，与预期值比较两数值间的偏倚，确定符合临床要求的合适的稀释度，结合厂商提供的分析测量范围确定临床可报告范围。（部分参考临床
14、检验方法学评价P193）偏倚应在 0.91.1（个别项目 0.81.2）范围内符合该条件的最大稀释度为该项目的最大稀释倍数。项目名称/单位 AST/ U/L检测设备/编号 TBA-120FR/SWE-CH-001检测试剂/批号 湖南圣湘 AST 试剂 A2015006校准品/批号 RANDOX CAL2350-1004UN检测方法 速率法已验证线性：0-300 U/L 拟稀释样本浓度：288 U/L 稀释倍数 0 2 4 8 16测定值 1 279.7 139.3 69.4 35 17.9测定值 2 279.3 139.4 68.7 35.3 17.9均值 279.5 139.35 69.05
15、 35.15 17.9平均斜率 a=0.9992理论值 279.5 139.75 69.875 34.9375 17.46875实测偏倚 0.00% -0.29% -1.18% 0.61% 2.47%线性回归散点图：平均稀释回收率：1.0000 满足要求 不满足要求最大验证倍数：16 推荐稀释倍数：5临床报告范围：0-48000U/L 结论：TBA-120FR 所检测项目 AST 最大稀释倍数为 16 倍，临床可报告范围为 0-48000 U/L .3.6 抗干扰能力观察试剂对黄疸、脂血、溶血等样本不良因素的抗干扰能力，取体检健康受检者样本一份，等体积分为 1 份对照组样本及数份实验组样本，其
16、中实验组样本加入不同浓度的干扰物（胆红素、血红蛋白、甘油三酯），后者体积不得大于样本体积的 10%。对照组样本加入等同于干扰物体积的溶剂。每个样本测试 3 次，取平均值，计算其回收率，高于 90%视为合格。项目名称/单位 AST/U/L检测设备/编号 TBA-120FR/SWE-CH-001检测试剂/批号 湖南圣湘 AST 试剂 A2015006校准品/批号 RANDOX CAL2350-1004UN检测方法 终点法对黄疸的干扰：胆红素浓度 100umol/L 200umol/L 400umol/L 600umol/L重复次数 1 33 34 33 36 33重复次数 2 33 34 34 3
17、6 32重复次数 3 33 33 32 34 33均值 33 33.67 33 35.33 32.67回收率 2.02% 0.00% 7.07% -1.01%是否合格 是 是 是 是对溶血的干扰：血红蛋白浓度 1g/l 2g/l 4g/l 6g/l重复次数 1 53 53 53 53 53重复次数 2 53 53 53 53 53重复次数 3 53 52 53 53 53均值 53 52.67 53 53 53回收率 -0.63% 0.00% 0.00% 0.00%是否合格 是 是 是 是对脂血的干扰：甘油三酯浓度 2mmol/l 4mmol/l 8mmol/l 12mmol/l重复次数 1 26 26 26 26 26重复次数 2 26 26 26 26 26重复次数 3 26 26 26 26 25均值 26 26 26 26 25.67 回收率 0.00% 0.00% 0.00% -1.28%是否合格 是 是 是 是结论：黄疸对该试剂的干扰为600mol/L脂血对该试剂的干扰为12mmol/l溶血对该试剂的干扰为6g/L4 结论本室 AST 检测项目精密度、正确度、参考区间、分析测量范围、临床可报告范围结果均可接受，符合临床需求。报告人： 批准人： 2016.6
