全国职业院校检验检疫技术技能竞赛微生物学检验-革兰染色及细菌分区（四区）划线试卷（高职组、本科组）一、竞赛说明1.主要考核医学检验技术专业、卫生检验与检疫技术专业学生对革兰染色、分区划线的熟练程度，在规定时间内完成革兰染色和细菌分区（四区）划线的操作。2.本题满分100分，完成时间22分钟，其中细菌分区划线6分钟，革兰染色16分钟。3.独立完成，不得相互询问或讨论。4.考核成绩为操作过程评分、操作结果和考核时间评分、职业素养之和。5.全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额，超过规定时间将终止操作。二、实验原理1.细菌分区（四区）划线是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。2.革兰染色G菌：细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质少，乙醇脱色时不易渗入菌体，并能使细胞壁脱水，间隙缩小，通透性下降，阻止结晶紫-碘复合物从胞内渗出，保留紫色。G菌：细胞壁结构较疏松，肽聚糖层薄，脂质多，易被乙醇溶解，使细胞壁通透性增高，菌体内的结晶紫-碘复合物易被乙醇溶解逸出而脱掉紫色，经沙黄或稀释石碳酸复红复染后呈红色
