HPLC分析方法开发与验证解读课件.ppt

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液相方法开发液相方法开发创诺集团分析技术研究所纪伟20160903液相色谱原理仪器原理色谱分离机制液相色谱的分离机理 正相 反相 体积排除 离子交换 其他不同的分离模式是不同的机理吸附色谱的分离机理随着样品在固定相上的吸附能力由大到小在色谱柱上的保留由长到短 吸附色谱概述分离基于样品的极性差异。洗脱次序一般为正相,即:极性低的先被洗脱常用的流动相非极性有机溶剂,如己烷乙酸等为添加剂常用固定相硅胶、氧化铝、羟基磷灰石等。分配色谱的分离机理分配色谱概述反相色谱的主要类型,基于分子的极性分离洗脱次序:一般为反相,即极性高的先被洗脱常用的流动相:有机溶剂如甲醇、乙腈,水应用添加剂,成为离子对、离子抑制方法常用固定相:碳十八、碳八、胺基等基团反相色谱固定相多为键合相体积排除色谱的分离机理凝胶色谱概述 凝胶渗透(GPC)、凝胶过滤(GFC)分离基于分子在溶液中的体积大小 洗脱次序:大分子先被洗脱 流动相不参与分离,只起溶剂作用 分离效率低 色谱行为容易预测离子交换树脂的分离机理离子交换色谱概述适用于离子型化合物的分离分离基于离子的带电特性洗脱次序受多种因素的影响填料(离子交换树脂)的种类阴/阳,强

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