核酸的定量测定课件.ppt

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核酸的定量测定紫外吸收法紫外吸收法核酸的凝胶电泳核酸的凝胶电泳定磷法定磷法定磷法定磷法二苯胺法二苯胺法二苯胺法二苯胺法地衣酚法地衣酚法地衣酚法地衣酚法紫外吸收法紫外吸收法实验原理实验原理 核酸及其衍生物,核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有核酸及其衍生物,核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收吸收UV的性质,其吸收高峰在的性质,其吸收高峰在260nm波长处。核酸波长处。核酸的摩尔消光系数(或称吸收系数)用来表示。为每升的摩尔消光系数(或称吸收系数)用来表示。为每升溶液中含有溶液中含有1克原子核酸磷的光吸收值(即克原子核酸磷的光吸收值(即A值)值)(表)。测得未知浓度核酸溶液的(表)。测得未知浓度核酸溶液的A260nm值,即可以值,即可以计算出其中计算出其中RNA或或DNA的含量。该法操作简便,迅的含量。该法操作简便,迅速,并对被测样品无损,用量也少。速,并对被测样品无损,用量也少。试剂和器材试剂和器材试剂:试剂:钼酸铵过氯酸沉淀剂:钼酸铵过氯酸沉淀剂:取取3.6mL 70%过氯酸和过氯酸和0.25g钼钼酸铵溶于酸铵溶于96.4mL蒸馏水中,蒸馏水中,即成即成0.25%钼酸铵钼酸铵2.5%过氯过氯酸溶液。

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