1、人前列腺素 E2酶联免疫分析试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人前列腺素 E2(PGE2)水平。用纯化的抗-PGE2 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人前列腺素 E2(PGE2)，再与 HRP 标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下 转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的前列腺素 E2(PGE2)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人前列腺素 E2(PGE2)浓度。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被
2、板上设标准品孔 10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100l，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50l，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100l 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标 准品稀释液 50l，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50l 弃掉，再各取 50l 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 50l 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50l，混匀后从第七、第八孔中分 别取 50l 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50l，混匀后从第九第十孔中各取 5
3、0l 弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50l，浓度分别为（480ng/L ，320ng/L，160ng/L，80ng/L， 40ng/L）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40l，然后再加待测样 品 10l（样品最终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。人前列腺素 E2酶联免疫分析试剂盒计算以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘 出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回
4、归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项1试剂盒从冷藏 环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2浓洗涤液可能会有 结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3各步加样均应 使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标 本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再 测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（n5）。严格按说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准6底物请避光保存。7封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。8所有样品，洗 涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9本试剂不同批号 组分不得混用。10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。检测范围：25ng/L 500ng/L规格：96 人份 /盒人前列腺素 E2酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1试剂盒保存：； 2-8。2有效期：
