亲亲 和和 层层 析析Affinity Chromatography1a一、原理一、原理n亲和层析是利用生物大分子所具有的专一亲和力而设计的纯化技术 寻找配基配基固定化制成亲和层析柱2a基本过程+固相化3a+洗洗洗洗脱脱脱脱吸附4a解吸+5a载体载体6a样品样品样品样品固相化 再生7a8a9a酶：基质类似物，抑制剂，辅酶抗体：抗原，病毒，细胞细胞：细胞表面特异蛋白，外源凝集素核酸：互补碱基序列，组蛋白，核酸聚合酶 激素或药物：受体，载体蛋白外源凝集素：多糖，糖蛋白，细胞表面受体，细胞常见具有专一性亲和力的生物分子对：常见具有专一性亲和力的生物分子对：10a11a12a（一）载体的选择1、载体要求：（1）不溶性（2）渗透性：疏松网状结构，有良好的液 体流动性（3）化学和机械性能稳定（4）具备大量能被活化的基因（5）抗微生物和酶的侵蚀13a2、常用载体（1）纤维素 特点：价廉、来源充足 纤维性、非均一性限制大分子的掺入 非专一性吸附严重 用于抗体和酶的纯化（2）葡聚糖凝胶特点：化学及物理性质稳定 多孔性比琼脂糖低14a（3 3）琼脂糖凝胶）琼脂糖凝胶浓度浓度商品商品2%2%Sepharos
