第三章第三章 高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法:高效液相色谱法:特指一种用液体为流动相的色谱分离分析方法。特指一种用液体为流动相的色谱分离分析方法。它在经典色谱理论的基础上,采用了高压泵、化学键它在经典色谱理论的基础上,采用了高压泵、化学键合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实合固定相高效分离柱、高灵敏专用检测器等新实 验技术建立的一种液相色谱分析法。验技术建立的一种液相色谱分析法。高压:高压:150-350*105 Pa 高效:大于高效:大于30000塔板塔板/米米 高灵敏:高灵敏:10-9g(紫外检测)、(紫外检测)、10-11g(荧光检(荧光检测)测)3-1 高效液相色谱法的特点高效液相色谱法的特点高效液相色谱法与经典液相色谱法高效液相色谱法与经典液相色谱法经典液相柱经典液相柱色谱装置色谱装置高效液相色谱仪高效液相色谱仪经经典液相色典液相色谱谱HPLC固定相粒径固定相粒径流流动动相相驱动驱动方式方式流流动动相流速相流速150-200 m重力或低重力或低压泵压泵很慢很慢3-10 m高高压泵压泵快快(1-10mL/min)例:分离例:分离20种氨基酸种氨基酸