第六节 基因分离技术一、克隆多细胞的高等 生物个体水平 上:表示由具有相同基因型的同一物种的两个或数个个体组成的群体,所以说,从同一受精卵分裂而来的单卵双生子(monozygotic twins)便是属于同一克隆。 在 细胞水平 上:指由同一个祖细胞( progenitor cell)分裂而来的一群遗传上同一的子细胞群体。(教材 p.182-187)1、应用核酸探针分离克隆目的基因2、应用 mRNA差别显示技术分离克隆目的基因二、克隆基因的分离3、应用 cDNA差示分析法克隆基因 (教材 p.184-185)4、应用酵母双杂交体系克隆基因 5、基因的图位克隆法 (教材 p.185-187)6、 DNA的 MicroarrayInfected IBL 2353 Uninfected IBL 23537、 RACE技术 ( 1)高质量 mRNA的制备( 2) cDNA第一链的合成( 3) cDNA第二链的合成A. 自身引导法B. 置换合成法 ( 4) cDNA的分子克隆(教材 p.183-184)丰 度 等 级 相应丰度等级在相应丰度等级中所含的不同种类 mRNA序列的数量(个)每个细胞所含的相应丰度 mRNA序列的拷贝数(个)高 22 30 3, 500中 49 1, 090 230低 29 10, 670 14第七节 核酸序列分析技术