1、化学发光免疫分析技术姓名：庞潇卿专业：生化与分子生物学目录发光及化学发光的原理与分类化学发光剂及其作用原理化学发光免疫分析的原理与操作应用与发展前景发光： 是指分子或原子中的电子吸收能量后，由基态 （较低能级）跃迁到 激发态 （较高能级），然后再返回到基态，并释放光子的过程。基态 v0激发态 v能量 h.v普朗克公式， 能量 =h.vh为普朗克常数， v为频率发光发光的分类是指发光剂（荧光素）经短波长的入射光照射后 ，电子吸收能量跃迁到激发态，在其回复至基态时， 发射出较长波长的可见光 （荧光）。是指发生在生物体内的发光现象 。如萤火虫的发光，反应底物为萤火虫荧光素，在荧光素酶的催化下，利用
2、ATP能，生成激发态氧化型荧光素，它在回复基态时多余的能量以光子的形式释放出来。是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。 某些物质（发光剂）在化学反应时吸收了反应过程中的化学能，使反应的产物分子或中间态分子中的电子跃迁到激发态，当电子从激发态回复到基态时，以发射光子的形式释放出能量的现象。根据形成激发态分子的能量来源不同可分为 :间接化学发光直接化学发光A + B C*C* C + h.vA + B C*C* + D C + D*D* D + h.v 化学发光的原理化学发光的分类酶促化学发光：辣根过氧化物酶 -鲁米诺（HRP-Luminol）系统碱性磷酸酶（ ALP）系统黄嘌呤氧化酶系统非酶
3、促化学发光：吖啶酯系统草酸酯系统闪光（ Flash）：发光时间在 数秒 内，如吖啶酯辉光（ Glow） ：发光时间在 数十分钟 以上，如： HRP-Luminol系统二氧杂环乙烷 AP发光（ AP-AMPPD）系统黄嘌呤氧化酶系统按化学反应类型按化学反应类型 按发光持续时间按发光持续时间在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子 的形式释放能量的化合物，称为化学发光剂化学发光剂 或 发光底物发光底物 。可分为 直接化学发光剂 和 酶促反应发光剂 。化学发光剂能作为 化学发光剂 的条件： 发光的量子 产率高 ； 它的物理 -化学特性要与被标记或测定的物质 相匹配 ； 能与抗原或抗体形成 稳定的偶联结合物 ； 其化学发光常是 氧化反应 的结果； 在所使用的浓度范围内对生物体 没有毒性。直接化学发光剂直接化学发光剂 在发光免疫分析过程中不需要酶 的催化作用， 直接 参与发光反应，它们在化学结构上有产生发光的 特有基团 ，可直接标记抗原或抗体。（一）直接化学发光剂1. 吖啶酯2. 三联吡啶钌吖啶酯 在 碱性条件 下被 H2O2氧化 时，发出波长为 470 nm的光，具有很高的发光效率，其激发态产物 N-甲基吖啶酮甲基吖啶酮 是该发光反应体系的发光体。
