兔白细胞介素6的注意事项.DOC

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1、兔白细胞介素 6 的注意事项1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。2使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少 30 分钟,3浓缩洗涤液出现结晶后,请于 37孵育 15 分钟。4浓缩样品稀释液出现结晶后,请于 37孵育 15 分钟5若 24 小时内进行实验,标本可存放于 28 。不需及 时实验,标本-20 保存,避免反复冻融。6在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。7加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。8试剂盒保存于 28,请 勿冷冻,有效期请见盒内标示。实验前准备1使用前应将盒内

2、各试剂取出,室温放置至少 30 分钟。2准备各种实验仪器及材料,如微量移液器,吸头,医用蒸馏水等3浓缩洗液与医用蒸馏水 119 倍稀释后成为应用洗涤液4浓缩样品稀释液与医用蒸馏水 14 倍稀释成应用样品稀 释液5用应用样品稀释液来稀释样品,按照 1:100 的体积比来稀释样品如 10l 的样品加入到1ml 的应用样品稀释液中,充分混匀待用。)兔白细胞介素 6 操 作 步 骤1取出酶标板,设空白孔,依照次序对应分别加入 100l 的标准品于空白微孔中(空白孔视为 0 号标准品,用医用蒸馏水替代)2、分别标记样品编号,加入 100l 的稀释样品于空白微孔中(不同的样本采用不同的吸头)。3、将酶标板

3、置于 37温育 30 分钟;4、将酶标板板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体;5、每个孔中加满应用洗涤液后,轻微振摇酶标板 30 秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。6、重复第 5 个步骤 5 次,在吸水 纸上将酶标板拍干。7、在标准品孔和样品孔中加入 100l 的酶标偶合溶液。8、将 96 孔板置于 37温育 30 分钟。9、将酶标板取出,将其中的液体甩去,每个孔中全部加满应用洗涤液后,立即甩去液体。10、每个孔中再次加满洗涤应 用液后,室温轻微振摇酶标板 30 秒后将孔中的应用洗涤液甩去,在吸水纸上将酶标板拍干。11、重复第 5 个步骤 5 次,在吸水纸上将酶标板拍干。12、在每个孔中加入底物 A 50l 后立即加入底物 B 50l。轻轻振荡混匀。(A 液、B 液采用不同的吸头加样)13、将酶标板置于 37避光温育反应 15 分钟。14、每个微孔中加入 50l 的终止液,轻轻振荡混匀。15、在酶标仪上,450nm 处测定 OD; 显色后,15 分钟内进行测定。16、根据制备的标准曲线,计 算样本含量兔白细胞介素 6结 果 判 断1. 仪器值:于波 长 450nm 的酶标仪上读取各孔的 OD 值 ;2、检测值范围:080pg/ml3、敏感度:0.5 pg/ml

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