荧光定量荧光定量PCR仪技术仪技术内容概要内容概要1荧光定量荧光定量PCR的原理的原理1荧光定量荧光定量PCR的标记方法的标记方法1荧光定量荧光定量PCR解析方法解析方法1实验方案的选择及实验方案的选择及SYBR法实验流程法实验流程1荧光定量产品选择指南荧光定量产品选择指南荧光定量荧光定量PCR技术:技术:利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析与常规与常规 PCR技术比较:技术比较:对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析,无法对起始模板准确定量,无法对扩增反应实时检测荧光定量荧光定量PCR原理原理定义定义同一个样品重复96次起点定量与终点定量终点定量起点定量l起始起始DNA量是样本中本来的量,更有意义;量是样本中本来的量,更有意义;终点终点DNA量经过量经过PCR“加工加工”,不是研究所需要的数据,不是研究所需要的数据l起点定量误差小,终点定量误差大起点定量误差小,终点定量误差大+扩增曲线扩增曲线+荧光阈值荧光阈值+Ct值值荧光定量荧光定量PCR原理原理常用名词概念常用名词概念Cycle(循环数)(循