1、v 课题 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数v 课程标准v 测 定某种微生物的数量。v 课标解读v 1.利 用 选择 培养基分离 细 菌。v 2.运用活菌 计 数法 测 定土壤中尿素 细 菌的数量。 v 1筛选菌株v (1)自 然界中目的菌株 筛选 的依据是根据它对 的要求,到相 应 的 环 境中去 寻 找。v (2)实验 室中微生物 筛选 的原理:人 为 提供有利于 生 长 的条件 (包括 营 养、温度、pH等 ),同 时 或 其他微生物生 长 。微生物的分离与计数 生存 环 境目的菌株抑制 阻止v (3)选择 培养基:在微生物学中,将允 许 种 类 的微生物生 长 ,同 时 和 其他种类
2、 微生物生 长 的培养基,称作 选择 培养基。v 2 统计菌落数目v (1)常 用方法: 法。v (2)统计 依据:当 样 品的 足 够 高 时,培养基表面生 长 的一个菌落,来源于 样 品稀 释液中的一个 。通 过统计 平板上的菌落数,就能推 测 出 样 品大 约 含有多少活菌。v (3)平板 选择 菌落 计 数 时 一般 选 菌落数在 的平板, 计 数公式 为 。特定抑制 阻止稀 释 涂布平板稀 释 度活菌30 300每克 样 品中的菌落数 (CV)Mv 3设置对照v (1)对 照 实验 :是指除了 以外,其他条件都相同的 实验 。v (2)主要目的:排除 实验组 中 对实验结 果的影响,
3、提高 实验 的可信度。例如为 了确 认 培养基是否被 杂 菌 污 染,需以 培养基培养作 为 空白 对 照。被测试因素非 测试 因素牛肉膏蛋白 胨v 思维激活 1 上 述的 对 照 组 培养基 (牛肉膏蛋白胨 培养基 )是否也需接种?如何确 认 所制 备 的 选择 培养基的确起到了 选择 作用?v 提示 为确认培养基是否被杂菌污染时,对照组的牛肉膏蛋白胨培养基不需接种。欲确认所制备的选择培养基是否起到了选择作用,应同时对对照组的牛肉膏蛋白胨培养基进行接种 若对照组培养基中菌落种类明显复杂于实验组,则可确认选择培养基的确起到了选择作用。v 1 选择培养基的制作方法v (1)在 培养基全部 营 养
4、成分具 备 的前提下,加入物 质 :依据某些微生物 对 某些物 质 的抗性,在培养基中加入某些物 质 ,以抑制不需要的微生物,促 进 所需要的微生物生 长 ,如培养基中加入高 浓 度食 盐时 可抑制多种 细 菌的生 长 ,但不影响金黄色葡萄球菌的生 长 ,从而可将 该 菌分离出来;而在培养基中加入青霉素 时 可抑制 细 菌、放 线菌的生 长 ,从而分离得到酵母菌和霉菌。v (2)通 过 改 变 培养基的 营 养成分达到分离微生物的目的:培养基中缺乏氮源 时 ,可分离自生固氮微生物,非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存;培养基中若缺乏有机碳源 则 异养微生物无法生存,而自养微生物可利用空气中的 CO2制造有机物生存。v (3)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物:如当石油是唯一碳源 时 ,可抑制不能利用石油的微生物的生 长 ,使能 够 利用石油的微生物生存,从而分离出能消除石油 污 染的微生物。v (4)通 过 某些特殊 环 境分离微生物:如在高 盐环 境中可分离耐 盐 菌,其他菌在 盐浓 度高 时 易失水而不能生存;在高温 环 境中可分离得到耐高温的微生物,其他微生物在高温 环 境中因 酶 失活而无法生存。