1、结核菌培养方法、耐药性及存活时间的研究抗结核药物的使用,在结核病防治上起了划时代的作用。 50年代采用 INH+PAS联合治疗,取得了较好疗效。但 PAS服用量大,消化道反应多,病人不能耐受, 90%不能完成治疗程。瑞士 Geistlich药厂研制的 Dipasic(简称 DPC)(德国又名GEWO399),是以特殊方法,将 INH与PAS合成的化合物。它能代替 INH+PAS联合用药,增加疗效,副作用明显比 PAS为少,德国 Freudenthal等 50余位专家均有Dipasic临床应用的报告,认为有效。但无Dipasic耐药性的报道。当前,我国耐药性病人不断增加,寻求合理用药,是当务之急
2、,为此我们对 Dipasic作耐性研究,目的在于,( 1)了解 Dipasic对耐药菌株是否有效?( 2) Dipasic的药物抑菌浓度如何?以便研究用量与用法,提高临床疗效。 1、研究方法 :从安徽医科大学附属医院的门诊及病房肺结核病人的痰进行结核菌培养,无论病人是初治抑复治,亦不分男女老少,凡痰菌培养阳性者,即作为研究对象。结核菌的检验,按标准常规操作进行。药敏培养基的制备:液体鸡蛋培养基内,按比例加入抗结核药物,其浓度按我国药敏标准,如 INH、 PAS、 TB1,每毫升分别为 1g及 10g, SM、 KM、 CPM分别为10g, RFP及 RFD分别为 50g及 250g,EMB为
3、5g及 50g。Dipasic则暂定为每毫升含药 0.1g、0.5g、 1.0g及 10g四种。加入药物后,充分摇匀混合后,分装在中试管内,每管 5毫升,摆成斜面,进行 85 90 一小时凝固灭菌, 24小时后再灭菌一次,制成的含药培养基,保存在冰箱,一个月内有效。菌液制备:取培养基上生长一个月内的菌落,于磨菌器内灭菌生理盐水研磨呈均匀的菌液,再加灭菌盐水稀释,与标准管比较(制成每毫升含 1毫升的菌液),最后 100倍稀释成每毫升含 10-2毫 克菌液备用。 菌液接种:将含不同浓度的含药培养基顺序排列,并有不含药物的培养基作为对照。取每毫升含 10-2毫克的菌液,每管接种0.1毫升,接种菌量为
4、 10-3毫克的菌液。放在 37 温箱内培养,每周观察一次,四周报告结果。报告的标准是,如培养基上无菌生长者为(一),培养基上有菌落数在50个以下者为( +),培养基上菌落数 50个以上,但无融合者为( +),培养基上菌落大部分融合者为( +)。 2、研究结果 :我们研究的 10种抗结核药物耐药性试验,这 10种抗结核药物是:INH、 PAS、 DPC、 TB1、 EMB、 RFP、 RFD、 SM、 KM及 CPM,围绕本文目的,我们仅取 30例病人的其中 INH、 PAS及 DPC三种药物的耐药性进行分析,其他另行报道。 INH、 PAS的浓度,按国家耐药性标准,分为1g及 10g,以每毫升 1g为耐药上界,1g药浓下不能生长者为阴性,为敏感菌。1g生长者为阳性,为耐药菌。DPC的浓度,由于我们尚需寻求合适的抑菌浓度,故分为每毫升含药0.1g、 0.5g、 1.0g及 10g四种不同的浓度。为便于统计比较,暂以 1g作为耐药标准, 1g以下者为敏感, 1g以上者为耐药。