1、专题七专题七 选修内容选修内容 小专题 20 现代生物科技专题 1基因工程(1)基因工程的工具限制性核酸内切酶：能识别双链 DNA分子的某种特 定 核苷酸序列 ，并在 特定 位点上断开磷酸二酯键 (特异性识别、切断 DNA)。DNA连接酶：连接被限制酶切开的磷酸二酯键，对脱氧核苷酸序列没有专一性。运载体必须具备的条件： 能在宿主细胞中保存并大量复制； 有一个至多个限制酶切割位点； 有一定的标记基因，便于筛选； 载体 DNA必须是安全的； 载体 DNA大小适中。(2)与基因工程有关的几种酶名称 作用 参与生物 过 程 相同点DNA连 接 酶 连 接两个 DNA片段 基因工程 化学本质 均 为蛋白
2、 质，合成场 所均为 核糖体限制性核酸内切 酶切割某种 特定 的脱氧核苷酸序列DNA聚合 酶 在脱氧核苷酸 链 上添单 个 脱氧核苷酸 DNA复制RNA聚合 酶 在核糖核苷酸 链 上添加单 个 核糖核苷酸 转录解旋 酶 使碱基 间氢键 断裂，形成脱氧核苷酸 单链 DNA复制及 转录逆 转录 酶 以 RNA为 模板合成DNA逆 转录 、基因工程(3)基因工程的基本操作程序程序 说 明目的基因的 获 取 从自然界中已有的物种中分离出来； 用人工的方法合成； 从基因文 库 中 获 得 ； 通 过 PCR技 术获 得基因表达载体的构建要点 :同种 限制 酶 切割目的基因与 质 粒；双酶 切；运 载 体
3、的要求；基因表达 载 体的 组成将目的基因 导 入受体 细 胞 受体 细 胞种 类 ：大 肠 杆菌、枯草杆菌、土壤 农 杆菌、酵母菌和 动 植物 细 胞； 导入方法 :显 微注射法、 农 杆菌 转 化法、 Ca2+处 理 细 胞使 细 胞壁的通透性增大等 目的基因的 检测 与鉴 定检测对 象： 检测转 基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因； 检测 目的基因是否 转录 出了 mRNA； 检测 目的基因是否翻 译 成了蛋白 质 。检测 方法：分子 检测 法 和 都是 核酸分子 杂 交技 术 ， 是 抗原 抗体 杂 交法 ；形 态检测法 可根据目 标 性状的有无来判断目的基因是否表达（续表）2.细胞工程植物组织培养、植物体细胞杂交、细胞核移植的比较：植物 组织 培养 植物体 细 胞 杂 交 细 胞核移植原理植物 细 胞的全能性细 胞膜的流 动 性、植物 细 胞的全能性动 物 细 胞核的全能性方法离体的植物器官、 组织 或 细 胞 愈 伤组织 根、芽 植物体去掉 细 胞壁 诱导 原生 质 体 融合 组织 培养核移植 胚胎移植
