1、1 中国药典中国药典 微生物微生物检查法检查法主要内容l一、 中国药典 2010年版微生物限度检查法增修订内容简介l二、培养基适用性实验的实施与操作l三、白色念珠菌的检查l四、 微生物限度检查方法验证试验l五、微生物限度检查面临的问题3(一一 )中国药典 2010年版微生物限度检查法增修订内容简介4中国药典2010年版框架 (卫 )中国药典 2010年版框架 (卫 ) 无菌检查法 微生物限度检查法 灭菌法 抑菌效力检查法指导原则 药品微生物检验替代方法验证指导原则 微生物限度检查法应用指导原则 药品微生物实验室规范指导原则52010年版微生物限度检查法修订2010年版 中国药典 微生物限度检查
2、法附录 XIII C（一部）附录 XI J （二部） 引入培养基适用性实验 增加白色念珠菌检查法 贴膏剂检查方法的改进 限度标准表示方法改变62010年版微生物限度检查法修订1、附录 107页，微生物限度检查法供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物（的生长和存活无影响）无毒性。除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为 30 35 ；霉菌、酵母菌培养温度为 2328 （；控制菌培养温度为 35 37 ）。检验结果以 1g、 1ml、 10g、 10ml、 10cm2 为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。72010年版微生物限度检查法修订2、附录
3、107页，检验量除另有规定外，一般供试品的检验量为 10g或 10ml；（中药）膜剂为（ 50） 100cm2；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加 20g或 20ml（其中 10g或 10ml用于阳性对照试验 ）。82010年版微生物限度检查法修订3、附录 107页，膜剂供试品取供试品（ 50） 100cm2，剪碎，加（ 50ml或）100ml的 pH7.0无菌氯化钠 -蛋白胨缓冲液（必要时可增加稀释液），浸泡，振摇，作为 110 （或 120 ）的供试液。92010年版微生物限度检查法修订4、附录 108页，新增：贴膏剂供试品取规定量供试品，去掉贴
4、剂的保护层，放置在无菌玻璃或塑料片上，粘贴面朝上。用适宜的无菌多孔材料（如无菌纱布）覆盖贴剂的粘贴面以避免贴剂粘贴在一起。然后将其置于适宜体积并含有灭活剂（如聚山梨酯 80或卵磷脂）的稀释剂中，用力振荡至少 30分钟，或以其他方法制备成供试液。5、附录 108页，修订：离心沉淀法取一定量供试液， 500转 /分离心 3分钟，取全部上清液混合。用于 细菌 检查。6、 附录 108页，增加： 计数培养基的适用性检查102010年版微生物限度检查法修订7、附录 109页，增加：表 1常见干扰物的中和剂或灭活方法干 扰 物 可 选 用的中和 剂 或 灭 活方法戊二 醛 亚 硫酸 氢纳酚 类 、乙醇、吸附物 稀 释剂醛类 稀 释剂 、甘氨酸、硫代硫酸 盐季 铵类 化合物（ QACs）、 对羟 基苯甲酸 酯 、 卵磷脂、聚山梨醇 酯汞 类 制 剂 亚 硫酸 氢纳 、 巯 基乙酸 盐 、硫代硫酸 盐双胍 类 化合物 卵磷脂碘酒、洗必泰 类 聚山梨醇 酯卤 化物 硫代硫酸 盐乙二胺四乙酸（ EDTA） 镁 或 钙 离子磺胺 类 对 氨基苯甲酸-内 酰 胺 类 抗生素 -内 酰 胺 酶
