1、实验一寄生虫粪便检查法一、目的要求掌握粪便中寄生虫虫卵检查的饱和盐水漂浮法;应用显微镜观察粪便中虫卵的形态结构。 二、方法概述用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体和卵囊。方法简便,连续作 3次涂片,可提高检出率。1、蠕虫卵检查:2、原虫检查:1)活滋养体检查 2)包囊的碘液染色检查3)隐孢子虫卵囊染色检查: 改良抗酸染色法 (一)直接涂片法(二)浮聚法原理 :利用比重 较 大的液体,使原虫包囊或蠕虫卵上浮,集中于液体表面。常用的方法有三种:1、 饱 和 盐 水浮聚法2、硫酸 锌 离心浮聚法3、蔗糖离心浮聚法虫卵比重与漂浮液比重虫卵种 类 比重 漂浮液的种 类 比重 贾 第虫包囊 1.040-1.
2、060 饱 和 盐 水 1.17 1.19猪蛔虫卵 1.045 硫酸 锌 溶液 1.14钩 虫卵 1.085 1.09 氯 化 钙 溶液 1.05毛 圆线 虫卵 1.115 1.13 氯 化 钙 溶液 1.25猪后 圆线 虫卵 1.200 硫代硫酸 钠 1.37 1.39肝片吸虫卵 1.200 饱 和硫酸 镁 1.26姜片吸虫卵 1.200 饱 和硝酸 钠 1.2 1.49华 枝睾虫卵 1.200 甘油 1.226复腔吸虫卵 1.200 饱 和蔗糖溶液 1.28饱和盐水漂浮法操作示意图1. 自粪便不同处挑取如蚕豆大小的粪块,置于盛有少量饱和盐水的漂浮管中2. 将粪便捣碎,与盐水搅匀,再加饱和盐
3、水 3. 将满时,改用滴管,加至略高于管口但不超出为止 4. 取洁净载玻片一张盖在管口上,静止 30分钟左右5. 如图垂直向上提起载玻片6. 敏捷地翻转,覆以盖片镜检(三)沉淀法 原虫包囊和蠕虫卵的比重大可沉集于水底,有助于提高检出率。但比重较小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。1、自然沉淀法 2、离心沉淀法 (四)漂浮 -沉淀法 该法的原理是利用粪便中各种虫卵及粪渣中其它成份比重的差别,将不同比重的虫卵分别集中进行检查,即先按漂浮法检查比重较小的虫卵,然后将管中上层液倒掉,取沉淀物检查不能上浮而沉在下面的比重较大的卵,所以,该法可用于检查比重大小各异的寄生虫卵。(五)拭子检查法适用于在肛周、皮肤产卵(蛲虫),或常在肛门附近发现虫卵(带绦虫)的虫卵检查法。1、棉签拭子法2、透明胶纸法 漏斗幼虫分离法 (贝尔曼法 )。取粪便 15-20g,放在漏斗内的金属筛上,漏斗下接一短橡皮管,管下再接一个小试管。加入 40 到淹没粪球为止,静置 1-3小时。此时大部分幼虫游走于水中,并沉淀于试管底部。取试管底部沉渣制成涂片镜检。 平皿法。取被检粪球 3-4个,放于平皿中,加适量 40 温水,浸泡 10-15min后,除去粪球,留下的液体在低倍显微镜下检查。(六)粪便内蠕虫幼虫检查法1、幼虫分离法:网尾线虫、类圆线虫2、粪便内虫卵培养法:圆形线虫目 3、毛蚴孵化法: