1、人体机能学实验有机磷酸酯类中毒和解救及胆碱酯酶活性测定201550708 及廷宇1. 实验目的( 1)观察有机磷酸酯类中毒的症状及阿托品和解磷定的解救效果( 2)学习胆碱酯酶活性的测定方法,观察中毒前后及用不同药物解救后胆碱酯酶活性的变化有机磷酸酯中毒原理n 有机磷酸酯类进入人体后,其含磷基团中亲电性的磷与但见酶酯解部位丝氨酸羟基中的亲和性氧进行共价键结合,生成磷酰化胆碱酯酶复合物。该复合物使胆碱酯酶活性难以恢复,从而使乙酰胆碱大量积聚,产生中毒症状。早期用胆碱酯酶复活药可部分恢复胆碱酯酶的活性,若抢救不当或中毒时间过长,胆碱酯酶一旦老化,再用胆碱酯酶复活药也作用不大。所以,一旦中毒,必须迅速
2、抢救并尽早使用胆碱酯酶复活药阿托品、解磷定解救原理 阿托品抗胆碱药阿托品的作用机制为竞争性拮抗乙酰胆碱或拟胆碱药对 M受体的激动作用,对 M样症状有效。磷酰化胆碱酯酶复活的胆碱酯酶磷酰化碘解磷定复合物 复活的胆碱酯酶实验材料n 实验动物:家兔, 2.5-3.0kg,雌雄均可。n 实验药品5%敌百虫 0.1%硫酸阿托品2.5%解磷定 1%肝素10%草酸钾 0.007M氯化乙酰胆碱, 1M盐酸羟胺,3.5N氢氧化钠, 4N盐酸, 0.37M三氯化铁,磷酸缓冲液(pH7.2)n 实验器材:婴儿秤,测瞳尺,注射器( 2ml、 5ml、 10ml、 20ml),头夹,滤纸,干棉球,比色杯,烧杯,试管架, 10ml试管,微量移液器,漏斗,采血瓶,试管刷等。超级恒温水浴, 722型分光光度计实验方法1. 取家兔,称重,分组,观察:活动情况呼吸(呼吸频率、有无呼吸困难、呼吸道分泌物)瞳孔大小(测瞳尺测量直径,注意光线的影响)唾液分泌:是否正常大小便:有无失禁肌张力:是否正常肌震颤:有无采取正常家兔心脏血样: 1.0ml放入 1号采血瓶(注射器肝素抗凝;采血瓶草酸钾抗凝)