1、 动物胚胎工程转基因动物、基因敲除动物和克隆动物制作的胚胎学基础管敏强温州医学院实验动物中心第一节 动物胚胎工程概述 现代动物胚胎工程是指 所有对配子和胚胎进行操作的技术方法,它的 研究重点在雌、雄生殖细胞到囊胚的各个发育阶段上实施体外操作技术。 细胞 动物体外 体内 工程之一:胚胎移植 工程之二:胚胎培养 工程之三: 胚胎保存 工程之四: 胚胎分割 工程之五: 体外受精 工程之六 : 显微注射 工程之七: 卵的激活与孤雌发育 工程之八: 细胞核移植与克隆技术工程之一 胚胎移植胚胎移植技 术 概述 1胚胎移植技 术 的原理 2胚胎移植的技 术 程序 3一、概 述 (一)概念胚胎移植( embr
2、yo transfer, ET): 又称受精卵移植,是将体内或体外生产的哺乳动物早期胚胎移植到同种的生理状态相同的雌性动物生殖道内,使之继续妊娠发育为新个体的技术,也称 借腹怀胎 。提供胚胎的个体 供体( donor)接受胚胎的个体 受体( recipient)为了使供体 多排卵,通常采用 超排(superovulation);国外将常规的胚胎移植称为 超数排卵胚胎移植或称为多排卵胚胎移植( multiple ovulation and embryo transfer, MOET);目前,用 体外生产胚胎( in vitro production, IVP)技术或克隆( cloning)技术
3、等方法也可以生产胚胎,扩大了优质胚胎的来源,降低了 ET的成本。二、胚胎移植历史年代 成功事件 实验动物 完成人18901932193319421951195219591970197119721973197619781981198219831989199719982000胚胎移植胚胎移植胚胎移植胚胎移植胚胎移植胚胎低温长距离运输体外受精胚胎分割成功第一个家畜胚胎移植商业化公司成立胚胎超低温冷冻保存国际胚胎移植协会成立性别鉴定胚胎移植成功世界上首例试管婴儿出世胚胎干细胞系建立转基因超级鼠出生哺乳动物胚胎细胞核移植成功通过分离 X、 Y精子控制后代性别获得成功体细胞核移植成功人胚胎干细胞系建立基因
4、打靶后的体细胞核移植成功家兔山羊大鼠绵羊小鼠奶牛猪家兔家兔小鼠牛小鼠哺乳动物牛人小鼠小鼠小鼠家兔绵羊人绵羊Walter HeapeWarwick 等Nicholas,JS.Warwick 等Fekete和 LittleWillett等Kvasnichii AV.Marden & ChangChang MC.Mullen等Alberta Livestock Transplants LtdWhittingham等International Embryo Transfer SocietyHare等Steptoe & EdwardsEvans & KaufmanPalmiter等McGrath & S
5、olterJohnson等Wilmut等Thomson等 & Gearhart等 McCreath等表 1 哺乳动物胚胎生物技术发展主要事件简表 1.1初始阶段 1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内,分别获得仔兔 2只。 1.2初级阶段 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵羊、山羊小家畜方面研究,成功率 35%左右。 1.3发展阶段 1950-1970 日本首次在牛胚胎移植上成功,之后日、美采用非手术法移植成功。胚胎移植成功率达 70-80%. 1.4实用化初始阶段1970-1980 加美开始成立牛胚胎移植公司, 1973年牛冻胚移植成功(英) . 1.5实用化研究阶段1982- 大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日德广泛开展。克隆羊诞生。