1、浅谈防腐剂苯甲酸的测定摘要：苯甲酸是一种能够抑制食品中微生物生长和繁殖的防腐剂。按照国家规定的标准数量使用，可以防止食品生霉、变质或腐败，并能延长保存时间，同时对食用者也不会引起什么危害。但是如果超过规定使用剂量将会对食用者的身体造成影响，因此对防腐剂的检验显得特别重要。 关键词：防腐剂 苯甲酸 测定方法 苯甲酸又名安息香酸，为一种有安息香或苯甲气味的白色有丝光的鳞片或针状结晶体，熔点 122，沸点 249.2，100开始升华，苯其蒸气具有很强刺激性。具有抑制食品中微生物繁殖或杀灭、防止食品腐败变质、保持食品鲜度作用。 当前，苯甲酸作为一种能够抑制食品中微生物生长和繁殖的化学物质在食品加工工业
2、得到广泛应用，使用情况主要为：酱油、醋、果汁类、果酱类、葡萄糖、罐头，最大使用剂量 1g/kg；汽酒、汽水、低盐酱菜、面酱类、蜜饯类、山楂糕、果味露，每公斤最多使用 0.5g。苯甲酸随食品进入体内时与甘氨酸结合成马尿酸，从尿液中排出体外，不再刺激肾脏；在酸性条件下可随水蒸汽蒸馏，微溶于水，易溶于氯仿、丙酮、乙醇、乙醚等有机溶剂，化学性质较稳定。但若过量添加，不仅能破坏维生素 B1，还能使钙形成不溶性物质，影响人体对钙的吸收，同时对胃肠道有刺激作用。本文将主要探讨下苯甲酸的检测，希望可以为食品添加剂苯甲酸的检测提供参考。 一、紫外分光光度法 样品中的苯甲酸在酸性溶液中可以用水蒸汽蒸馏的方法蒸馏出
3、来，与样品中不挥发性成分分离来检测苯甲酸（1） 。检验方法可以概述为样品中加 1ml 磷酸经水蒸汽蒸馏，得到的馏液主要是苯甲酸，还有其它酸物，再加入 0.2N 的 K2Cr2O7 和 4N 的 H2SO4，将其它酸性物质氧化，经过蒸馏，得到无杂物的苯甲酸，然后经强酸氧化，氧化分解苯甲酸以外的其它有机物，氧化后的溶液再次蒸馏分解蒸馏液中除苯甲酸外的其它杂质，根据苯甲酸的吸收波长 225nm 下测定消光值。 二、气相色谱法 样品经乙醚提取，我们采用氢火焰离子检测器进行分离测定，然后与标准样比较定量检测苯甲酸含量是否符合标准。 实验时称取 2.50g 事先混合均匀的样品，置于 25ml 带塞量筒中，
4、加入 0.5mlHCl（1+1）酸化，分别用 15、10ml 乙醚提取两次，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个 25ml 带塞量筒中，合并乙醚提取液。用 3mlNaCl 酸性溶液（40g/L）洗涤两次，静止 15min，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入 25ml 容量瓶中。加乙醚至刻度，混匀。准确吸取5mL 乙醚提取液于 5ml 带塞刻度试管中，置 40水浴上挥干，加入 2ml石油醚-乙醚（3+1）混合溶剂溶解残渣。然后进行测定，进样 2l 标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中，可测得不同浓度苯甲酸的峰高，以浓度为横坐标，相应的峰高值为纵坐标，来绘制标准曲线。同时进样 2l 样品
5、溶液。用同样的方法测得峰高并绘制测量曲线并与标准曲线比较定量，从而对测量结果做出判断。 三、高效液相色谱法 样品处理后，注入高效液相色谱仪中，利用被测组分在固定相和移动相中分配系数的不同，使被测组分分离，用紫外检测器在特定波长下测定被测组分的吸光度，与标准样比较定性和定量（2） 。 实验开始取约 20ml 的样品于干净的小烧杯中，在超声处理器中超声处理 5 min，同样纤维素滤头过滤，把样品注入样品瓶中。准确称取0.1g 干燥的苯甲酸，用无水甲醇溶解于 50ml 的烧杯里，再转移至 100ml容量瓶中，在标准要求条件下定容，稀释得到浓度为 0.10mg/ml 的苯甲酸甲醇溶液。待基线平直后，注
6、入苯甲酸溶液和样品溶液各 5.0l，各做三次实验，再改变流动相甲醇和水的比例，待基线平直后，再分别进样苯甲酸溶液 5.0l，考察苯甲酸的分离情况。指出苯甲酸在样品色谱图中的位置，根据苯甲酸样品在色谱图上的保留值，对苯甲酸进行定性分析。分析苯甲酸的分离情况，探讨合适的苯甲酸液相色谱分离条件，根据苯甲酸样品和样品中苯甲酸的峰面积，分析计算检测样品中苯甲酸的含量。 高效液相色谱法是目前应用最多的一种色谱分析方法。此方法具有填料颗粒小、且均匀，小颗粒具有高柱效特点。与经典液相色谱相比，其优点是分辨率高、灵敏度高、样品量少、易回收和色谱柱可重复使用等，具有前处理简单、方便、灵敏度高、重现性好等优点。 四
7、、中和法 在弱酸条件中，用乙醚将样品中的苯甲酸提取出来，将乙醚挥发后，用中性酒精或醇醚混合物溶解内容物，用酚酞做指示剂，采用 0.1N 标准NaOH 滴定至终点，然后根据 NaOH 消耗的体积计算苯甲酸或苯甲酸钠的含量。 采用此方法测苯甲酸及其盐类最大缺点是：样品中有其它有机酸时，乙醚萃取时易带过来，所以此法测定误差较大。 五、薄层层析法 样品经过酸化后，用乙醚提取苯甲酸，然后将样品浓缩，浓缩后将样品点到聚酰胺薄层板上，经展开、显色后，根据比移值与标准比较定性，并进行定量（3 。 称取 25g 混合均匀的样品，置于 100ml 分液漏斗中加 0.5ml HCl 酸化，用 15、10ml 乙醚分
8、别提取两次，每次振摇 1 分钟，静置分层后将醚层分出，合并乙醚提取液。再用 3ml 4% NaCl 酸性溶液洗涤两次，弃去水层，静置 15 分钟，分离出水层，将乙醚提取液通过无水硫酸钠移入25ml 容量瓶中，加乙醚定容。吸取 10.00ml 乙醚提取液分两次置于 10ml具塞离心管中，在约 40水浴上挥干，加入 0.1ml 乙醇溶解残渣，制成样品液。在距聚酰胺薄层板下端 2cm 的基线上，用微量注射器点1l、2l 样品液，同时分别点 1l、2l 苯甲酸、山梨酸标准溶液，点间距 1.5cm。将点样后的薄层板放入预先盛有展开剂的展开槽中，展开槽内壁贴有滤纸，待溶剂前沿上展至 10cm，取出挥干，喷
9、显色剂，斑点黄色，背景蓝色。把样品斑点与标准斑点比较，根据斑点的面积大小及颜色深浅确定样品点的苯甲酸的含量，再进行计算判断。 希望以上介绍的几种苯甲酸的测定方法能够为食品添加剂的检验检测提供一些参考。重视食品添加剂检验，重视食品安全。 参考文献： （1）曾启华. 紫外分光光度法快速测定酸性食品中苯甲酸和山梨酸含量. 遵义师范学院学报，2004，4 （2）陈静.高效液相色谱法测定咸菜中的苯甲酸和山梨酸.中国城乡企业卫生.2010.02 （3李华勇.食品中苯甲酸检测新技术的现状.江西科学.2010.06 作者： 第一作者 谢晓辉，女，1980.12，本科，助理工程师，主要从事食品检验工作，工作单位：洛阳市质量技术监督检验测试中心。 马芳，女，1982.1，本科，助理工程师，主要从事食品检验工作，工作单位：洛阳市质量技术监督检验测试中心。 黄惠敏，女，1982.3，研究生，工程师，主要从事食品检验工作，工作单位：洛阳市质量技术监督检验测试中心。
