1、血红蛋白与相关遗传病1血红蛋白电泳红细胞渗透脆性实验珠蛋白基因检测HbA2 3.5%溶血 % 60%地中海贫血23实验原理 实验结果实验内容 根据不同的血红蛋白带有不同的电荷， 等电点 不同，在一定的 pH缓冲液中，缓冲液的 pH大于 Hb的等电点时其带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之， Hb带正电荷向阴极泳动。经一定电压和时间的电泳，不同的血红蛋白所带电荷不同、相对分子质量不同，其泳动方向和速度不同，可分离出各自的区带，同时对电泳出的各区带进行电泳扫描，可进行各种血红蛋白的 定量分析 。血红蛋白电泳4实验原理 实验结果实验内容血红蛋白电泳 电泳的介质：醋酸纤维薄膜 缓冲液： TEB（
2、pH8.6）材料：pH 8.6 TEB缓冲液适合于检出 HbA、HbA2、 HbS、 HbC，但 HbF不易与 HbA分开， HbH与 HbBarts不能分开和显示，应再选择其他缓冲液进行电泳分离。 无 “ 拖尾 ” 现象分离速度快灵敏度高5实验原理 实验结果实验内容血红蛋白电泳准备 点样 洗脱 定量6实验原理 实验结果实验内容血红蛋白电泳A： 4； A2： 65HbA2含量 = A2A2+A2 100%*临床意义： HbA2参考值： 2.0%-3.5% HbA2增多，见于 珠蛋白合成障碍性贫血，为杂合子的重要实验室诊断指标。 HbE病时也在 HbA2区带位置处增加，但含量很大（在 10%以上
3、）。 HbA2轻度增加亦可见于肝病、肿瘤和某些血液病。=3.0%7实验原理 实验结果实验内容红细胞渗透脆性实验正常红细胞悬浮于等渗的血浆中，若将其置于高渗溶液中，红细胞会因失水而皱缩；反之，将其置于低渗溶液中，则水进入红细胞，使红细胞膨胀。如环境渗透压继续下降，红细胞会因继续膨胀而破裂，释放血红蛋白，称为 溶血 。红细胞膜对低渗溶液具有一定的 抵抗力 ，这一特征称为 红细胞渗透脆性 。红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大，红细胞在低渗溶液中越不容易发生溶血，即红细胞渗透脆性越小。将血液滴入不同的低渗溶液中，可检查红细胞膜对于低渗溶液抵抗力的大小。开始出现溶血现象的低渗溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵
4、抗力；开始出现完全溶血时的低渗溶液浓度，则为该血液红细胞的最大抵抗力。8实验原理 实验结果实验内容红细胞渗透脆性实验抗凝全血37 反应地贫 A液上清液 测得 H1混匀地贫 C液测得 H2离心地贫 B液地贫 A液：低渗 NaCl地贫 B液：终止反应地贫 C液：破坏所有 RBC9实验原理 实验结果实验内容红细胞渗透脆性实验H1： 270； H2： 280溶血 %= H1H21.25=77.1%*临床意义 ：正常值 ：溶血 % 60%脆性增加 ：试验结果与正常对照比较，提高0.04%者即有意义， 见于遗传性球形红细胞增多症，自身免疫性溶血性贫血伴球形红细胞增多症，也可见于遗传性椭圆形红细胞增多症和部分遗传性口形红细胞增多症患者。脆性减低 ：见于缺铁性贫血，地中海性贫血，链状细胞贫血，靶形红细胞增多症，血红蛋白增多症，脾切除术后，肝脏疾病，阻塞性黄疸等。 10实验原理 实验结果实验内容珠蛋白基因检测提取 DNA扩增珠蛋白基因（PCR）PCR产物电泳DNA测序
