1、动物细胞与组织 培养技术第一节 概述第二节 动物细胞、组织培养的基本方法 第三节 培养细胞的检测和特性鉴定 第四节 动物细胞体外培养举例 第五节 细胞同步化v 一、动物细胞与组织培养的基本概念 v 二、动物细胞体外培养的特点 v 三、发展历史 v 四、动物细胞的体外培养一般条件v 五、体外培养细胞生物学特性 第一节 概 述 一、基本概念1动物细胞与组织培养 (Cell and Tissue Culture) ：用无菌方法将动物体内细胞或组织取出，模拟体内的生理环境，在体外进行培养，使离体细胞或组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。 动物细胞工程的基础。 v分类：细胞培养Cell Cultu
2、re组织培养Tissue Culture器官培养Organ Culture2、原代培养 (Primary Culture)： 初代培养，直接从机体取出的细胞或组织进行培养的过程。3 继代培养（ Secondary Culture ） ：传代培养，从原代培养的细胞继续转接培养称继代培养 .4、 细胞系 (cell line)： 由原代细胞培养后经初步纯化，获得的以一种细胞为主、能在体外长期生存的 不均一 的细胞群体，一般为有限细胞系。5、 细胞株 (cell strain)：细胞系经过克隆或其他方法获得、由 单细胞形成 的 单一类型 的细胞群体 。有限细胞系 (infinited cell li
3、ne)： 不能连续培养的细胞系 。无限细胞系 (finited cell line)： 能够连续培养的细胞系，大多已异倍化，异倍体核型，或成为恶性细胞。限定性细胞系 ：具有特定实验指标的细胞系。限定性细胞株 ：具有特定实验指标的细胞株。细胞株、细胞系的命名：组织来源，如 BHK(幼地鼠肾细胞 Baby Hamster Syrian Kidney)人名，如 HeLa细胞时间地点，如 S7811细胞系临床疾病类型，如 BALL-1细胞系 (B淋巴细胞急性白血病人白细胞 B Acute Lymphocytic Leukemia )用于生产的动物细胞株原代细胞二倍体细胞融合细胞基因工程细胞转化细胞常用
4、细胞株CHO细胞：理想的真核表达系统，疫苗、蛋白质药物Vero细胞： 非洲绿猴的肾脏上皮细胞 疫苗BHK-21细胞：疫苗、接毒WI-38细胞： Normal Human Fetal Lung Fibroblast 人胚肺成纤维细胞， 有限传代 ， 细胞老化 、癌症研究对照材料、病毒感染材料二、动物细胞体外培养特点v 动物细胞 生长缓慢 ，培养时间长。v 更易受微生物污染 （包括细菌、真菌、病毒、支原体）， 需要 防治污染问题 。v 对培养环境的适应性差，对环境极其敏感。包括 pH值、温度、剪切力v 对营养要求高，除了氨基酸、维生素、盐类、葡萄糖或半乳糖外，一般还需要血清。 v 原代细胞一般繁殖 50代左右退化死亡。总之，动物细胞培养对各方面的要求更高，培养难度更大。形态多种多样：圆形、椭圆形、正方形、柱形、扁平形、梭形、星形和多边形等
