13-寄生虫病的诊断和防控技术.ppt

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1、寄生虫病的诊断和防控技术o 第一节 寄生虫病的诊断技术o 第二节 寄生虫病的控制措施第一节 寄生虫病的诊断技术p 一、消化道与呼吸道寄生虫病的诊断p 二、外寄生虫病的诊断p 三、血液寄生虫病的诊断p 四、组织内寄生虫病的诊断许多寄生虫,特别是蠕虫,多数寄生在宿主消化道及其附属腺体中,而这些寄生虫的虫卵、幼虫、体节甚至成虫都通过粪便排出体外,因此,设法检查粪便可发现病原以确诊。 一、消化道与呼吸道寄生虫病的诊断p 直接涂片法 :取 50%甘油水溶液或普通水 12滴滴于载玻片上,镊取黄豆大小的被检粪块与之混匀,剔除粗粪渣,抹薄涂匀,盖上盖玻片镜检。本法最为简便,但检出率不高。为提高阳性检出率,每个

2、样本应检多片。适用于虫卵数量多时。p 漂浮法 : 应用比重较虫卵大的漂浮液,使蠕虫卵、球虫卵囊等浮于液体表面,易于集中检查。漂浮集卵法对某些线虫卵、绦虫卵和原虫卵囊有很好的检出效果。缺点是高比重的漂浮液易使虫卵和卵囊变形,检查时必须迅速,也可在制片时补加一滴清水。适用于比重小的虫卵。p 沉淀法 : 用水处理粪便,经离心或自然沉淀,使虫卵沉淀集中,更易于检查。 适用于比重大的虫卵。p 锦纶筛兜淘洗法 :适用于宽度大于一定孔径的虫卵 p 虫卵计数:麦氏计数法, EPG(每克粪便中的虫卵数)( 1) 虫卵检查法o 幼虫分离法: 有些寄生虫(如网尾科线虫),其虫卵在新排出的粪便中已变为幼虫;类圆属线虫

3、的卵随粪便排出后,在外界温度较高时,经512小时后,即孵出幼虫。为了提高检出率,常将幼虫从粪便中分离出来进行检查。常用的方法为漏斗幼虫分离法 亦称贝尔曼法( Baermanns technique)。取粪便 1520克,放在漏斗内的金属筛上,漏斗下接一短橡皮管,管下再接一小试管。o 粪便培养法: 圆线虫目所属线虫种类很多,其虫卵在形态上非常相似,很难区别。有时为了区别这些线虫的种类,常将含有虫卵的粪便加以培养,待其中虫卵发育成为幼虫时,再检查幼虫,根据幼虫形态上的差异,加以鉴别。最常用的方法是在培养皿底部加草纸或滤纸一张,而后将欲培养的粪便加水调成硬糊状,塑成半球形,放于皿内的纸上,并使半球形

4、粪球的顶部略高出平皿边沿,使加盖时与皿盖相接触。将此皿置 25 温箱中,注意保持皿内湿度(应使底部的垫纸保持潮湿状态)。经 7天后,多数虫卵即可发育成第三期幼虫,并集中于皿盖上的水滴中。将幼虫吸出置载玻片上,放显微镜下检查。o 毛蚴孵化法: 日本血吸虫( 2) 幼虫检查法(3) 粪便内原虫检查方法o 球虫卵囊检查法,同前 1粪便检查。o 隐孢子虫检查:特殊染色沙黄 -美蓝染色。o 结肠小袋纤毛虫:苏木素或碘特殊染色。二、血液寄生虫病诊断( 1) 蠕虫幼虫的检查 (如丝虫目线虫的幼虫 )直接镜检法 (幼虫多时 )溶血染色法 (幼虫少时 ) 方法是采血于离心管中。加入 5%醋酸溶液以溶血。待溶血完

5、成后,离心并吸取沉淀检查。( 2) 血液原虫检查直接镜检法 :自动物耳静脉或颈静脉采血,将采出的血液滴在洁净的载玻片上,加等量的生理盐水与之混合,覆以盖玻片,立即放显微镜下用低倍镜检查,发现有运动的可疑虫体时,可再换高倍镜检查。由于虫体未染色,检查时应使视野中的光线弱些。涂片染色法 :离心集虫法 : 血液中的虫体较少时离心集虫法其操作过程是,采病畜抗凝血 67毫升,以每分钟 500转的速度,离心 5分钟,使其中大部分红细胞沉降;而后将含有少量红细胞,白细胞和虫体的上层血浆移入另一离心管中,补加一些生理盐水,以每分钟 2500转的速度离心 10分钟。取沉淀物制成抹片,按上述染色法染色检查。此法适

6、用于伊氏锥虫病和梨形虫病。其原理是锥虫和感染有梨形虫的红细胞较正常红细胞的比重为轻,所以在第一次沉淀时,正常红细胞下降,而锥虫和感染有梨形虫的红细胞尚悬浮在血浆中。第二次离心沉淀时,则将其浓集于管底。三、组织或组织液内寄生虫病诊断o淋巴结穿刺、染色检查(泰勒虫柯赫氏蓝体 )o取腹水抹片、染色检查 (适用于弓形虫病 ) o生殖道原体检查法:寄生于生殖道的虫体主要有牛胎儿三毛滴虫和马媾疫锥虫。 牛胎儿毛滴虫存在于病母牛的阴道与子宫的分泌物、流产胎儿的羊水、羊膜或其第四胃内容物中,也存在于公牛的包皮鞘内,应采取以上各处的病料寻找虫体。四、外寄生虫病的诊断(1) 病料的采集寄生于动物体表的寄生虫主要有

7、蜱、螨、虱等。对于它们的检查,可采用肉眼观察和显微镜观察相结合的方法。蜱寄生于动物体表,个体较大,通过肉眼观察即可发现。螨和虱有些个体较小,常需刮取皮屑,于显微镜下寻找虫体或卵。刮取皮屑的方法甚为重要,应选择 患病皮肤与健康皮肤交界处 ,这里的螨较多。刮取时先剪毛,取凸刃小刀,在酒精灯上消毒,使刀刃与皮肤表面垂直,刮取皮屑,直到皮肤轻微出血(此点对检查寄生于皮内的疥螨尤为重要)。在野外进行工作时,为了避免风将刮下的皮屑吹去,可根据所采用的检查方法的不同,在刀上先蘸一些水或 5%的甘油溶液,这样,可使皮屑粘附在刀上。将刮下的皮屑集中于培养皿或试管内,带回供检查。蠕形螨病,可用力挤压病变部,挤出脓液,将脓液摊于载玻片上供检查。

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