1、液相色谱单级质谱测定食品中四种合成甜味剂摘要：采用单级液质联用的方法，建立了食品中安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜四种甜味剂的检测方法。该方法回收率达到95.3%99.2%；最低检测限值分别为安赛蜜 0.05mg/L，糖精钠和阿斯巴甜为 0.1 mg/L，甜蜜素为 0.02 mg/L；相对标准偏差值在2.54%3.87%。 关键词：甜味剂 液质联用 食品 当今，随着社会的发展，人们越来越在意一些高脂、高糖、高热量的传统甜味食品对身体造成的影响，特别是患有糖尿病、高血糖、高血压、肥胖症等疾病的特殊人群。食品甜味剂，因其甜度高、热值低，被应用在食品的加工过程中替代蔗糖，很好地解决了这一问题，如糖精
2、钠、甜蜜素、阿斯巴甜、安赛蜜都是目前市场上食品行业中最为常用的甜味剂。但这些人工合成的甜味剂或多或少对人体都有一定的影响，在国家食品添加剂标准中都有相应的适用范围和限量要求1。 目前，食品中多种甜味剂的检验方法研究较多，主要有液相色谱和液质联用法，其中液质联用的方法多采用串联四级杆液质联用2-3，采用单级质谱检测的也仅局限于单一甜味剂的检测4。本文主要探讨利用单级液质的方法进行多种甜味剂检测方法的研究，从而避免液相色谱检测时存在误判的可能，也避免串联液质投入费用大，消耗气体量大等缺点。 1、材料与方法 1.1 材料、设备与试剂 1525-ZQ4000 型液质联用仪（美国 Waters 公司）
3、； Milli-Q 纯净水系统（美国密理博公司） ；甲醇（HPLC 级） ；乙酸铵（分析纯） ；甜蜜素、安赛蜜、糖精钠（美国 Sigma-Aldrich 公司） ；阿斯巴甜（美国 Supelco公司） 。 1.2 色谱条件 色谱柱为 Symmetry Cl8 （150mm3.9mm i.d.， 5m） ；流动相未甲醇-乙酸胺（0.02mol/L）溶液（体积比为 20：80） ；流速为 1mL/min；色谱的流出组分经一对不锈钢二通阀进行分流.使流出部分进入质谱的流速约为 0.3mL/min：进样体积为 10L。 1.3 质谱条件 负离子模式；离子源温度：95，脱溶剂温度：400，毛细管电压：2
4、.9kV，锥孔电压：30V。脱溶剂氮气流量：400L/小时；锥孔氮气流量：50L/小时；选择特征离子 SIR m/z 162 测量安赛蜜，SIR m/z 178 测量甜蜜素，SIR m/z 182 测量糖精钠，SIR m/z 293 测量阿斯巴甜。 1.4 标准溶液配制 精密称取安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜各 0.1000g，用流动相溶解后移入 100mL 容量瓶中，并入流动相稀释至刻度，即含安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜各 1mg/mL。分别吸取上述四种甜味剂的储备液于同一容量瓶中，用流动相稀释至刻度。配制成安赛蜜浓度为 0.5mg/L，糖精钠和阿斯巴甜浓度为 1.0mg/L、甜蜜素浓
5、度为 0.2mg/L 的混合标准使用溶液。 1.5 样品前处理 液体样品经除气、除醇等处理后，加水定容至适当体积，经 0.45m滤膜过滤。固体样品称重后，加水后超声振荡 20min 后，定容至适当体积，过滤，弃去初滤液，续滤液用 0.45m 滤膜过滤。 2、结果与讨论 2.1 定性实验 用扫描模式（Scan）监测，结果见图 1。可以看出，各质谱图与相应甜味剂的分子结构相匹配。 2.2 流动相的选择 采用不同的流动相配比可以改变四种甜味剂的分离度，当采用Symmetry Cl8 （3.9150mm， 5m）填料色谱柱时，当甲醇：乙酸铵=20：80 时的分离度较好且分析时间较短。如采用梯度洗脱，理
6、论上能达到更好的分离效果和效率，但在实际检测中因平衡时间较长，检测效率不理想。故推荐采取该配比下等度洗脱方式测定四种甜味剂。所得图谱见图 2。 2.3 与紫外检测器的对比 在紫外检测器下，糖精钠、安赛蜜都有较高响应值，但阿斯巴甜和甜蜜素响应值较低，特别是甜蜜素，其在紫外区域吸收低。因此目前文献中采用紫外直接检测甜蜜素的灵敏度都较低，仅为 50mg/L100 mg/L 左右，且干扰因素多5。本实验采用串联紫外检测器和质谱的方法同时采集信号，对比的色谱及选择离子图见图 2，从中可以看出，在紫外色谱图上没有出峰的甜蜜素和出峰很小的阿斯巴甜在选择离子图上都有很好响应。 2.4 方法的线性关系和检出限。
7、 分别配制不同浓度甜味剂标准溶液进样、绘制标准曲线；标准品稀释后以 3 倍信噪比计算最小检出限；称取等量的白酒样品 6 份，进行加标回收实验并计算其相对标准偏差（RSD） ，测定结果见表 1。 3 、结论 本文采用单级液质联用的方法，一次性将糖精钠、安赛蜜、甜蜜素、阿斯巴甜四种甜味剂分离定性定量，既满足了食品检测的需要，也节约了成本，同时使一些旧仪器的利用率得到提高，可以满足日常检测的需要。 参考文献： 1. GB2760-2011 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准 2. 夏于林，李明春，张莹，等. 液相色谱串联质谱法同时测定白酒中 4 种甜味剂方法研究J，中国酿造，2011（3）：156-158 3. 李传慧，李淑娟，安娟，等. 快速分离液相色谱/串联四极杆电喷雾质谱法同时测定食品中多种人工合成甜味剂 J，食品工业科技，2009，30（8）：319-320 4. 徐春祥 秦金平.液相色谱-质谱联用直接测定白酒中的甜蜜素J.食品与发酵工业，2006，32（2）：106-107 5. 尹艳春，李智红. 反相高效液相色谱法同时测定食品中甜蜜素、糖精钠和苯甲酸钠J.理化检验-化学分册，2003，39（8）：469-470
