1、一、填空题1、植物组织培养成功与否，一方面取决于 培养材料本身 的性质；另一方面取决于培养基的 种类 和 成分 。2.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_分生_状态，并形成_细胞团_的现象称为“脱分化“3 植物组织培养技术的三大难题分别为 褐变，污染 、 和 玻璃化 。4 具有防止褐变作用的维生素是_维生素 C_。5 病毒在植物体内的运转方式有 短距离运转 和 长距离运转 两种，前者经过 胞间连丝 向邻近细胞中扩散，速度很慢。后者通过寄主植物 韧皮部的疏导组织 随着营养输送进行转移，速度很快。6.6-BA / NAA 的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进_根_的生长，这时_分化_占主导地位；
2、比值高促进_苗_的生长，这时_分裂_占主导地位 悬浮培养的材料必须达到 悬浮培养物质分散性好 、 均一性好和细胞团大小大致相同 和生长迅速 等三个要求。7、连续培养是指在培养过程中，以不断抽取 悬浮培养物 并注入新鲜的培养基 ，使培养不断得到养分补充，保持其 恒定体积 的培养8培养基的母液一般是配成大量元素，微量元素，维生素、氨基酸和铁盐类存放备用。培养基中组成大量元素的盐类分别是硝酸钾和硝酸铵。9一般情况下，细胞分裂/生长素的比值高，有利于愈伤组织长芽，比值低有利于长根。10在植物的材料灭菌中，酒精的浓度用75%，处理时间一般在15-30s 范围，是靠_c2h6o 高穿透力_杀菌的；升汞的浓
3、度一般用1%2%，处理的时间在210min范围，升汞是靠_hg2+_杀菌的；杀菌剂中的次氯酸钠是靠_Cl2_杀菌的。11培养植物适宜的温度大多在25 度+-2，光照强度在1000-4000lx，光照时间在8-10h。12、进行热处理植物脱毒的温度在_50 度_左右。13、配制螯合态铁盐需要的成分是_7 水硫酸铁_和_Na2-EDTA_。14、培养基中有机态 N 素营养主要是_硝态氮_和_铵态氮_。13 原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交，其融合的方式分为_自发融合_和_诱导融合_两类。14 从再生植株倍性来看，小孢子培养通常产生 单倍体 植株，胚培养通常产生 二倍体 植株， 胚乳培养 通常产
4、生三倍体植株。15.具有防止褐变作用的维生素是_vc_。18.进行植物组织培养最基本的前提条件是 无菌条件 _。16 离体叶片在诱导愈伤组织的培养基上培养，一般从 叶缘 或 叶脉处容易发生愈伤组织。17.某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定，对其灭菌时不能进行高压蒸汽灭菌 ，而要进行 过滤方法灭菌 。18 配制培养基时，一般先配制母液，其目的在于_使用方便_和_用量准确_。19 分生区域内无维管束，病毒只能通过_胞间连丝_传递。20 在无毒苗的组织培养中，外植体的大小与其成活率成_正比_，而与脱毒效果成_反比_。二、单项选择题1、( c )可作为植物外植体的表面消毒剂是 。A. 漂白粉
5、和水 B. 次氯酸钠溶液和聚乙二醇 C. 氯化汞和新洁尔灭 D.酒精和氯化钠2、( b ）大多数植物组织培养最适温度一般为 。A.371 B.262 C.162 D.423、( a ) 在适宜的培养条件下，还可使愈伤组织长期传代生存下去，这种培养称为。 A. 继代培养 B. 再分化培养 C.胚状体培养 D. 驯化4、( b )大多数植物组织培养培养基最适 pH 为 。A.5.0-7.0 B. 5.0-6.0 C. 3.0-4.0 D. 7.0-8.05、( a ）外植体褐变的原因是 。 A.外植体中的多酚氧化酶被激活，使细胞的代谢发生变化。B. 外植体中的琥珀酸脱氢酶被激活，使细胞的代谢发生变
6、化。C. 外植体中的磷酸化酶被激活，使细胞的代谢发生变化。D. 外植体中的三磷酸腺苷酶被激活，使细胞的代谢发生变化。6植物组培初代接种易污染的可能原因bc A 材料过嫩 B 材料过老 C 接种材料过大 D 每瓶接种数量太少7.影响培养基凝固程度因素有_ad_。A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的 PH8愈伤组织不分化、生长过旺、疏松，其原因有cA 糖的浓度过高 B 培养基的渗透压过低 C 生长素和分裂素过高 D 生长素和分裂素过低9有一种植物经初代培养得到株无菌苗，以后按每天继代增殖一次，每次增殖倍数为倍，一年后繁殖苗有cA 3410 株 B 4 312 株
7、 C 310 株 D 412 株10. 下列不属于生长素类的植物激素是_a_。A BA； B NAA； C ZT； D 2.4D11. 植物组织培养可用于：_a_。A 快速繁殖；B 脱除病毒；C 提高品质；D 育种；E 减少品种变异12、诱导试管苗分化丛芽，培养基的调整应 _b_。A 加大生长素的浓度 B 加大分裂素的浓度 C 加活性炭 D 降低盐的浓度。13. 下列不属于 MS 中微量元素的盐是_abd_。A NH4NO3；B KNO3；C ZnSO4.7H2O； D MgSO4.7H2O14. 对生根培养不起作用的激素是：_a_。A GA； B IAA； C NAA； D IBA15、(
8、d )在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是 d 。A、利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株B、利用细胞工程技术培养“番茄一马铃薯”杂种植株C、利用花药离体培养得到单倍体植株D、利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株16、( c ）植物组织培养形成的愈伤组织进行培养， 又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为 。A、脱分化 B、去分化 C、再分化 D、脱分化或去分化17、( b ）下列哪种不是原生质体分离所用的酶_b_。A、纤维素酶 B、淀粉酶 C、果胶酶 D、半纤维素酶18、( c)在花药培养中下列哪种不是花粉的发育过程_c_。A、营养细胞发育途径 B、生殖细胞发育途
9、径C、胚状体发育途径 D、花粉均等分裂途径19、( d )下列哪种在 MS 培养基中不起促进生长作用_d_。A、氨基酸 B、肌醇 C、维生素 D、琼脂20、( b ) 下列技术培育出的新个体中，遗传物质只来源于一个亲本的是 。 细胞组织培养 细胞融合 扦插 诱导产生多倍体 杂交育种 转基因工程A、 B、 C、 D、21、( c )在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是 c 。A、利用花药离体培养得到单倍体植株B、利用细胞工程技术培养“番茄一马铃薯”杂种植株C、利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株D、利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株22、 ( b )下列技术培育出的
10、新个体中，遗传物质只来源于一个亲本的是 。 细胞组织培养 细胞融合 扦插 诱导产生多倍体 杂交育种 转基因工程A、 B、 C、 D、23、( c )下列有关细胞全能性的含义，正确的是 。A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 D、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程 24、(d )下列不属于活性炭在组织培养中的作用是_。A、吸附有毒物质 B、减少褐变，防止玻璃化 C、创造黑暗环境，增加培养基的通透性，利于根的生长 D、增加培养基中的养分25、( a )下列那种
11、不是无性繁殖的器官_。A、种子 B、枝条 C、块茎 D、块根26、( ) 原生质体纯化步骤大致有如下几步 3124 。将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以 500rmin 离心 15min。用吸管谨慎地吸去上清液。将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。将原生质体混合液经筛孔大小为 40100um 的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为 10410 6ml。27、( b ) 植物离
12、体保存的主要步骤是 。离体培养物的保存 离体培养与祛除病原物 种质离体收集 遗传稳定性鉴定A、 B、 C、 D、28、 ( c ) 原生质体纯化步骤大致有如下几步 。将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以 500rmin 离心 15min。用吸管谨慎地吸去上清液。将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。将原生质体混合液经筛孔大小为 40100um 的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度
13、为 10410 6ml。A、 B、 C、 D、29、( a )下列有关细胞全能性的含义，正确的是 。A、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能 B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能 C、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能D、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、死亡的全过程 三、判断题1、 （ t ）胚状体的维管组织与母体结构和外植体的维管组织一般没有联系。 2、 （ f ）培养基当中生长素与细胞分裂素的比例高时，仅形成愈伤组织。3、 （ f ）对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞（或小细胞团）进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术称为植物组织培养技
14、术。4、 （ t ）植物组织与细胞培养方法生产出药品，农药，香料，色素及食品添加剂。5、 （ f ）超低温保存是指在-100温下使细胞代谢和生长处于基本停止的状态，在适宜的条件下可迅速繁殖，生出新的植株，并保持原来的遗传特性。6、 （ t ）FAD 法可显示细胞内脱氢酶的活性，脱氢酶使 FAD 还原生成一种红色的物质，作为检验活细胞的方法 。7、 （ f ）蔗糖可作为渗透性冰冻保护剂。8、 （ f ）一方亲本的细胞核和细胞质分另一方亲本的少量核物质和全部细胞质融合9、 （ t）有些植物对病毒极为敏感，一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特有的病斑，把这种植物称为病毒敏感植物或指示植物。10（
15、 t ）花药和花粉培养可获得单倍体植株。 叫细胞质杂交 。 四、名词解释1、脱分化 一个已停止分裂的成熟细胞转变为_分生_状态，并形成_细胞团_的现象称为“脱分化“2、愈伤组织 植物各器官的外植体在离体的条件下，经细胞脱分化（等一系列过程改变了它们原有的特性）而形成的一种能迅速增殖的不特定结构和功能的细胞团，称为愈伤组织。3、人工种子 工种子是指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功能的物质中，在适宜的条件下发芽出苗的颗粒体。4、胚状体 在离体或活体条件下，通过体细胞经原胚期、球形胚期、心形胚期、鱼雷胚期和子叶期等阶段形成的胚叫体细胞胚状体。5、植物快速繁殖 利用离体培养技术，
16、将来自优良植株的器官、组织和细胞进行离体培养，在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法6、看护培养 把单个细胞置于一块活跃生长的愈伤组织（也称看护愈伤组织，nursecalli）上培养，在愈伤组织和培养的细胞之间用 一片滤纸相隔 。这培养的单细胞长出微小的细胞团之后，再移至琼脂培养基上。7、植物种质保存 利用 天然或人工创造的适宜环境，使个体中所含有的遗传物质保持遗传完整性，有高的活力，能通过繁殖将其遗传特性传递下去。8、连续培养是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种方式。连续培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积的用过的培养基，培养液中的营养物质得到不断补充。五、简答题（一） 、某培
17、养基的配方是 MSBA 1.5 mg/LNAA2.5 mg/LIBA 1.0 mg/L+ 2.5%蔗糖0.7琼脂粉。MS 母液的浓度分别是：大量元素 50 倍，微量元素100 倍，铁盐 20 倍，有机物 100 倍；BA 母液浓度 1.0 mg/ml ，NAA 母液浓度0.5mg/ml，IBA 母液浓度 0.2mg/ml。要配制 800ml 该培养基，需要吸取各种母液各多少 ml？分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克？（要求写出计算步骤）BA=0.8*1.5/1=1.2mlNAA=0.8*2.5/0.5=4mlIBA=0.8*1/0.2=4ml蔗糖=800*2.5%=20g琼脂粉=800*0.7%=5
18、.6gMs 绿色书 23 页表（二） 、如何减轻试管苗玻璃化现象？如何防止外植体的真菌污染？1. （第四章 21 页） （1）利用固体培养方法，增加琼脂浓度，降低培养基中的渗透势，造成细胞吸水阻遏。或提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂，减少培养基中植物材料可获得的水分，这也可以抑制玻璃化的发生。（2） 适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素的浓度。或者，适当增加培养基中 Ca、Mg、Mn、K、P、Fe、Cu、Zn 元素含量，降低 N 和 CL 元素比例，特别是降低胺态氮的浓度，提高硝态氮量。（3）增加自然光照。 因为自然光中的紫外线能促进试管苗成熟。（4）改善培养器皿的气体交换状态封口膜（5）在培
19、养基中添加其他物质。如添加马铃薯汁可降低油菜的玻璃苗的产生频率。2.（第三章 11 页）在接种前要求无菌室内做到用空气循环过滤装置使空气过滤灭菌或通过紫外线照射灭菌外，再利用超净工作台接种前，应开机 15min 以达到空气的充分过滤灭菌。而且接种时严格操作，如在接种前去掉橡皮筋，打开棉塞时动作要轻及去掉瓶塞后瓶子应拿成斜角，最好瓶口放在酒精火焰的前方等等（三） 、简答出一般茎段是怎样选材消毒和接种的？ 选材：较幼嫩的材料，器官的生理状态和发肓年龄，外植体的大小为0.51.0cm(第三章3页)消毒：自来水较长时间冲洗+70%酒精浸泡植物种+无菌水冲洗23次+2%10%NaClO（0.1%HgCl
20、2）12min+无菌水冲洗3次。 （第三章5页）接种：左手拿三角瓶或果酱瓶，用右手轻轻取下封口膜或盖子将三角瓶或果酱瓶的口靠近酒精灯火焰，瓶口稍微倾斜，这样瓶口外部在火焰上旋转灼烧数秒钟，后用镊子将外植体送入瓶中。 （第四章4页）六、论述题为什么茎尖培养可获得无特定病毒植株？怎样获得无特定病毒的试管苗？获得的无病毒苗用一种方法鉴定其真的无特定病毒的植株？1）感染病毒植株的体内病毒的分布并不均匀，病毒的数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎顶端区域的病毒的感染深度越低，生长点则几乎不含或含病毒很少。 2）1.了解植物携带何种病毒，病毒在体内的分布位置 2. 母体植株的选择和预处理 3. 茎尖的剥离
21、4. 脱毒效果检测 3）取培养植株的叶片置于研钵中，加入少量的水和等量的 0.1mol/L 磷酸缓冲液（pH 7.0），磨成匀奖，将其涂抹在指示植株叶片上，在指示植物的叶片撒上金刚砂，通过轻轻摩擦使汁浸入叶片表皮细胞而又不损伤叶片。5 分钟后用清水清洗叶面。将指示植株放于防蚜虫网罩的温室内。然后视其病斑的有无，来判断是否脱除了病毒。请阐述马铃薯脱毒和快繁的程序。为什么试管苗在经过热处理和茎尖培养等方法脱毒后，还需要进行病毒的鉴定? 选择优良母株幼苗，茎尖的cm 小段，冲洗 1h 左右表面消毒，（表面消毒剂、无菌水），在双筒解剖镜下剥去幼叶，露出圆滑的生长点，注射器针头或解剖针，切取带有 12 个叶原基的生长点，接种于培养基中培养。病毒在植物体内分布是不均一的，热处理并不能杀死病毒，只能钝化病毒的活性，使病毒在植物体内增殖缓慢（停止），而失去侵染能力，所以还需要病毒鉴定。
