1、全内反射全内反射 荧光成像荧光成像 基本基本 原理原理 Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF)全内反射荧光显微镜 (TIRFM)目前 用于单分子研究的检测技术主要有两大类：扫描探针 显微技术（ SPM）和光学技术。 其中： SPM原子力 显微技术（ AFM）扫描离子电导 显微技术（ SICM）扫描隧道 显微技术（ STM）光学技术光学显微镜 成像光学 操纵共聚焦荧光 显微技术（ LSCM）扫描近场光学 显微技术（ SNOM）全内反射荧光 显微技术（ TIRFM ）上世纪 80 年代， Axelrod 等 生物物理学家对 TIRFM 技术 及基
2、本原理进行描述，并探索了其 在生物 方面的 应用。发展历程发展历程Axelrod,Julius阿克塞尔罗德（ Axelrod,Julius) 美国生物化学家及药理学家 。 1970年他与卡茨冯奥伊勒共享了 诺贝尔生理学 和医学奖 。 于美国卫生研究院度过其大部职业生涯。他研究药物及激素的作用、神经冲动传播的化学方面，并特别研究松果体的功能。光光 反射和折射示意图反射和折射示意图全内反射示意图全内反射示意图n1n2RefractedTIRn1n2光的反射和折射光的反射和折射Snell定律：当 入射角不断增大，透射角为增大 90时，入射角达到临界角 c。依据 Snell 定律得出：当 入射角继续增大时，光不再透射进水溶液，即发生了 全内反射 。90n1n2TIR实际上 ， 由于光的波动 效应，有 一部分 光的能量会透过临界面渗透到水溶液中，平行 于界面 向水溶液 中传播 ，这一部分透过的能量场则 称之为 “ 隐失波 ” 或 “ 隐失场 ” 。隐失波隐失波90n1n2TIR隐失波
