实时荧光定量 PCR技术原理及其仪器分析PCR 1983年 Cetus公司的 Kary Mullis于 12月16日第一次成功实验发明了 PCR，并于1993年获得诺贝尔化学奖 1995年 Perkin Elmer 公司研制出荧光定量 PCR技术 九十年代中期 PCR临床应用在国内全面展开 1998年 荧光定量 PCR技术开始在中国应用于临床检测PCR之父 Mullis循环次数 DNA的链数1 21 22 22 43 23 810 210 102420 220 1,048,57630 230 1,073,741,824 10亿 PCR循环次数与 DNA产量关系PCR特点：高效扩增、忠实复制实时荧光定量 PCR在 PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个 PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 基线 （ Baseline） 荧光域值 （ threshold） 循环阈值 (Ct)荧光标记与探针类型 水解型探针： TaqMan探针 分子信标 SYBR Green I DNA结合染料 杂交探针 蝎子引物法 LUX引物非 特异性荧光标记：1、 SYBR Green 特异性荧光标记：2、 TaqMan3、 Molecular Beacon
