1、实验常用仪器学（四） PCR仪 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)在 体外 由 引物介导 的 DNA序列酶促合成反应，即体外DNA扩增 技术。穆利斯 K. Mullis1945-，美国 1993年 诺贝尔化学奖基本原理 ： 类似 体内 DNA复制 (合成双链 DNA） - DNA聚合酶 核酸的热变性和退火变性 - 获单链模板退火 - 单链模板与引物结合延伸 DNA新链合成 指数扩增循环多次耐热的 DDDPPCR扩增 No. of No. Amplicon Cycles Copies of Target1 22 43 84 165 326 6420 1
2、,048,57630 1,073,741,7661 cycle = 2 Amplicon2 cycle = 4 Amplicon3 cycle = 8 Amplicon4 cycle = 16 Amplicon5 cycle = 32 Amplicon6 cycle = 64 Amplicon7 cycle = 128 AmpliconPCR技术的主要用途 （一）核酸的微量分析 （二）基因的体外突变，多态性研究（三）目的基因的克隆，序列分析，定点诱变等研究用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础性研究，也可用于疾病的诊断、刑侦鉴定等方面。 PCR扩增条件的设定94 , 300S （ 预变性 ）94 , 30S（ 变性 ）25 40cycles 5565 , 30S 72 , 30120S （ 退火温度，与引物 Tm值有关 ） 72 , 10min （ 延伸时间，与扩增长度有关 ）PCR程序的正确设定决定产物质量模块材质决定着升降温速率快慢各种类型的 PCR仪梯度 PCR仪gradient
