1、第三章 高效液相色谱法 (HPLC)High Performance Liquid Chromatography1234高效液相色谱法是继气相色谱之后， 70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术 .3- 1 高效液相色谱法概述一、定义以高压输出液体为流动相，以小粒径填料填充色谱柱的色谱分析方法。二、 HPLC特点1、高压经典的液相色谱法，流动相在常压下输送，所用的固定相柱效低，分析周期长。而现代液相色谱法中， 流动相改为高压输送 （ 150 350 105 Pa ， 最高输送压力可达 450105 Pa） ;52、高速由于流动相流速高，分析时间大大缩短，几 min、十几 min可完
2、成一个分析任务。HPLC色 谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（ 每米塔板数可达几万或几十万 ） 。3、高效利用 高灵敏度的检测器，检测灵敏度大大提高 。紫外检测器 10-9g荧光检测器 10-11g4、高灵敏度6高效液相色谱7三 、液相色谱分离原理及分类液相 色谱分离的实质是样品分子（以下称溶质）与溶 剂（即流动相或洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。 根据分离机制不同，液相色谱可分为： 液固吸附色谱、液液分配色谱、化学键合相色谱、离子交换色谱以及分子排阻色谱等类型。8四、液相色谱与气相色谱的比较1、 相同点（ 1）基本原理一致： 不同组分在两相中的作用力不同。 （ 2）基本概念一致：基本概念 ： 保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。（ 3）基本理论一致：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致 。92、 不同点由于在液相色谱中以 液体 代替气相色谱中的 气体作为流动相，而液体和气体的有性质本质不同，因此，两种方法也有不同之处：（ 1） 仪器设备和操作条件 不同；（ 2） 应用范围 不同；10
