1、 1 第一章 细胞生物学概述 一、名词解释 1、细胞:是由膜包围着含有细胞核(或拟核)的原生质所组成,是生物体结构和功能的基本单位,也是生命活动的基本单位。 2、 prokaryotic cell:即原核细胞,指没有核膜而只有一个构成核样体的拟核且不进行有丝分裂的细胞。结构简单,种类少。 3、 eukaryotic cell:即真核细胞,指具有真正的细胞核能进行有丝分裂的细胞。结构复杂,种类繁多。 4、细胞生物学:是从细胞的显微、亚显微和分子 3 个水平对细胞的各种生命活动进行研究的学科。 二、选择题 【 A1 型题 】 1、 构成生物体的基本结构和功能单位是 ( ) A 细胞膜 B细胞器 C
2、 细胞核 D细胞 E细胞质 2、 细胞学说的创始人是 ( ) A Hooke B Watson 和 Crike C Schwann 和 Schleiden D Virchow 3、 原核细胞与真核细胞的主要区别在于有无完整的 ( ) A 细胞膜 B细胞器 C 细胞核 D细胞壁 E细胞质 4、 原核细胞与真核细胞共有的细胞器是 ( ) A核糖体 B内质网 C高尔基复合体 D线粒体 E 溶酶体 5、 细胞学说建立于 ( ) A 16 世纪 B 17 世纪 C 18 世纪 D 19 世纪 E 20 世纪 6、 发现并将细胞命名为 “ cell” 的学者是 ( ) A R.Hook B M.Schil
3、eiden C T.Schwann D R.Virchow E R.Remak 7、 M.Schileiden 和 T.Schwann 的伟大贡献在于 ( ) A 发现细胞 B 制造了世界上第一台电子显微镜 C 建立细胞学说 D发现核分裂现象 E 提出 DNA 双螺旋结构模型 8、 发表了生物“中心法则”的学者是 ( ) A J.Watson B M.Schileiden C T.Schwann D F.Crick E M.Meselson 【 A2 型题 】 1、 关于真核细胞的遗传物质,下列哪项叙述有误 ( ) A为多条 DNA 分子 B均分布在细胞核中 C其 DNA 分子常与组蛋白结合形
4、成染色质 D在细胞生命活动的不同阶段有 不同的形态 E载有种类繁多的基因 2、关于原核细胞的遗传物质,下列哪些叙述有误( ) A常为一条线形的 DNA 分子 B 分布在核区 C其 DNA 裸露而无组蛋白结合 D其遗传信息的转录和翻译同时进行 E控制细胞的代谢、生长和繁殖 三、填空题 1、细胞是构成生物体的 和 单位。 2、原核细胞的遗传物质( DNA)有 条,呈 状。 3、真核细胞的遗传物质( DNA)有 条,呈 状。 4、提出 DNA 双螺旋结构 模型的学者是 和 。 5、细胞生物学是从细胞的 、 和 3 个水平对细胞的各种生命活动进行研究的学科。 6、 1944 年, O.Avery 等通
5、过微生物的转化实验证实 DNA 。 7、 R.Feulgan 于 1924 年发明了 染色法,用于检测细胞核内的 。 四、判断题 1、原核细胞与真核细胞的主要区别在于有无完整的细胞膜。( ) 2 2、原核细胞与真核细胞共有的细胞器是核糖体。( ) 3、 构成生物体的基本结构和功能单位是细胞核。( ) 4、真核细胞的遗传物质( DNA)有多条,呈环状。( ) 五、简答题 试述细胞学说的基本观点。 一切生物,从单细胞生物到高等动物和植物都是由细胞组成的;细胞是生物形态结构和功能活动的基本单位广切细胞只能来自原来的细胞。 六、问答题 简述细胞生物学的研究内容和范围及意义。 细胞生物学是生命科学中发展
6、迅速的重要基础学科之一,是从细胞的显微、亚显微和分子 3 个水平对细胞的各种生命活动进行研究的学科。细胞是生命活动的基本单位,细胞生物学在 3 个不同水平上把结 构和功能结合起来,以动态的观点探索细胞的各种生命活动。 在形态方面,除应用光学显微镜技术描述细胞的简单结构外,还采用电子显微镜技术和生物化学方法等精细手段,观察和分析细胞内各部分的超微结构和分子结构。在功能方面,除研究细胞内各部分化学组成和代谢活动外,还把代谢活动和形态结构结合起来探索细胞的各种生命活动的具体反应过程。 细胞生物学的深入研究,有助于阐明生物体的生长、发育、分化、繁殖、运动、遗传、变异、衰老和死亡等基本生命活动的规律。
7、第 二 章 细胞生物学 研究方法 一、名词解释 1、 resolution:分辨力是指显微镜或人眼在 25cm 的明视距离处,能清楚地分辨被检物体细微结构最小距离的能力。能够区分的两点间的距离越小,表示分辨力越高。 2、显微结构:通过光学显微镜所观察到的样品的各种结构,如细胞的大小、外部形态以及细胞核、线粒体、高尔基复合体、中心体等内部构成都属于显微结构。 3、超微结构:也称亚显微结构。指在电子显微镜下所观察到的细胞结构,如细胞核、线粒体、高尔基复合体、中心体、核糖体、微管、微丝等细胞器的微细结构。 4、细胞培养:指活细胞在体外的培养技术,即在无菌条件下,从机体中取出 组织或细胞、模拟机体内正
8、常生理状态下生存的基本条件,让它在培养皿中继续生存、生长和繁殖的方法。 5、原代培养:指从机体组织中取材后接种到培养基中所进行的细胞培养,即直接取材于机体的细胞培养。所形成的细胞称原代细胞,它是在体外培养任何一种体细胞所必须经历的阶段和传代培养的基础。 6、传代培养:指当原代培养的细胞在培养瓶中生长、增殖到一定密度后,一分为二或以其他比例分装或转移到 2 个以上的培养瓶中所进行的再培养。 7、细胞融合:又称为细胞杂交,指细胞彼此接触时, 2 个或 2 个以上的细胞合并成为一个细胞的现象。 8、 cell line :原代培养首次传代成功后,则称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞
9、系;已获无限繁殖能力,能持续生存的细胞系,则称为连续细胞系或无限细胞系。 二、选择题 【 A1 型题】 1、在光学显微镜下所观察到的组织或细胞结构一般称为( ) A显微结构 B超微结构 C亚显微结构 D分子结构 E微细结构 2、研究细胞的超微结构一般要利用下列哪种技术( ) A光学显微镜技术 B电子显微镜技术 C X 射线衍射技术 D离心技术 E荧光显微镜 3、一般显微镜的分辨力数值约为 0.2m,人眼在 25cm 处的分辨力是 0.2mm,所以一般显微镜设计的最高3 放大倍率为( ) A 2000 B 1000 C 100 D 200 E 10000 4、光学显微镜能够分辨出其详细结构的有(
10、 ) A细胞 B线粒体 C核仁 D叶绿体 E包被小泡 5、透射电子显微镜的分辨力约为( ) A 0.2m B 0.2mm C 0.2nm D 0.2 E 0.2cm 6、扫描电子显微镜可用于( ) A获得细胞不同切面的图像 B观察活细胞 C 定量分析细胞中的化学成分 D观察细胞表面的立体形貌 E 都不是 7、适于观察无色透明活细胞微细结构的光学显微镜是( ) A相差显微镜 B 暗视野显微镜 C 荧光显微镜 D偏振光显微镜 E 普通显微镜 8、为什么透射电镜的照片没有颜色( ) A细胞内部结构无颜色,都为灰白色的暗影 B彩色显微照片太昂贵了 C彩色胶片尚未发 明 D照相的底片接受的是穿过样品的电
11、子,而不是决定了颜色的各种波长的光 E照片没处理 9、光学显微镜有一个放大倍数为 40 的物镜和放大倍数为 10 的目镜,成像的总放大倍数是( ) A 40 B 50 C 400 D 450 E 1000 10、适于观察细胞表面及断面超微结构三维图像的仪器是( ) A普通光镜 B荧光显微镜 C相差光镜 D扫描电镜 E透射电镜 11、分离细胞内不同细胞器的主要技术是( ) A光学显微 镜 B电镜技术 C离心技术 D电泳技术 E层析技术 12、利用放射性核素标志物质能使照相乳胶感光的原理来探测细胞内某种物质的含量与分布的方法是( ) A放射自显影技术 B免疫荧光显微镜技术 C免疫电镜技术 D液相杂
12、交技术 E原位杂交技术 13、适于观察细胞内超微结构的显微镜是( ) A透射电镜 B扫描电镜 C荧光显微镜 D倒置显微镜 E相差显微镜 14、直接取材于机体组织的细胞培养称为( ) A细胞培养 B原代培养 C传代培养 D细胞克隆 E细胞融合 15、当体外培养的细胞增殖到一定密度后以 1 2 以上的比例转移到几个容器中进行再培养称为( ) A细胞培养 B原代培养 C传代培养 D细胞克隆 E细胞融合 16、模拟体内的条件使细胞在体外生存、生长和繁殖的过程称为( ) A细胞培养 B原代培养 C传代培养 D细胞克隆 E细胞融合 17、适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是( ) A透射 电镜 B扫描电镜 C
13、荧光显微镜 D倒置显微镜 E相差显微镜 18、电镜标本制备时常用的固定剂是( ) A锇酸 B甲醛 C丙酮 D联苯胺 E过碘酸 19、在差速离心中最先沉降的细胞器是( ) A线粒体 B溶酶体 C核 D氧化物酶体 E内质网 20、从血液中分离收集血细胞一般利用( ) A流式细胞分选仪 B超速离心机 C高速离心机 D低速离心机 E电泳仪 21、从破碎的细胞中分离收集线粒体一般所需的仪器是( ) A流式细胞分选仪 B超速离心机 C高速离心机 D低速离心机 E电泳仪 22、最精密的细胞分离仪器是( ) A电泳仪 B超速离心机 C高速离心机 D低速离心机 E流式细胞分选仪 4 23、细胞原代培养实验中,首
14、先应注意的问题是( ) A无菌操作 B细胞消化时间 C添加培养液的量 D培养液的浓度 E加胰酶前用 PBS 液洗细胞 24、鉴别培养细胞中 的死细胞时常用( ) A甲苯胺蓝 B次甲基蓝 C考马斯亮蓝 D台盼蓝 E甲基蓝 25、形状和大小相同,但密度不同的细胞组分可采用哪种方法分离( ) A差速离心 B密度梯度离心 C浮力密度离心 D凝胶电泳 E双向电泳 26、细胞融合的诱导剂主要有( ) A戊二醛 B TMV(烟草花叶病毒) C亚硝酸 D PHV(植物凝集素) E PEG(聚乙二醇) 【 A2 型题】 1、关于光学显微镜,下列哪项有误( ) A是利用光线照明,将微小物体形成放大影像的仪器 B细
15、菌和线粒体在光镜下能清晰可见 C由机械系统、光学系统和机械装置三大部分构成 D可用于观察细胞的显微结构 E其分辨力由目镜决定 2、关于光镜的使用,下列哪项有误( ) A用显微镜观察标本时,应双眼同睁 B按从低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行标本的观察 C使用油镜时,需在标本上滴上香柏油 D使用油镜时,需将聚光器降至最低;光圈关至最小 E使用油镜时,不可一边在目镜中观察,一边大幅度下降镜筒或上升载物台 3、以下关于透射电镜 的描述哪 条不正确( ) A、其观察样品需做成厚度一般为 40 50nm 超薄切片 B用电子枪发射的高速电子束 (电子流 )代替光学显微镜的照明的光线 C用特殊的电极或磁极 (
16、静电透镜和磁透镜 )代替光学显微镜的聚光镜的作用 D镜筒内为真空环境 E适于观察细胞的内部构造 4、关于扫描电子显微镜,下列哪项有误( ) A 20 世纪 60 年代才正式问世 B景深长,成像具有强烈立体感 C电子扫描标本使之产生二次电子,经收集放大后成像 D适于观察细胞的内部构造 E分辨力为 3nm 左右 5、下面哪 种措施与提高显微镜分辨能力无关( ) A使用放大倍率较高的目镜 B使用折射率高的介质 C扩大物镜直径 D使用波长较短的光源 E都无关 6、以下哪些结构不能在光学显微镜下看到( ) A叶绿体 B微绒毛 C线粒体 D鞭毛 E纤毛 7、光镜同电镜比较,下列各项中哪个是不正确的 A电镜
17、用的是电子束,而不是可见光 B电镜样品要在真空中观察,而不是暴露在空气中 C电镜和光镜的样品都需要 用化学染料染色 D用于电镜的标本要彻底脱水,光镜则不必 E电镜观察的标本须制成厚度仅 50nm 的超薄切片,光镜则不必 8、关于相差显微镜,下列哪项有误( ) A利用了光的衍射和于涉特性 B可使相位差变成振幅差 C所观察的标本要经固定处理 D一般使用高压汞灯作光源 5 E装有环形光阑、相位板和中心望远镜等特殊配件 9、关于荧光显微镜,下列哪项有误( ) A其光源通常为高压汞灯或氙灯 B必须装备为激发滤片和阻断滤片 C根据光化荧光的原理设 计制造的 D可用于观察固定细胞和活细胞 E使用时应在较明亮
18、的环境中进行 10、下列最不可能成为原代细胞培养的细胞来源是( ) A成年鼠脑组织 B活跃生长的恶性肿瘤组织 C胚胎组织 D植物原生质体 E乳鼠肾脏 【 X 型题】 1、关于光学显微镜,下列哪项有误( ) A是利用光线照明,将微小物体形成放大影像的仪器 B细菌和线粒体在光镜能清晰可见 C由机械系统和光学系统两大部分构成 D可用于观察细胞的显微结构 E其分辨力由目镜决定 2、 关于光镜的使用,下列哪项有误( ) A用显微镜观察标本时,应双眼同睁,双手并用 B按从低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行标本的观察 C使用油镜时,需在标本上滴上香柏油或液状石蜡 D使用油镜时,需将聚光器降至最低;光圈关至最小
19、 E使用油镜时,不可一边在日镜中观察,一边下降镜筒或上升载物台 3、关于透射式电子显微镜,下列哪项叙述是错误的( ) A适于观察细胞的外表形貌 B以电子束作为光源 C电子透过标本后在荧光屏上成像 D分辨力较高 E样品要采用有机染料染色 4、关于扫描式电镜,下列哪项有误( ) A 20 世纪 60 年代才正式问世 B景深长,成像具有强烈立体感 C工作原理和光学显微镜相似,但采用电子束照明 D镜筒内为真空环境 E适于观察细胞的内部构造 5、倒置显微镜的特点是( ) A物镜与照明系统位置颠倒 B可用于观察活细胞 C通常采用相差物镜 D装配影像记录设备 E以电子束作为光源 6、等密度沉降方法( ) A
20、用于分离密度不等的颗粒 B介质最高密度应大于被分离组分的最大密度 C介质的梯度要有较高的陡度 D不需要高速度离心和较长时间 E适用于分离纯化细胞 7、差速离心用于( ) A分离细胞核 B分离核糖体 C分离线粒体 D分离细胞中大小有显著差异的成分 E分离非细胞体系 8、以下哪一种媒介或方法可用来诱导细胞融合( ) A电击 B乙二醇 C灭活的仙台病毒 D灭活的新城鸡瘟病毒 E体外细胞培养 9、通过细胞融合技术能够( ) A研究 不同细胞之间的相互作用 B进行体细胞杂交 C研究培育动植物新品种 D进行基因定位 E进行基因功能分析 6 三、填空题 1、细胞是生物学研究中常用的光镜有 、 、 和 、 。
21、 2、普通光镜基本结构主要由 、 和 三部分组成。 3、电子显微镜由 、 、 、 、 五部分构成 。 4、倒置显微镜与普通显微镜的不同在于 。 5、电镜主要分 和 。 6、若用紫外光为光源,光学显微镜的最大分辨力为 ,透射电子显微镜的最大分辨力为 , 扫描电镜的分辨力为 。 7、利用离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有 和 等。 8、光学显微镜的分辨力可达到 ,其计算公式为 。 9、常用细胞和亚细 胞组分测定的方法有 、 、 、 、 、 。 10、可用 技术来研究质膜结构的不对称性。 11、根据培养细胞的来源,细胞培养分为 、 。 12、贴壁生长的细胞具有三个特点: ; ; 。 13、用细
22、胞培养法来研究生命活动规律的局限性是 。 四、判 断题 1、人工培养的细胞中,有接触抑制的现象。( ) 2、在使用光学显微镜时,如果物镜不变,用 l0x 的目镜时的分辨力比用 5x 的高一倍。( ) 3、电镜的波长与电压有关,电压越高,波长越短,分辨力越高。( ) 4、电镜主要分为透射电镜和相差电镜两类。( ) 5、光学显微镜的最高分辨极限受可见光波长( 0.4 0.7m)的限制。( ) 6、由于细胞中可产生自发荧光,因此产生了荧光显微镜。( ) 7、相差显微镜广泛用于观察活细胞及未经染色的生物标本的形态结构。( ) 8、由于电子束的波长比光的波长短 100 000 倍,因而用电子束代替光波,
23、可大大提高显微镜的分辨力。( ) 9、电子束穿透力很弱,用于电镜观察的标本须制成厚度仅 50nm 的超薄切片,要用超薄切片机制作。( ) 10、在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为核糖体、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高尔基复合体,最后为核。( ) 11、差速离心只用于分离大小悬殊的细胞,更多用于分离细胞器。( ) 12、细胞株的扩大培养也需要取材这一过程。( ) 13、培养细胞的“一 代”,表示细胞分裂一次。( ) 14、通常单层培养的细胞保持接触抑制的特性,肿瘤细胞也不例外。( ) 五、简答题 1、简述光镜上调节光线强弱的装置有哪些。 1、光学显微镜上调节光线强弱的装置有反光镜、聚光
24、镜和光阑。 ( 1)反光镜:反光镜是安装在镜台下面、镜柱前方的 面可转动的圆镜。用来调节光线,能将来自不同方向的光线收集起来反射到聚光镜中。 ( 2)聚光镜:聚光镜是位于镜台下方的 组透镜,用以汇集光线使其成束,增强照明度和视野的亮度。 ( 3)光阑:光阑是位于聚光镜底部的 一个圆环状结构,装有多片半月形的薄金属片,叠合在中央形成弧形孔。圆环外源的突起小柄可调节金属片的分开或合拢,作用是调节光线强弱,使物像变得清晰。 2、从光源、透镜、成像和分辨力四方面比较电镜和光镜。 2、电镜和光镜从光源、透镜、成像和分辨力四方面不同。 7 ( 1)光源的不同:光学显微镜利用可见光作为光源,照明部分包括反光
25、镜、聚光镜和光阑,可对入射光线进行集光并调节其强弱。电镜是以电子束代替光源,以一根钨丝作为阴极发射电子,电子受到阳极吸引而加快速度,加速的电子通过阳极的微孔形成电子束,构成照明源。 ( 2)透镜的不同:光学显微镜的透镜由物镜、目镜组成,每种镜头由 2 3 个玻璃透镜构成,由于可见光能在空气中直线前进,所以玻璃透镜可直接在空气中工作。电子显微镜使用产生轴对称磁场的精密线 圈作为电磁透镜,以电磁场透镜代替玻璃透镜,但因为电子撞击空气分子将发生散射而不能直线前进,所 以,镜筒中的空气必须抽出,保持高度真空。 ( 3)成像的不同:光学显微镜是通过物镜和目镜的 组玻璃透镜将标本上的微小物体放大成像。在
26、电子显微镜下,标本通过一个气闸送入真空镜筒,经聚光镜汇聚的平行电子束被物镜、中间镜和 投影镜多 级放大,最后在荧光屏上成像即时观察,或投射到照相底片上成像使底片感光作为永久记录。 ( 4)分辨力不同:光学显微镜分辨力可达 200nm(油镜),电子显微镜分辨力为 0.1 nm。 3、电镜为何要求一定的真空度? 3、如果含有很多的其他分子,会与电子发生碰撞,使电子散射,引起眩光,影响成像质量;碰撞也会使电子束不稳定,产生闪烁现象;灼热的灯丝遇气体也易腐蚀和断裂。 4、电镜为何要有记录系统? 4、因为电镜是电子成像。肉眼无法观察带有“样品信息”的电子束。所以要有记录系统来记录成像结果。 5、荧光显微
27、镜和普通显微镜有什么主要区别。 5、照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上;光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜;有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人的眼睛。 6、简述冰冻蚀刻技术。 6、冰冻蚀刻技术亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出了断裂面的结构。冰升华暴露出标本内部结构的步骤称为蚀刻。蚀刻后,再向断裂面上喷涂一层蒸气碳和铂。然后将组织溶掉,把金属薄膜 剥下来,此膜即为复膜。复膜显示出了标本蚀刻画的形态,可置于电镜下观察。电镜下的影像即代表标本中细胞
28、断裂面处的结构。 7、为什么说细胞培养是细胞生物学研究的最基本技术之一? 7、高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外培养进行观察和研究,则要方便得多,培养中的细胞不受体内复杂环境的影响,人为改变培养条件(如物理、化学、生物等外界因素的变化)即可进一步观察细胞在单因素或多因素影响下的生理功能变化。活细胞离体后要在一定的生理条件下 才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不适就要死亡。所以,细胞培养技术就是选用最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的最基本技术之一。 8、简述细胞培养方法
29、的主要步骤及其应用。 8、体外细胞培养技术的一般过程是:准备工作,包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试。取材:在无菌环境从机体取出某种组织细胞,经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接人培养器血中,这一过程称为取材。如果是细胞株的 扩大培养,则无取材这一过程。培养:将取得的组织细胞接人培养瓶或培养板中的过程称为培养。如进行组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴8 牢在底部,再加入培养基。如进行分散细胞的培养,一般应在接种于培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表
30、示)接种于培养器皿并直接加入培养基。细胞种于培养器皿后,立即放入培养箱中,使细胞尽早进入生长状态。 9、细胞培养应注意哪些问题? 9、体外培养细胞必须注意三个环节:物质营养、生存环境和废物的排除。 体外培养细胞所需的营养是由培养基提 供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基,它含有细胞生长必需的营养成分:但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。 由于血清中含有一些不明成分,对于特殊目的细胞培养是不利的。为此,研究人员正在探索无血清培养细胞的条件,
31、并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节,所以,在无血清培养时仍然需要添加必要的因子,包括促细胞生长因子(如 EGF),促贴附物(如层黏连蛋白)和其他活性物质(如转铁蛋白)。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰,使实验结果更加可靠。 体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种,即 O2 和 CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。 活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中,所以定期更换培养液,对于体外细
32、胞培养也是至关重要的。 六、问答题 1、显微镜的 分辨力能否无线提高?如何提高光学显微镜的分辨能力? 1、分辨力表示的是能够区别两个点间最近距离的能力,所以广值越小,分辨力越高。从分辨力的表达式来看, NA 越大,分辨力越高,或者波长越短,分辨力越高。 当以可见光作光源,玻璃透镜的最大分辨力是多少呢?应从以下几个方面来考虑这一问题。首先应如何尽可能地缩短波长。可见光的波长范围是 400 700nm,而可见光中的蓝色光波长最短,为 450nm,所以光镜使用时应滤去其他杂色光。第二是使 NA 的数值尽可能大,因为最好的玻璃透镜的镜口角是 70,所以 sin 的最大值为 0.94,空气的折光率( n
33、)为 1,因此玻璃透镜的最大数值孔径为 0.94。这样,我们可以计算光镜的最大分辨力了:假定用最好的玻璃透镜,角孔径为 70,用最短的可见光 蓝色光的波长为 450nm,用空气作为光的折射介质,则最大分辨力为 R=0.61 N.A.=0.61 450 0.94=292nm。 光镜中的油镜可用油作为光折射的介质,由于油的折光率为 1.5,所以用油镜时,分辨力 R=0.61N.A.=0.61 450 1.50.94=196nm=0.2m 在光学显微镜中,用紫外光作光源可使分辨率提高到 0.1m。紫外光的波长较短,约为 200 300nm。但是,紫外光是肉眼不可见的,必须通过照相。另外,用紫外光源时
34、需用石英透镜,价格较高。 2、根据所学的细胞生物学知识,论述“克隆羊”多利诞生的基本原理和基本的操作过程及主要技术。 2、基本原理:动物高度分化的细胞核具有全套的个体遗传信息,保持着全能性,有发育为完整个体的潜在能力。 基本步骤: ( 1)取出一只成年母羊的乳腺上皮细胞,在低血清浓度下进行体外培养。 ( 2)取出卵细胞供体母羊的卵母细胞进行去核处理。 ( 3)利用电融合技术使乳腺上皮细胞与去核卵母细胞进 行电融合。 ( 4)将融合细胞在体外培养至囊胚期。 ( 5)将囊胚移植到母羊的子宫内,使其着床和发育,直至生出小羊。 9 主要技术:细胞培养;细胞融合;胚胎培养和胚胎移植。 第三章 细胞的分子
35、基础 一、 名词解释 1、原生质:是生命的物质基础。碳、氢、氧、氮、磷、硫 6 种元素是组成原生质的主要元素。 2、 biological macromolecules:即生物大分子,是指蛋白质、核酸,多糖和脂类分子量巨大,作为生物体内主要活性成分的各种有机分子。 3、核酸:是生物特有的重要的大分子化合物,广泛存在于各类生物细胞 中,核酸上携带有遗传信息。 4、磷酸二酯键:一种化学基团,捐一分子磷酸与两个醇 (羟基 )酯化形成的两个酯键。 5、 peptide bond:即肽键,是由一个氨基酸分子中的羧基与另一个氨基酸分子中的氨基 (或是脯氨酸的亚氨基 )之间,脱去一分子水形成的酰氨键。 二、
36、选择题 【 A1 型题】 1、细胞中的下列化合物,哪些属于生物小分子 ( ) A蛋白质 B糖类 C酶 D核 E以上都不对 2、原生质是指 ( ) A人细胞内的所有生命物质 B蛋白质 C糖类 D无机化合物 E有机化合物 3、细胞内结构最简单,含量最多的化合物是 ( ) A 葡萄糖 B 氨基酸 C 甘油 D H2O E磷酸 4、构成蛋白质分子和酶分子的基本单位是 ( ) A氨基酸 D核苷酸 C脂肪酸 D核酸 E磷酸 5、维持蛋白质一级结构的主要化学键是 ( ) A氢键 B离子键 C疏水键 D肽键 E二硫键 6、组成核酸的基本结构单位是 ( ) A核苷酸 B氨基酸 C碱基 D戊 糖 E磷酸 7、维持
37、多核苷酸链的化学键主要是 ( ) A酯键 B糖苷键 C磷酸二酷键 D肽键 E离子键 8、核苷与磷酸之间,通过什么键连接成单核苷酸 ( ) A糖苷键 B酯键 C氢键 D肽键 E离子键 9、由含氮碱基、戊糖、磷酸 3 种分子构成的化合物是 ( ) A氨基酸 B核苷酸 C脂肪酸 D葡萄糖 E核酸 10、关于核酸,下列哪项叙述是正确的 ( ) A核酸最初是从细胞核中分离出来,因具酸性,故称为核 酸 B核酸最初是从细胞质中分离出来,因具酸性,故称为核酸 C核酸最初是从细胞核中分离出来,因具碱性,故称为核酸 D核酸最初是从核仁中分离出来,因具酸性,故称为核酸 E以上全错 11、下列哪种元素被称为生命物质的
38、分子结构中心元素,即细胞中最重要的元素 ( ) A氢 (H) B氧 (O) C碳 (C) D氮 (N) E钙 (Cn) 12、细胞中的下列哪种化合物属生物小分子 ( ) A蛋白质 B酶 C核酸 D糖 E胆固醇 13、细胞中的下列化合物 中,哪项属于生物大分子 ( ) A无机盐 B游离水 C过氧化氢酶 D胆固醇 E葡萄糖 14、核糖与脱氧核糖的主要区别是在于其分子的哪一 10 位碳原子所连羟基上脱去了一个氧原子 ( ) A第一位 B第二位 C第三位 D第四位 E第五位 15、 DNA 和 RNA 彻底水解后的产物相比较 ( ) A碱基相同,核糖不同 B碱基不同,核糖相同 C糖不同,部分碱基不同
39、D核糖相同,部分碱基不同 E碱基不同,核糖不同 16、下列哪种元素属细胞中 的微量元素 ( ) A钠 (Na) B钾 (K) C磷 (P) D硫 (S) E铜 (Cu) 17、参与构成细胞的下列元素中哪种属宏量元素 ( ) A锌 (zn) B锰 (Mn)C钼 (Mo) D铁 (ye)E钴 (Co) 18、在细胞中,下列哪种元素含最多 (以数目计 )( ) A碳 (c) B氢 (H) C氧 (O) D氮 (N) E钙 (Ca) 19、细胞内结构最简单、含量最多的化台物是 ( ) A氨基酸 B葡萄糖 C甘油 D H3P04E H20 20、构成蛋白质分子和酶分子的基本单位是 ( ) A核苷酸 B脂
40、肪酸 C氨基酸 D磷酸 E乳酸 21、折叠属于蛋白质分子的哪级结构 ( ) A基本结构 B一级结构 C二级结构 D三级结构 E四级结构 22、维持 DNA 分子双螺旋结构的化学键是 ( ) A磷酸二酯键 B糖苷键 C氢键 D离子键 E疏水键 23、下列哪种核酸分子的空间结构呈三叶草形 ( ) A DNA B mtDNA C tRNA D rRNA E mRNA 24、已知一种 DNA 分子中 T 的含量为 10,依此可知该 DNA 分子所含腺嘌呤的量为 ( ) A 80 B 40 C 30 D 20 E 10 【 A2 型题】 1、关于原生质,下列哪项有误 ( ) A是构成细胞的生命物质 B由 C、 H、 O、 N4 种元素构成 C水是原生质中含量最多的成分 D由有机物和无机物组成 E生物大分子都属原生质 2、关于氨基酸, F 列哪项有误 ( ) A一类含有氨基的有机羧酸 B为单性电解质 C是构成蛋白质的墓本单位 D构成蛋白质的氨基酸有 20 余种 E在蛋白质分子中以氨基酸残基形式存在 3、关于细胞中的水分子,下列哪项有误 ( ) A以游离形式存在 B细胞最主要成分 C是细胞代谢活动的介质 D可作为