流式细胞术实验技巧及数据分析上海交通大学医学院史桂英BD公司不同型号流式细胞仪FACSCaliburLSRII FACSAriaFACSCountFACSVantage&DiVaFACSCanto一 流式细胞仪的基本原理*稳定流动*激发光斑*荧光补偿*荧光素选择二 数据分析及开窗FCM原理示意图层流是液体稳定流动的必要条件 ,管道中层流 的形成要满足雷诺数dVRe = 2300， 式中 、 分别为液体的密度和粘滞系数， d和V分别为管道的直径和液体的平均流速。 FCM利用层流技术 ,使细胞流动稳定 ,并具有自聚焦作用 ,为细胞分析分选提供技术保证 . 层流技术液流驱动系统 （示意图）流速与压力的关系服从 Bernoulli方程，即 P=(1/2)V2 (忽略高度的变化 )。改变气压 ,就可获得不同的流速。 低速 高速不同样本速率形成的样本流激发光源与光束成形系统.20um64um32um 0 32um聚焦距离激光束聚焦透镜强度光束成形与细胞受照方式这种椭圆形光斑的检测区保证每个细胞分别受到光照且受检时受到一致的光照 FCM的单细的单细胞照明技术胞照明技术
