1、1实验室中水质微生物的检测与管理摘要：水是人类赖以生存的，所以确保水质安全是异常重要的。我国对对水质微生物样品检测要求也不断加深，本文作者结合工作经验，详细阐述了对微生物实验室样品检测与管理的流程及相关环节。 关键词：水质;微生物;检测;样品采集; 中图分类号：TU991.21 文献标识码： A 文章编号： 1、样品的采集 一般情况下,为保证水样采集,采集的水质监测样品必须有代表性,同一水源、统一时间采集几类检测指标的水样时,应先采集供微生物学指标检测的水样。采样时应直接采集,不得用水样涮洗已灭菌的采样瓶,并避免手指和其他物品对瓶口的沾污。首先水质监测微生物实验室先备齐采集微生物样品的无菌采样
2、玻璃瓶,通常情况下采样瓶需经过 180高温干热灭菌两小时的灭菌消毒处理。采样时不可搅动水底的沉积物。水源水采样点通常应选择汲水处。表层水采集应该在河流、湖泊可以直接汲水的场合。采样时注意不能混入漂浮于水面上的物质。若采集湖泊、水库等具有一定深度的水样时,可用直立式采样器。出厂水的采集点应设在出厂进入输送管道以前处。管网水的采集应注意采样时间。夜间可能析出可沉渍于管道的附着物,取样时应打开水龙头放水数分钟,排出沉积物。采集用于微生物学指标检验的样品前应对水龙头进行消毒。不同的生物检测项目,需要不同的采样方法。 2二次供水的采集应包括水箱(或蓄水池)进水、出水以及末梢水。采集出厂水、管网水水样时,
3、 250 ml 采样瓶内应提前加 0?5 gNa2S2O3 灭菌。自来水采样应采用无菌操作的取样,方法为用火焰在龙头表面烧灼片刻(35 s)或用 75%酒精对其表面进行擦拭消毒,然后放水 510 min,无菌操作采集自来水(手不要接触到无菌瓶口和瓶塞)。井水采样也需要无菌操作来取样,方法为将取水桶洗干净放入井中数分钟(3-5 min),尽量不取表面水,提水后将水灌入无菌瓶中(手不要接触到无菌瓶口和瓶塞,新井要 3个月后采样送检)。 采样完成后应填好现场采样记录表,注明水样编号、采样者、日期、时间及地点等相关信息。还应记录所有野外调查及采样情况,包括采样目的、采样地点、样品种类、编号、数量,样品
4、保存方法及采样时的气候条件等,这些记录带回检测室后交与检测室接样员处。 微生物学指标测定水样应使用玻璃材质的采样容器水样保存和运输,水样的保存应达到:减缓生物或微生物的作用。通常情况下本实验室采用低温冷藏箱来保存水样,水样全部 采集后立即送回实验室。样品装运前应逐一与样品登记表、样品标签和采样记录进行核对,核对无误后分类装入低温冷藏箱中以保证在水样的运输过程中其性质稳定、完整、不受沾 污、损坏和丢失,同时用输过程中要做好安全防护工作,采样容器须有固定措施,防止样品容器倾倒和样品溢出;玻璃容器要防止破裂。冬季应采取保温措施,以防样品瓶冻裂。 2、水质微生物样品的检测及室内质控 3微生物水样采集后
5、送至水质检测室后,同时采样员将样品的相关信息及记录移交给检测室的接样员,接样员对水样粘具有唯一性表示的样品编号,然后将附有样品编号及检测项目的检测任务通知下发至生物检测室,生物检测室接到任务后通知生物检测室相关检测人员进行微生物项目的检测。 生物实验室在水质微生物样品检测前应提前对无菌室进行紫外线消毒处理,一般情况下无菌室消毒需要开紫外灯消毒 30 min,然后关闭紫外灯后对灭菌效果进行无菌验证后方可使用。无菌室的环境监测情况相关检测人员应填写无菌室环境监测记录表。 培养基配置应该以少量勤配为宜,同时应对新配置的培养基利用已知标准菌株进行验证,验证合格后方可使用,检测人员应对培养基配置及验证情
6、况填写培养基配置记录表,同时对标准菌株的保藏和培养以及传种接代情况也要进行记录,以备查阅。相关的培养基和标准菌株的选择如下: 水质微生物样品进到生物检测室后,检测人员应严格参照水质标准1, 5所规定的方法对微生物样品无菌操作进行检测,同时检测的每批样品都要进行培养基空白对照和随机抽机抽取样品做平行样品检测以确保微生物样品检测结果的准确性和可靠性。对检测出来的可疑菌群如大肠菌群则需要进一步的革兰氏染色和继续接种培养观察。水质微生物样品的检验员在实验后应及时做好数据记录,样品培养后的菌落数量、形态及检测其它相关信息如培养温度、培养时间等应及时填写到相关项目的原始记录表中。 4以上检测就要求参与水质
7、微生物样品检测的检验人员应具备一定微生物检测的理论知识、实际操作和分析判断能力,同时应积极参加上级部门组织的培训,加强理论学习,不断提 高检验水平和处理实验结果异常情况的能力。实验室应统一检验方法,按照国家标准进行操作。制订各项规章制度,对各级人员的职责和权限做出明确规定。 为了提高微生物检验结果的可靠性除了检验人员的专业技术、工作经验和仪器设备要求较高以外,还必须加强微生物实验室的质量控制。 水质微生物室质量控制通常有以下 4 种方式: (1)人员比对的方式:在日常工作中,定期或不定期的安排同一检验业务组不同检测人员对同一样品的相同微生物检验项目进行检测。根据不同检测人员检验结果的符合程度和
8、相对偏差范围,及时发现人员工作技能和检测仪器值得肯定和应该改进的部分,从而发现生物检测室不同检测人员的技术素质差异和存在的不足。(2)样品(标本)复测方式:对经常检测的样品如管网水,选择微生物检测结果较稳定、短期内变化不大的检验项目让检验人员进行检测,根据检测的结果与既往检验结果比对,从两次检验结果的符合程度和相对偏差范围,及时发现人员工作技能和检测仪器值得肯定和应该改进的部分,从而发现实验室可能存在的缺陷。该考核方式多用于定性检测试验项目,最好是针对保存时间不长和刚完成检验不久的样品开展样品(标本)复测试验。(3)目击试验方式:指定相关检验人员进行某种样品(或模拟样品)某些(个)检验项目的检
9、验操作,考核者从样品接收开始至检验报告发出自始至终在操作现场观察被考核人员监督工作,目击试验也可采用被考核人5员口头复述检验操作过程及注意事项的形式进行。根据试验操作(或口头描述)的规范性和系统性评价考核成绩。该考核方式重在考核微生物检验人员实验操作过程所掌握的微生物相关理论水平,适用于耗时不是很长的试验项目。(4)盲样考核方式:采用标准品或实验室参考标准品,加入一定干扰物质制备成模拟样品,将模拟样品交由被考核人员限制在一段时间内从其中检测出质量控制考核目的物。这是最传统、室内质量控制经常喜欢采用的考核方式,考核形式接近室间比对质量控制考核。根据检验结果与模拟样品预设结果的符合程度评价考核成绩
10、。 其次对影响检测结果的设备要进行有效控制,定期对微生物检测实验用仪器、设备进行正确维护、校准和质控8,也是水质检测微生物实验室内质控不可或缺的部分。 3、水质微生物样品检测后的处理 水质微生物检测人员应将填好实验结果的原始记录表送交至生物检测室审核,审核后的数据合理无误后交给报告员打印检测报告,报告核准签发后则可向社会出具具有法律效力的检测报告。 水质微生物样品经过检测培养完后,确定检测结果准确无误后即可对水质样品以及相应的培养皿进行清理。对于检测完毕后的水质微生物样品可以进行处理,然后将采样瓶清洗干净、并进行高温干热消毒处理,对于培养后的培养皿和吸取过样品的移液管等进行高温湿热灭菌处理后方可清洗。对用过的实验室应该用消毒液如 5%的甲酚溶液, 75%的酒精,0?1%的新洁尔灭溶液进行熏蒸消毒处理,以备下次检测使用。 4、结论 6供水行业可以说是关乎国计民生,而水质监测则是供水行业的命脉,水质监测微生物实验室样品的检测与管理在整个水质监测中扮演着重要角色,微生物实验室样品从采集到进入微生物实验室检测直至检测完毕后样品的处理整套流程操作直接关系到实验数据的准确性和可靠性,因此,对于水质微生物样品的检测与管理也应该受到同行业相关管理和检测人员的高度重视。
