1、HPLC 法测定聚乙烯滴眼剂瓶中四种抗氧剂的含量摘 要目的： 建立聚乙烯滴眼剂瓶中抗氧剂 1010、抗氧剂 330、抗氧剂 1076、抗氧剂 168 的含量测定方法 方法： 采用 Agilent Eclipse Plus C18 色谱柱（3.5m，4.6X100mm） ；流动相： 甲醇：水（梯度） ；流速 1.5mL?min-1；柱温 40；检测波长为 210nm 结果：抗氧剂 1010、抗氧剂 330、抗氧剂 1076、抗氧剂 168 分别在0.2105g/mL8.420g/mL、0.2228g/mL8.912g/mL、0.2171g/mL8.684g/mL、0.2257g/mL9.028g
2、/mL 的浓度范围内，有良好的线性关系，相关系数均为 0.999。聚乙烯滴眼剂瓶提取方法中的抗氧剂1010、抗氧剂 330、抗氧剂 1076、抗氧剂 168 的平均回收率（n=9）分别为 102.73%（RSD=1.2%） ，100.56%（RSD=1.0%） ，91.67%（RSD=2.0%）和101.3%（RSD=2.5%） 结论： 该方法灵敏快速，操作简便，重复性好，可用于聚乙烯滴眼剂瓶中抗氧剂的质量控制。 关键词HPLC 法；聚乙烯滴眼剂瓶；抗氧剂；含量测定 中图分类号：R927.2 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）12-0113-02 聚乙烯滴眼剂瓶是广泛用于
3、滴眼剂的药品包装容器产品，主要由聚乙烯材料制成，具有质轻、稳定性较好、密封性好、抗冲击力强、耐酸碱侵蚀、常温下不溶于一般溶剂、使用方便等特点1。由于聚乙烯材料在加工的过程中，由于其自身的结构特点，极易被氧化而使其自身降解，失去原有的性质2，所以必须加入一定的抗氧剂，才能抑制氧化，保障正常的加工和生产。国内外对聚乙烯中添加的化学助剂的检测，多采用红外光谱法定性定量分析抗氧剂，而 HPLC 法较少，尤其是所测组分较少。欧洲药典采用甲苯做溶剂回流，再加入甲醇，提取其中的抗氧剂等，采用四氢呋喃等作为流动相，对聚乙烯输液瓶添加的化学助剂采用 HPLC 方法进行检测3，并对抗氧剂的含量进行了严格的限定，由
4、于操作较为复杂，且所用流动相具有较大的毒性和腐蚀性，本法以甲醇和水作流动相，采用 HPLC 法同时测定聚丙烯输液瓶中常用的四种抗氧剂（抗氧剂 1010、抗氧剂 330、抗氧剂 1076、抗氧剂 168）4，对药品的质量研究以及相容性试验等提供参考依据。 1.仪器与试药 对照品和样品的 HPLC 图谱（1.抗氧剂 1010、2.抗氧剂 330、3.抗氧剂 1076、4.抗氧剂 168） 2.方法与结果 2.1 色谱条件 2.2 供试品溶液的制备 将样品剪切成边长 1cm 的碎片（粒料直接取样） ，分别精密称定 4g，放置于烧瓶中，加入甲苯 80mL，持续搅拌，加热回流 1.5h，冷却至 60，在
5、搅拌下加入甲醇 120mL，用 4 号砂芯漏斗过滤。用甲苯与甲醇（4：6）的混合液 25mL 清洗烧瓶和滤渣，将清洗液与滤液合并，并用甲醇稀释至250 mL，摇匀，滤过，即得。 2.3 对照液制备 精密称取抗氧剂 1010、330、1076、168 对照品 20mg 溶于甲醇溶液中，稀释定容至 250mL 作为对照液 A。精密量取对照液 A 5mL 用甲醇稀释至 100mL 即得。 2.4 线性关系 将“2.3”项下对照品溶液，用甲醇分别稀释成浓度为0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、8.0g/mL 的标准工作溶液。在“2.1”色谱条件下，分别注入色谱仪，测定色谱峰面积，以浓度为横坐标，峰
6、面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果显示：抗氧剂 1010 在0.2105g/mL8.420g/mL 的浓度范围内，抗氧剂 330 在0.2228g/mL8.912g/mL 的浓度范围内，抗氧剂 1076 在0.2171g/mL8.684g/mL 的浓度范围内，抗氧剂 168 在0.2257g/mL9.028g/mL 的浓度范围内，有良好的线性关系。 2.5 精密度试验 精密吸取浓度为 2.0 ug/mL 的抗氧剂 1010、330、1076、168 对照液，重复进样 6 次，测定其峰面积，结果抗氧剂 1010、330、1076、168 的RSD 分别为：1.2%，1.5%，1.2%，1.6%。
7、2.6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 20L，分别在 1，2，8，12，24，48h 进样，测定其峰面积。结果抗氧剂 1010、330、1076、168 的 RSD 分别为1.5%，2.0%，1.8%，2.1%，表明溶液在 48h 内基本稳定。 2.7 重复性试验 精密称取同一份样品五份，按“2.2”项下方法制备供试品溶液；在“2.1”色谱条件下，分别注入色谱仪，测定色谱峰面积。结果样品中抗氧剂 1076 的 RSD 为 1.5%。 2.8 回收率试验 取已知含量的聚乙烯样品 4g，置圆底烧瓶中，分别精密加入对照溶液 A 4.0 mL、5.0 mL、 6.0 mL，按“2.2”项下方法制
8、备，在“2.1”色谱条件下，分别注入色谱仪，测定色谱峰面积。结果如表 2： 2.9 检出限与定量限 取“2.3”项下对照液加甲醇稀释测定，记录色谱图，当信噪比 S/N为 3：1 时，抗氧剂 1010、330、1076、168 的最低检出限分别为0.2ng、0.2ng、0.2ng、0.8ng。当信噪比 S/N 为 10：1 时，抗氧剂1010、330、1076、168 的最低定量限分别为0.8ng、0.8ng、0.8ng、2.0ng。 2.10 样品测定 3.讨论 3.1 检测波长的确定 取对照液，按“2.1”项下色谱条件进样，用 DAD 检测器在400190nm 对四个峰进行光谱扫描，结果四个
9、抗氧剂在 200nm 左右有强吸收，越接近 190nm，吸收越强。考虑到流动相中甲醇的干扰，避开203190nm 的波段。在 210nm 处峰杂质少，基线平稳。故确定 210nm 作为检测波长。 3.2 流动相的选择 分别以水：四氢呋喃：乙腈（1：3：6）和水：甲醇（梯度）为流动相，结果表明：水：甲醇（梯度）分离度好，分析时间短，抗氧剂 168不易产生杂峰。故选用水：甲醇（梯度）为流动相。 4.小结 本文测定了一个生产企业的聚乙烯滴眼剂瓶（3 个批次）和一个生产企业的聚乙烯粒料，结果显示有 6 个批次添加了抗氧剂 1076，有一个批次添加了抗氧剂 1010 和 168。本方法灵敏快速，操作简便
10、，重复性好，可用于聚乙烯滴眼剂瓶中抗氧剂的质量控制。 参考文献 1 Triantafyllou V I， Akrida-Demertzi K， Demertzis P G. Astudy on the migration of organic pollutants from recycled paperboard packaging materials to solid food matrices J. Food Chemistry， 2007， 101（4）：1759-1768. 2 谢兰桂，汤龙，孙会敏，等.再生塑料及其检测技术研究进展J.药物分析杂志，2010，30（10）：1985 3 EP.7.0.344 4 朱碧君，胡红刚，李婷婷，等.HPLC 法测定聚丙烯输液瓶中抗氧剂 1010、抗氧剂 1076、抗氧剂 168、抗氧剂 330 的含量J.药物分析杂志，2012，32（3）：416
