1、命题方式： 集体 佛山科学技术学院医学院 20082009 学年第 一 学期医学分子生物学课程期末考试试题 A 卷专业、班级： 护理学本科(07 级) 姓名： 学号： 题 号 一 二 三 四 五 六 总成绩得 分一、最佳选择题（A 型选择题） （每题 1 分，共 20 分）：1. 下列哪种突变可引起读码框移A、转换或颠换 B、颠换 C、连续缺失 3 个碱基 D、缺失 1 个碱基 E、插入 3 个或 3 的倍数个核苷酸 2. 一种生物单倍体所具有的全部基因称为A、信息库 B、基因库 C、基因组 D、基因频率 E、基因数据库3. 质粒的主要成分是A、多糖 B、蛋白质 C、氨基酸衍生物 D、DNA
2、分子 E、脂类4. 原核生物基因的特点是 A、编码区不连续 B、多顺反子 RNA C、断裂基因D、内含子丰富 E、重复序列丰富5. 外显子的特点通常是A、不编码蛋白质 B、编码蛋白质 C、只转录不翻译D、不转录也不翻译 E、调节基因表达6. 人类基因组计划（HGP）正式启动在哪年A、1990 B、1989 C、1953 D、2001 E、19587. 12转基因动物是指 A、把某基因转入动物的某组织细胞 B、 把某基因从一个动物转移到另一个动物C、把致病基因从动物体内转走 D、 某基因转入动物的受精卵中E、 把某基因整合入动物的受精卵中，再导入子宫，从而发育成新个体8. 在已知序列的情况下获得
3、目的 DNA 最常用的是A、 筛选 cDNA 文库 B、 筛选基因组文库 C、 化学合成法D、 聚合酶链式反应 E、 DNA 合成仪合成 9. 人类基因组平均大小是A、1000bp B、 40000bp C、 210 6D、 1.510 9 bp E、310 9 bp共 4 页第 1 页10.在重组 DNA 技术领域所说的分子克隆是指 A、 建立多克隆抗体 B、 建立单克隆抗体 C、 有性繁殖 DNA D、 无性繁殖 DNA E、 构建重组 DNA 分子 11. 在下列各种基因诊断方法中，结果最为准确的是A、基因测序 B、核酸分子杂交 C、PCR D、RFLP E、ASO12. 将目的基因导入
4、病变细胞，通过目的基因非定点整合，使其表达产物而补偿缺陷基因的功能或使原有功能加强的方法是A、基因矫正 B、基因置换 C、基因增补 D、基因失踪 E、基因敲除13. 反义核酸作用主要是A、封闭 DNA B、封闭 RNA C、 降解 DNA D、降解 RNA E、封闭核糖体的功能14.以繁殖 DNA 片段为目的的载体是A、表达载体 B、质粒载体 C、穿梭载体 D、克隆载体 E、基因组 DNA15. 目前基因诊断常用的分子杂交技术不包括哪一项A、Southern 印迹 B、Western 印迹 C、Northern 印迹 D、DNA 芯片技术 E、等位基因特异性寡核苷酸分子杂交16.下列疾病不适于
5、基因诊断A、病毒性肝炎； B、癌症； C、遗传病； D、肺结核； E、水肿17. 决定 PCR 反应特异性和 PCR 长度的物质是A、模板 B、dNTP C、引物 D、缓冲液 E、Taq DNA 聚合酶18. 全世界第一例基因治疗成功的疾病是A、 地中海贫血 B、血友病 C、重症联合免疫缺陷症D、高胆固醇血症 E、糖尿病19.转基因动物时，整合到动物细胞基因组内的是A、病毒 DNA B细菌 DNA C目的基因 DrRNA EmRNA20.直接针对目的 DNA 进行筛选的方法是 A、 氨苄青霉素抗药性 B、 青霉素抗药性 C、 分子杂交 D、 分子筛 E、 电泳 共 4 页第 2 页二、配伍选择
6、题（B 型选择题） （每题 1 分，共 10 分）：A基因矫正 B基因替代 C基因置换D反义核酸技术 E基因敲除1. 对致病基因的异常碱基进行纠正，保留正常部分的技术方法是 A2. 目前基因治疗中最常用的方式是 B3. 用正常的基因原位替换病变细胞内的致病基因的技术方法是 CASouthern biotting B. Northern biotting C. Western biottingD. Genomic PCR E. 原位杂交4. 分析某组织细胞中蛋白质的表达水平时，采用 C5. 分析基因组 DNA 的分子杂交方法 A6. 用来鉴定 RNA 的技术 BA、限制性核酸内切酶 B、DNA
7、连接酶 C、RNA 聚合酶D、反转录酶 E、TaqDNA 聚合酶7. cDNA 第一链合成时需要用的酶 D8. 目的基因与载体形成重组 DNA 需要用的酶 BA质粒 B逆转录病毒 C腺病毒D腺相关病毒 E单纯疱疹病毒9. 目前基因治疗最常用的载体 B10. 基因工程中最常用载体 A三、填空题（每空 1 分，共 10 分）：1. 人类基因组计划的内容包括：遗传图谱、物理图谱_、转录图谱等 4 张图。2. 科学家感兴趣的外源基因又称目的基因 ，其来源有几种途径：化学合成，_cDNA 文库_，基因组 DNA 文库 及 PCR 技术。3. 原核生物的结构基因是_连续的_的，没有间隔序列，真核生物的结构
8、基因是_间断的的。4. PCR 反应体系由模板、_ 引物、dNTP 、_ Taq 酶_、缓冲液、灭菌水和石蜡油组成。5. 双链 DNA 分子作为模板的那条单链称为_模板链/有义链_链，不作为模板的另一条单链称为_编码链/反义链_链。四、名词解释（每题 3 分，共 24 分）：1、基因是遗传的基本单位，编码一条多肽链或 RNA 的一段特定核苷酸序列。2、断裂基因又称不连续基因，在 DNA 分子上基因的编码序列是由不编码序列所隔开的基因。3、外显子即编码序列，出现在成熟 mRNA 分子中的 DNA 序列。4、蛋白质组指由一个基因组，或一个细胞、组织或个体表达的所有蛋白质的集合。5、穿梭质粒既能在真
9、核细胞中转化繁殖又能在原核细胞中转化繁殖的载体。6、分子杂交分子杂交是不同来源的单链核酸通过碱基互补形成杂合双链的过程。 7、基因诊断就是利用分子生物学技术，从 DNA/ RNA 水平检测基因的存在、分析基因结构变异和表达状态，从而对疾病作出诊断的方法和过程。8、基因打靶是指通过 DNA 定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能或表达基因产物。命题方式： 集体 佛山科学技术学院医学院 20082009 学年第 一 学期医学分子生物学课程期末考试试题B 卷专业、班级： 护理学本科(07 级) 姓名： 学号： 题 号 一 二 三 四 五 六 总成绩得 分一、最佳选
10、择题（A 型选择题）：（每题 1 分，共 20 分）1. 构成染色体的基本单位是A、DNA B、核小体 C、双螺旋 D、螺旋管 E、超螺旋管2. 核酸杂交时，探针与待测基因 A、同源 B、重组 C、放大 D、互补 E、交叉3. 原核生物基因的特点是 A、编码区不连续 B、多顺反子 RNA C、断裂基因D、内含子丰富 E、重复序列丰富4. 某识别 6 核苷酸序列的限制性内切酶切割 5AGCTGAATTC3序列后产生A、5突出末端 B、3突出末端 C、5突出末端和 3突出末端D、5突出 2 个核苷酸末端 E、平端5. 下列哪种方法不是目前基因治疗所采用的方法A基因缺失 B基因置换 C基因替代 D基
11、因失活 E免疫调节6. 质粒是细菌染色体外的A、环状双链 DNA； B、线性双链 DNA； C、环状单链 DNA；D、线性单链 DNA； E、环状三链 DNA7. cDNA 文库包含 A、一个细胞全部 RNA 信息 B、一个细胞全部外显子和内含子信息 C、所有非编码序列的信息 D、一个物种全部基因信息 E、一个细胞所表达的 mRNA 信息 8. 人类基因组平均大小是A、1000bp B、 40000bp C、 210 6 bpD、 1.510 9 bp E、310 9 bp 9. 下列哪种方法属于基因转移的化学方法A电穿孔法 B基因枪技术 CDNA 直接注射法D显微注射 EDEAE 一葡聚糖法
12、共 4 页第 1 页10. 真核基因组的特点是A编码区连续 B多顺反子 mRNA C内含子不转录D断裂基因 E外显子数目与内含子数目相等11. 限制性核酸内切酶识别的顺序通常是 A、基因的操纵序列 B、启动子序列 C、S-D 序列D、回文结构 E、长末端重复序列12. 将目的基因导入病变细胞，通过目的基因非定点整合，使其表达产物而补偿缺陷基因的功能或使原有功能加强的方法是A、基因矫正 B、基因置换 C、基因增补 D、基因失踪 E、基因敲除13. 在核酸杂交中，目前应用最为广泛的一种探针是A基因组 DNA 探针 B寡核苷酸探针 CcDNA 探针 DRNA 探针 E克隆探针14. 以繁殖 DNA
13、片段为目的的载体是A、表达载体 B、质粒载体 C、穿梭载体D、克隆载体 E、基因组 DNA15. 在基因治疗时，目前哪一种细胞不能作为靶细胞A淋巴细胞 B肿瘤细胞 C生殖细胞D肝细胞 E造血细胞16. 基因克隆所需的 DNA 载体的最基本性质是A青霉素抗性 B. 四环素抗性 C. 自我复制能力D. 自我表达能力 E. 自我调控能力17. 决定 PCR 反应特异性和 PCR 长度的物质是A、模板 B、dNTP C、引物 D、缓冲液 E、Taq DNA 聚合酶18. 全世界第一例基因治疗成功的疾病是A、 地中海贫血 B、血友病 C、重症联合免疫缺陷症D、高胆固醇血症 E、糖尿病19. 基因剔除的方
14、法主要用来研究A、基因的结构 B、 基因的功能 C、基因的表达 D、基因的调控 E、基因的突变20. 转基因动物时，整合到动物细胞基因组内的是A、病毒 DNA B细菌 DNA C目的基因 DrRNA EmRNA共 4 页第 2 页二、配伍选择题（B 型选择题）：（每题 1 分，共 10 分）A、 95 B、 55 C、 72 D、 65 E、 351. PCR 的变性温度为 A2. PCR 的延伸温度为 CA基因矫正 B基因替代 C基因置换D反义核酸技术 E基因敲除3. 对致病基因的异常碱基进行纠正，保留正常部分的技术方法是 A4. 目前基因治疗中最常用的方式是 B5. 用正常的基因原位替换病
15、变细胞内的致病基因的技术方法是 CASouthern biotting B. Northern biotting C. Western biottingD. Genomic PCR E. 原位杂交6. 用来鉴定蛋白质的技术 C7. 用来鉴定 DNA 的技术 A8. 用来鉴定 RNA 的技术 BA质粒 B逆转录病毒 C腺病毒D腺相关病毒 E单纯疱疹病毒9. 目前基因治疗最常用的载体 B10. 基因工程中最常用载体 A三、填空题（每空 1 分，共 10 分）1. 基因的本质是编码一条多肽链或 RNA 的一段特定_核苷酸_序列，即一个基因一条_多肽链_。2. DNA 分子的突变方式有_错义突变_，_
16、同义突变或无义突变_和移码突变等。3. PCR 的操作过程为：在微离心管中配制反应体系-在_热循环/PCR/基因扩增_仪器中循环扩增-在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中作_电泳_检测。4. 决定蛋白质分离纯化的原则中，首先选用特异性_低_、成本_低_的方法，最后使用费时、成本高的方法。5. 原核生物的结构基因是_连续的_的，没有间隔序列，真核生物的结构基因是_连续的_的。四、名词解释（每题 3 分，共 24 分）1、基因是遗传的基本单位，编码一条多肽链或 RNA 的一段特定核苷酸序列。2、基因组一套完整单倍体的遗传物质的总和称为基因组。真核生物基因组包含染色体 DNA 和线粒体DNA。3、蛋白质组
17、学在整体水平上研究细胞内蛋白质组成及其活动规律的科学。4、质粒真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的环状双链 DNA 分子。5、探针一小段用同位素、生物素或荧光染料标标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸，能与固定在 NC 膜上的核苷酸结合，判断是否有同源的核酸分子存在。 6、基因治疗用正常的基因导入人体细胞，以校正和置换致病基因的一种治疗方法。 7、转基因动物用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内，并能稳定传代的一类动物。8、反义核酸是指与靶基因或其 mRNA 序列互补的 DNA 或 RNA 片段。1.共 4 页第 3 页五、问答题：（每题 5 分， 共 25 分）1 简述基
18、因与疾病的关系。2 影响 DNA 连接效率的因素有哪些?3 决定蛋白质分离纯化方法的原则是什么？4 基因诊断的策略及基本技术是什么？5 基因转移的方法有哪些？六、论述题（11 分）1. 采用图示法及文字描述论述 PCR 的基本原理和控制要点。共 4 页第 4 页 五、问答题（每题 5 分，共 25 分）：1、基因工程技术的基本步骤包括什么？1) 获取目的基因；2) DNA 重组体的构建；3) 将目的基因导入受体细胞；4) 重组体筛选和鉴定：目的基因导入受体细胞后，通过检测与鉴定是否可以稳定维持和表达其遗传特性；5) 基因表达及产物的分离纯化和鉴定。2、 哪些因素影响限制酶活性？1) DNA 纯
19、度；2) DNA 甲基化程度；3) DNA 的分子结构；4) 酶切消化反应的温度；5) 反应系统组成：核酸内切限制酶的缓冲液。3、PCR 反应体系的组成成份有哪些？1) DNA 模板；2) 扩增缓冲液；3) 一对引物；4) 4、4 种 dNTP 混合物；5) Taq DNA 聚合酶；6) 三蒸水。4、基因诊断有哪些优点？1) 针对性强，特异性高；2) 标本用量少，来源广，灵敏度高；3) 稳定性好；4) 可做快速、早期诊断；5) 适应性强，检测范围广。5、基因治疗的策略是什么？1) 基因置换或基因矫正；2) 基因增补或基因添加或基因替代；3) 基因抑制/基因失活；4) 导入免疫基因，免疫调节等；
20、5) 导入自杀基因。六、论述题（11 分）：1、 阐述染色体、DNA 和基因三者之间的关系。染色体是 DNA 和蛋白质结合形成的，当它呈细长的丝状的时候称之为染色质，当它高度螺旋缠绕在一起形成短棒状就称之为染色体；DNA 是由成千上万个核苷酸链接成的长链，一条染色体对应一条 DNA，DNA 上携带有遗传信息；DNA 上携带有很多的遗传信息如果把 DNA 分成很多的小段，有些表达遗传信息，有些则没有，而有遗传信息的片段，或者说有遗传效应的 DNA 片段就称之为基因。染色体、DNA 和基因都是遗传物质。染色体是细胞水平的遗传物质，DNA、基因是分子水平的遗传物质，基因是最小遗传单位。染色体是 DN
21、A 的载体，DNA 是基因的携带者。五、问答题：（每题 5 分， 共 25 分）1. 简述基因与疾病的关系。DNA 转录mRNA 翻译 肽链加工 蛋白质 细胞结构、功能组织器官的生理、病理状态性状的正常、异常正常、疾病大部分疾病，可以在基因中发现病因。基因通过其对蛋白质合成的指导，控制人体的运转。第一类与遗传有关的疾病有四千多种，通过基因遗传获得。第二类疾病是常见病，例如心脏病、糖尿病、多种癌症等，它们是由多种基因和多种环境因素相互作用的结果。基因是人类遗传信息的载体，在基因工作正常的时候，人身体能够发育正常，功能正常。如果一个基因不正常，甚至基因中一个非常小的片断不正常，可以引起发育异常、疾
22、病，甚至死亡基因可以发生变化，有些变化不引起蛋白质数量或质量的改变，有些则引起。基因的这种改变叫做基因突变。蛋白质在数量或质量上发生变化，会引起身体功能的不正常以致造成疾病。2. 影响 DNA 连接效率的因素有哪些?1) 连接方式：粘端优于平端。2) 目的基因与载体的浓度和比例：增加浓度可提高连接效率；目的基因与载体的摩尔数之比大于 1。3) 连接温度与时间：16C 或 4C，2-16 小时。4) 其他因素：连接酶纯度，反应体系中高浓度 EDTA、NaCl、磷酸盐将影响连接酶活性3. 决定蛋白质分离纯化方法的原则是什么？1) 应选择不同分离纯化机理的方法联合使用；2) 应首先选择能除去含量最多
23、杂质的方法；3) 应尽量选择高效的分离方法；4) 首先选用特异性较低、成本较低的方法，应将最费时,成本最高的分离纯化方法安排在最后阶段。3、 基因诊断的策略及基本技术是什么？策略：1) 检测致病基因: 致病基因已找到2) 检测连锁遗传标志: 致病基因未找到 ，但已定位3) 检测表型相关基因：多因素、多基因病4) 定量分析基因表达：没有基因结构变异，但表达发生了改变基本技术：1. 核酸分子杂交技术，2. PCR（聚合酶链反应）技术，3. DNA 测序技术，4. DNA 芯片技术5、基因转移的方法有哪些？1) 物理法：DNA 直接注射、电穿孔、基因枪、显微注射等；2) 化学法：磷酸钙转染、 DEA
24、E-葡聚糖转染、脂质体转染技术等；3) 病毒载体介导：逆转录病毒载体和腺病毒载体、腺病毒相关病毒载体，单纯疱疹病毒载体等；六、论述题（11 分）1、 采用图示法及文字描述论述 PCR 的基本原理和控制要点。变性95C延伸72C退火Tm-55C循环基本原理：类似于 DNA 的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR 由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：变性：模板 DNA 经加热至 93，使模板 DNA 双链或经 PCR 扩增形成的双链 DNA 解离，使之成为单链，以便它与引物结合；模板 DNA 与引物的退火：温度降至 55左右，引物与模板 DNA 单链的互补序列配对结合；延伸：DNA 模板-引物结合物在 Taq DNA 聚合酶的作用下，以 dNTP 为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板 DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链” ，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2-4 分钟，2-3 小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。控制要点：1、引物设计：根据引物设计原则设计合乎要求的引物；2、退火温度选择：选择合适的退火温度。
