1、毕业论文（设计）开题报告鱼安定 MS-222和丁香酚对日本黄姑鱼的麻醉效果研究学 院： 水产学院专 业： 水产养殖年 级：指导教师：学生姓名：学 号：毕业论文（设计）开题报告一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义(一)、国内外研究动态麻醉是通过使用外用试剂或其他方法抑制神经系统导致失去知觉的一种方法。使用麻醉剂的主要目的是在处理和取样时保持鱼体静止，麻醉剂的镇静作用也被应用于鱼的运输、分选及疫苗接种，麻醉剂也被用于降低这些过程中的应激反应。对鱼体麻醉，是进行鱼类标记的前提工作，麻醉剂浓度选择的高低，直接关系到标志对鱼体伤害程度的大小，进而影响到标志放流的成败。世界各国为了恢复业已衰
2、退的海洋渔业资源，优化渔业资源结构，改善海域生态环境，均采取积极的渔业资源养护与栖息地修复改造措施。渔业资源增殖放流是各国普遍采用的有效方法之一。日本黄姑鱼（Nibea japonica ）俗称黑毛鲿，属鲈形目，石首鱼科，黄姑鱼属，日本黄姑鱼种，主要分布于我国的东海、南海和日本南部海域，是我国沿海黄姑鱼6个种之一。日本黄姑鱼具有生长快、抗病力强等优良养殖性状，经济效益好，深受广大养殖户欢迎，有望成为我国重要的新养殖品种之一。在开展增殖和标志放流之前，对日本黄姑鱼进行麻醉尤其重要。而且，鱼类麻醉对活鱼运输具有非常重要的现实意义。有不少国内外学者进行有关麻醉的研究，从不同角度出发，对麻醉剂的种类及
3、作用，麻醉方法等进行不同程度的研究。在水产方面也存在很多相关研究：丁香酚和鱼安定 MS-222 作为常用麻醉剂，相应的研究也就较多。分别研究麻醉剂 MS-222 对半滑舌鳎、大黄鱼、中华鲟等水产动物的麻醉效果，得出麻醉剂的有效浓度等指标有利于此麻醉剂更好地应用于水产动物的活体运输等操作；丁香酚也普遍应用于水产动物的研究，分别有对斑点叉尾鮰、大黄鱼、鲫鱼、鲤鱼、日本沼虾等的麻醉效果研究，给实际运用提供了坚实的理论基础。（2）选题的依据和意义日本黄姑鱼具有生长快、抗病力强等优良养殖性状，经济效益好，但是渔业资源不多。浙江省海洋研究所已突破人工繁育技术，为增加海域资源，每年都会进行增殖放流，以更好地
4、了解日本黄姑鱼的生活习性以及洄游路线。鱼体麻醉是增殖放流的前提工作，选择合适的麻醉剂有利于放流工作的顺利完成。鱼安定MS-222和丁香酚是常用麻醉剂中的两种。MS-222的化学名称为烷基磺酸盐同位氨基苯甲酸乙酯,俗称TS-222 Sandoz, Tricain, T ricaine Methanesu lfonate, Metacaine 及Metacaine Methanesu lfonate,鱼静安等。为白色微细粉末状晶体,分子式C10H15NO5S,分子量261.3。溶解度约11%,易溶于水,水溶液为无色澄清酸性液体,见光易变成黄褐色。145150摄氏度下会熔化, 加热至103摄氏度时,
5、重量损失不超过0.5%,水溶液煮沸稳定性良好。MS-222进入鱼体后,主要积聚在脾、肝脏等器官,在肌肉中含量甚微,在清水中极易从鱼体转移到水中。它对水产动物麻醉作用见效快、复苏时间短、安全性高,对处理过的水产动物及人体接触都无害。运输时MS-222能降低鱼体氨的排放 。丁香酚的化学名是22甲氧24丙烯基酚。它是黑棕色的液体,是从丁香树的花朵、茎和叶中提取的,它的有效成分是丁香子酚,占丁香酚重量的70%90% 。丁香酚及代谢物能够快速的从血液和组织中排出,不会诱发机体产生突变物质,价廉易得,对人体健康无影响。丁香酚能够同时满足活鱼运输的安全性、高效性和低成本的要求,是近年来受到广泛关注的一种水产
6、用麻醉剂。鉴于这两种麻醉剂的优点，本实验决定采用它们进行研究，通过测定不同的参数指标，以期确定对日本黄姑鱼最为有利的一种，提高标记工作的效率以及活鱼运输的成活率。二、研究的基本内容，拟解决的主要问题（一）研究的基本内容1、比较两种麻醉剂的麻醉效果，选择出最经济可行的麻醉剂；2、研究鱼安定 MS-222 和丁香酚对日本黄姑鱼的麻醉效果； 3、测定两种麻醉剂的有效浓度、麻醉剂对呼吸频率的影响、麻醉剂不同药浴时间对鱼体复苏的影响和空气暴露时间对深度麻醉鱼体复苏的影响，并提出在日本黄姑鱼实际运输操作中的可行性建议。（二）拟解决的主要问题1、确定对日本黄姑鱼实施麻醉的最经济且有效的麻醉剂；2、开展实验研
7、究，掌握鱼安定 MS-222 和丁香酚对日本黄姑鱼的麻醉效果；三、研究步骤、方法及措施（一） 试验场所浙江省海洋水产研究所西轩试验场综合实验室。（二） 试验容器200L 塑料圆桶 20 只，实际蓄水 150L；5L 塑料桶 6 只。（三） 试验用鱼取自西轩试验场的人工繁育的日本黄姑鱼幼鱼，鱼体规格 8.511.5cm。选择体色正常、健壮无伤、摄食正常、大小均匀的幼鱼 1000 尾用于试验。（四） 试验环境采用 300500LX 的天然漫射光照，各试验桶受光一致。24h 不间断充气，由总水管通过分水器至各试验桶。实验沙滤水再经 300 目以上过滤，每日换水 100%150%。（五） 试验用饵料日
8、本产“鱼宝牌”稚鱼 2#配合饲料。（六） 试验设计1、麻醉剂有效浓度的测定Marking等(1985)认为理想的麻醉浓度的标准为3 min之内麻醉， 5 min之内苏醒。故本实验有效浓度定义为：鱼体在麻醉剂溶液中，3 min之内达到4级麻醉状态， 5 min之内苏醒恢复,并且成活率为100% 时的浓度。实验设计10个MS-222质量浓度梯度，分别为30、35、40、45、50、55、60、70、80、90mg/L，8个丁香酚质量浓度，分别为2.5、5、10、20、30、40、50、60mg/L，充分搅拌均匀后放置10 min，每个梯度设计5尾实验鱼。当鱼体麻醉程度达到4期时，记录入麻时间，然后
9、立即从麻醉剂中移出，放入清洁海水中复苏，记录复苏时间和成活率。2、麻醉剂对呼吸频率影响的测定呼吸频率为单位时间内鳃盖的张合次数。由于高浓度麻醉剂溶液中鱼体的入麻时间较短，各期的呼吸频率很难计数,但在低浓度溶液中鱼体达到最终麻醉状态时，呼吸频率波动幅度小且麻醉状态持续时间长，能稳定测定。故实验测定的是在低浓度下鱼体达到最终麻醉状态下的呼吸频率。将鱼放入清洁海水中，稳定10min 后，计数呼吸频率作为初始呼吸频率，然后转入麻醉剂溶液中，测定最终麻醉状态下的呼吸频率。实验设计8个MS-222质量浓度梯度（30、40、45、50、55、60、70、80mg/L） ，和8个丁香酚浓度梯度（2.5、5、1
10、0、20、30、40、50、60 mg/L） ，每个浓度试验用鱼5尾，每尾重复测定5次，计算平均值作为鱼在该麻醉状态下的呼吸频率。3、不同药浴时间对鱼体复苏的影响在有效浓度范围内，每种麻醉剂取3个浓度梯度，MS-222：40、50、60mg/L ，丁香酚：20、30、40mg/L,在不同浓度下药浴不同时间，记录复苏时间和成活率。4、空气中暴露时间对深度麻醉鱼体复苏影响的测定将鱼体（5尾）分别放入40、50、60mg/L的MS-222溶液和 20、30、40mg/L 的丁香酚溶液中麻醉5 min，然后从麻醉液中移出，用湿毛巾包裹鱼体中后部，分别在空气中暴露 0 min，3 min，6 min，9
11、 min，12 min，15 min，18 min，21 min或0min，2min，4min，6min，8min，10min，12min，14min后进行复苏，测定复苏时间，每个暴露实验组用鱼5尾。4、参考文献1 张丽, 汪之和. MS-222 对大黄鱼成鱼麻醉效果的研究 J. 湖南农业科学. 2010(18).2梁君, 王伟定 , 林桂装, 徐开达 , 郭爱.浙江舟山人工生境水域日本黄姑鱼和黑鲷的增殖放流效果及评估,中国水产科学,2010(05).3 许源剑. 日本黄姑鱼的研究进展J. 现代渔业信息. 2010(05).4 庄平, 徐滨, 章龙珍, 冯广朋, 陈丽慧.MS-222 和丁香酚
12、对中华鲟幼鱼耗氧率与排氨率的影响 J. 中国水产科学. 2009(04).5柳旭东, 王际英, 张利民, 王世信, 黄炳山. 麻醉剂 MS-222 及其麻醉效果的影响因素J水产科技情报, 2009,(02). 6安丽娜, 董在杰. 鱼类麻醉及其方法J 科学养鱼, 2008,(06).7 刘长琳, 陈四清 , 何力, 庄志猛, 宋宗诚. MS-222 对半滑舌鳎成鱼的麻醉效果研究J. 中国水产科学. 2008(01).8 赵艳丽, 杨先乐, 黄艳平, 吴寅. 丁香酚对大黄鱼麻醉效果的研究 J. 水产科技情报. 2002(04)9 王波, 张锡烈, 曲秀家, 阮树会, 曲永祺. 日本黄姑鱼的生物学
13、特性及苗种生产技术 J. 海洋水产研究. 2002(04).10 GUO F C, TEO L H, CHEN TW. Effects of anaesthetics on the water parameters in a simulated transport experiment of platyfish, Xiphophorusm aculatus (Guenther) J . Aquaculture Re2search, 1995, 26 (4) : 2652271.五、研究工作进度：1、2011.06-2011.07，查阅资料与资料整理；2、2011.08-2011.11，根据制定方案进行实验；3、2012.01-2012.04，形成论文初稿；4、2012.05，论文修改及定稿。六、教研室评议意见： 教研室（系）主任： 年 月 日七、院领导审核意见：1通过； 2完善后通过； 未通过 负责人： 年 月 日
