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,,临床检验基础,第五章 粪便和分泌物检验,第一节 粪便检验,,第五章 粪便和分泌物检验,,1,标本的采集与运送,,2,显微镜检查,,3,一般性状检查,隐血试验,4,,其他检查,粪便分析工作站,教学目标,1、掌握隐血试验原理、方法及意义粪便细胞、微生物、寄生虫、原虫的显微镜检查
2、熟悉理学检查、食物残渣、结晶及其他检查
3、了解粪便检验目的及病理情况下粪便成分改变,第一节 粪便检验,,(一)粪便的组成
(二)粪便检查的主要目的
(三)标本的采集
(四)标本的处理,一、粪便标本的采集与处理,一、粪便标本的采集与处理,(一)粪便的组成,,吸收一部分营养物质,排出食物残渣,第一节 粪便检验,,,,,,,,,,肠道菌群,无机盐和水,未消化的食物残渣,消化道分泌物和有形成分,成分,,¾是水, ¼是固体成分
肠道细菌:主要为大肠杆菌、厌氧菌、肠球菌
消化道分泌物(胆色素、黏液)和有形成分(肠壁脱落的上皮细胞 ),(一)粪便的组成,第一节 粪便检验,,1、了解消化道有无感染、出血、恶性肿瘤等。
2、根据粪便的性状与组成了解胃肠道和肝胆系统的功能状况。
3、检查肠道致病菌,协助诊断肠道传染病。
4、粪便隐血试验可作为消化道恶性肿瘤筛检试验。
5、根据粪便的颜色、粪胆素的检查,有助于鉴别黄疸的类型。,(二)粪便检查的主要目的,一、粪便标本的采集与处理,第一节 粪便检验,,1、常规检查标本:常规检查包括颜色、性状和显微镜检查,应采集新鲜标本,选择含有异常成分的粪便,如黏液或脓血等部位;外观颜色无异常的粪便则必须从其表面、深处及末端等多处采集。一般采集3g~5g粪便送检。
2、寄生虫检查标本:原虫和某些蠕虫有周期性排卵现象,当发现寄生虫或虫卵时,应连续送检3d,以免漏诊。,(三)标本的采集,一、粪便标本的采集与处理,第一节 粪便检验,,3、化学隐血试验:试验前3d禁食肉类、动物血和某些蔬菜等,并禁服铁剂及维生素C等。
4、脂肪定量试验:先定量服食脂肪膳食,每天50g~150g,连续6d,从第三天起开始采集72h内的粪便,将采集的标本混合称量,并采集60g粪便送检。
5、粪胆原定量试验:应连续采集3d粪便标本,取约20g送检。
6、其他:无粪便而又必须检查时,可经直肠指诊或采便管采集标本。,(三)标本的采集,一、粪便标本的采集与处理,第一节 粪便检验,(三)标本的采集,一、粪便标本的采集与处理,第一节 粪便检验,寄生虫检查粪便标本采集要求,,,置于焚化炉内进行焚化处理,,,浸入5%甲酚皂溶液24h或0.1%过氧乙酸12h,处理后的粪便倒入厕所。用过的载玻片浸入0.5%过氧乙酸消毒过夜,煮沸消毒,清洗干净备用。,容器为玻璃、瓷器,容器为塑料,,,一、粪便标本的采集与处理,(三)标本的处理,第一节 粪便检验,,(一)量
(二)外观:颜色性状
(三)气味
(四)寄生虫
(五)结石,二、一般性状检查,第一节 粪便检验,,粪便量的多少与人体的进食量、食物的种类及消化器官的功能状态有直接的关系。
进食粗粮或多食蔬菜者:粪便纤维含量高而粪便量多;反之,进食细粮及肉食者,粪便细腻而量少。
健康成人每日排便一次,粪便量约100g~300g。
病理情况:粪便的量、排便次数和性状等可不同程度改变。,二、一般性状检查,(一)量,第一节 粪便检验,量增加的临床意义:
缓泻药滥用、分泌性腹泻、吸收障碍、碳水化合物摄入增加、脂肪痢、素食饮食
量减少的临床意义:
感染性腹泻、炎症性肠病、摄入增加(肉类、蛋白质)、综合征(肠易激综合征、吸收障碍综合征),(一)量,二、一般性状检查,第一节 粪便检验,(二)外观(颜色和性状),正常成人粪便:
黄色或棕黄色,质软,成形便(因含粪胆素而呈黄褐色)
婴儿粪便:
- 黄色或金黄色糊状便(因含胆绿素未转变成胆红素而呈黄绿色或金黄色糊状)
病理情况下可有不同的变化,二、一般性状检查,第一节 粪便检验,正常粪便颜色和性状,成人:黄褐色柱状软便,婴儿:黄色糊状,二、一般性状检查,第一节 粪便检验,二、一般性状检查——颜色,第一节 粪便检验,二、一般性状检查—— 性状,第一节 粪便检验,二、一般性状检查,(三)气味1、健康人粪便有一定臭味:经细菌作用后,蛋白质分解产生吲哚、硫醇、粪臭素、硫化氢、靛基质等很多有臭味的物质
2、肉食者:含大量蛋白质而使臭味强烈3、素食者:臭味相对较淡4、慢性肠炎、胰腺疾病、消化道大出血、结肠或直肠溃烂:多因未消化的蛋白质发生腐败而致粪便有恶臭5、脂肪及糖类消化或吸收不良:由于脂肪酸分解及糖的发酵,可致粪便有酸臭味6、阿米巴肠炎:粪便呈鱼腥臭味,第一节 粪便检验,二、一般性状检查,(四)寄生虫1、肉眼分辨的较大虫体:蛔虫、蛲虫、猪肉绦虫、牛肉绦虫、阔头裂节绦虫等2、将粪便过筛冲洗后:可发现钩虫、鞭虫等细小虫体3、服驱虫剂后:查有无虫体4、驱绦虫后:寻找头节,第一节 粪便检验,二、一般性状检查,(五) 结石1、 最重要且最多见的是胆石,另外还有胰石、肠石和粪石。2、 体积较大者肉眼可见,较小者需用铜筛淘洗粪便后仔细查找才能检出。,第一节 粪便检验,三、显微镜检查 涂片镜检法,(1)直接涂片镜检法:
(2)沉淀镜检法:
(3)浮聚镜检法 :,第一节 粪便检验,涂片镜检法,涂片镜检法,三、显微镜检查,最常用方法:生理盐水涂片法低倍镜浏览全片:注意观察有无寄生虫、原虫及其包囊等
高倍镜:寻找、观察和鉴定病理性成分的形态结构,要观察10个以上的高倍视野
报告方式:,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,,,,,白细胞,细胞,吞噬细胞,上皮细胞,红细胞,,肿瘤细胞,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(一)细胞
1、白细胞
正常粪便偶见:主要是中性分叶核粒细胞。
肠道炎症:增多,<15个/HP,分散存在,数量与炎症轻重程度及部位相关。
小肠炎症:白细胞均匀混合于粪便中,细胞形态难以辩认。
细菌性痢疾、阿米巴痢疾和溃疡性结肠炎:大量成堆出现,伴脓细胞。
过敏性肠炎和肠道寄生虫感染:较多的嗜酸性粒细胞,伴有夏科-莱登结晶。,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,过敏性肠炎嗜酸性粒细胞增多,(一)细胞
1、白细胞,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(一)细胞
2、红细胞
正常粪便中无红细胞
红细胞增加:下消化道炎症或出血溃疡性结肠炎、急性血吸虫病、结肠癌、直肠癌、直肠息肉、细菌性痢疾、阿米巴痢疾、痔疮出血及其它出血性疾病等
细菌性痢疾:以白细胞为主,红细胞形态正常,常散在分布
阿米巴痢疾:红细胞多于白细胞,且成堆出现伴形态破碎
炎症:红细胞常伴白细胞出现
上消化道出血:红细胞常被胃肠道中的消化液消化破坏,显微镜检查常阴性,可通过隐血试验证实,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(一)细胞
3、吞噬细胞
吞噬细胞常伴大量脓细胞出现在细菌性痢疾粪便中
细菌性痢疾:常见较多的巨噬细胞;吞噬细胞可辅助诊断急性细菌性痢疾
急性出血性肠炎:可见吞噬细胞
溃疡性结肠炎:偶见吞噬细胞,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(一)细胞
4、上皮细胞
正常粪便中少见,炎症时可
大量出现,并可见细胞退行
性变
正常粪便:很难发现
结肠炎症:上皮细胞数量增多坏死性肠炎、霍乱、副霍乱、伪膜性肠炎等,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(一)细胞
5、肿瘤细胞,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,第一节 粪便检验,,,,,寄生虫卵,病原微生物,细菌,真菌,原虫滋养体和包囊,三、显微镜检查,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(二)病原微生物
1、寄生虫卵
正常人粪便没有虫卵,粪便检查是识别寄生虫(卵)最直接最可靠的方法
肠道寄生虫感染:涂片中可出现相应的虫卵,粪便中常见的寄生虫卵:蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵、蛲虫卵、血吸虫卵、肺吸虫卵、华枝睾吸虫卵、姜片虫卵、绦虫卵等, 最少观察10个低倍视野,以低倍镜所见虫卵的最低和最高数值报告。
常用方法:
饱和盐水漂浮法、离心沉淀法、静置沉淀集卵法,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(二)病原微生物
2、原虫滋养体和包囊
(1)溶组织阿米巴:新鲜粪便的脓血黏液部分→直接涂片检查滋养体,碘液染色检查包囊,阿米巴滋养体,阿米巴包囊,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(二)病原微生物
2、原虫滋养体和包囊
(2)蓝氏贾第鞭毛虫:寄生于小肠,旅游者、男性同性恋者、胃切除者、胃酸缺乏者和免疫功能低下者易感,可引起慢性腹泻。,蓝氏贾第鞭毛虫,蓝氏贾第鞭毛虫包囊,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(二)病原微生物
2、原虫滋养体和包囊
(3)隐孢子虫:
条件感染性原虫
引起严重腹泻
儿童和免疫功能缺陷患者,尤其是艾滋病患者
列为艾滋病患者的重要检查项目之一
粪便常规直接涂片
金胺-酚-改良抗酸染色法,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(二)病原微生物
2、原虫滋养体和包囊
(4)人芽囊原虫 :
寄生在高等灵长类动物和人类消化道的机会致病性寄生原虫
人芽胞子虫与白细胞及原虫包囊形态鉴别:
破坏试验:用蒸馏水代替生理盐水涂片迅速镜检,人芽胞子虫遇水即破坏消失,而白细胞与原虫因不易破坏仍可看见,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(二)病原微生物
3、细菌
(1)正常菌群与菌群失调
成人粪便:
主要菌群:大肠埃希氏菌、肠球菌和厌氧菌,约占80%
少量菌群:产气杆菌、变形杆菌、芽孢菌及酵母菌等
少部分:致病菌,(2)霍乱弧菌初筛:
米泔样粪便:生理盐水悬滴检查,加入霍乱弧菌抗血清,观察是否制动试验阳性
粪便粘液部分:涂片染色后,油镜观察。革兰阴性红色鱼群样排列,逗点状或香蕉样形态的弧菌,应及时报告并培养和鉴定,霍乱弧菌,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(二)病原微生物
4、真菌
粪便中常可见到酵母菌,成卵圆形,其排列因芽生增殖呈出芽或短链状
正常粪便中霉菌少见,应排除容器污染或粪便在室温下显露过久污染所致
霉菌常见于应用大量抗菌素的肠道菌群失调,引起霉菌性感染,霉菌,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,(三)结晶
正常粪便结晶:
可见到少量磷酸盐结晶、草酸钙结晶和碳酸钙结晶,一般没有临床意义,草酸钙结晶,磷酸盐结晶,病理性结晶:
夏科-雷登结晶:阿米巴痢疾、钩虫病及过敏性肠炎的粪便
血晶:胃肠道出血后的粪便
脂肪酸结晶:阻塞性黄疸的粪便,夏科-雷登结晶,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,(四)食物残渣
正常情况:仅见到无定形的细小颗粒残渣,偶见少量脂肪小滴和淀粉颗粒。
食物消化不完全时:不同类型的食物残渣
1、淀粉颗粒
2、脂肪
3、肌肉纤维
4、结缔组织
5、植物纤维及细胞,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,第一节 粪便检验,三、显微镜检查,白细胞,小结:粪便显微镜检查所见,第一节 粪便检验,四、隐血试验(OBT),白细胞,隐血:消化道出血量少于5ml,肉眼及镜检不能发现粪便内
的血液。
隐血试验:通过化学或免疫学等方法来证实隐血是否存在
检测方法:化学法-邻甲苯胺法
干化学试带法
单克隆胶体金试带法,第一节 粪便检验,四、隐血试验(OBT),白细胞,(一)化学法-邻甲苯胺法
检测原理:血红蛋白含有类似过氧化物酶的作用,能催化过氧化氢生成新生态氧,氧化色原物而呈色。呈色的深浅可反映血红蛋白量(出血量)的多少。
检测方法:用竹签挑取少许粪便于滤纸片上,滴加邻联甲苯胺冰乙酸液2~3滴,再加H2O2(1mol/L)2~ 3滴,于标本上立即观察结果,报告。,第一节 粪便检验,四、隐血试验(OBT),白细胞,(一)化学法-邻甲苯胺法
结果观察:(-)2′后仍不显色
(+)10S后由浅兰渐变深兰
(++)初显浅兰褐色渐变成明显兰褐色
(+++)立即呈现兰褐色
(++++)立即呈现黑兰色
常用方法:
邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、愈创木酯法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法等,第一节 粪便检验,四、隐血试验(OBT),白细胞,(二)免疫法
主要方法:
酶联免疫吸附法
胶体金法
免疫斑点法
胶乳凝聚法
反向间接血凝法等,第一节 粪便检验,,1,试验前3天必须禁食动物血、肉、肝,可致假阳性。禁服铁剂、维生素C后者可致假阴性。,,2,H2O2最好新鲜配制,,3,,4,每天做阳性对照和阴性对照,四、隐血试验(OBT) 质量保证,所用的器具要清洁,第一节 粪便检验,(四)方法学评价,四、隐血试验(OBT),第一节 粪便检验,,(五)参考值及临床意义,四、隐血试验(OBT),参考值:阴性
临床意义:粪便隐血试验阳性对消化道出血的诊断有重要的价值。在消化性溃疡时,阳性率为40%-70%,呈间断性阳性。消化道癌症时阳性率可达95%,呈持续性阳性。故粪便隐血试验常作为消化道恶性肿瘤的一个筛选试验。,第一节 粪便检验,五、粪便分析工作站,根据NCCLS和CLIA的导则要求研制
经TÜV Pheinland(德国莱茵TÜV)确认
新一代粪便标准化检测工作站系统
粪便分析工作站系统组成:
粪便浓缩收集管
流动计数室
可调双吸样针
自动染色装置
微电脑控制台
带摄像的优质显微镜
电脑系统,第一节 粪便检验,微电脑控制台,自动染色器,双通道OSA,可调双吸样器,粪便分析工作站系统组成,,五粪便分析工作站,第一节 粪便检验,粪便常规检验的新方法模式,五、粪便分析工作站,第一节 粪便检验,,,,,,,,标本定量和染色检测,操作简易,视野清晰,自动稀释功能,智能化速度快捷,安全洁净,,,阳性率提高,标准先进,五、粪便分析工作站,第一节 粪便检验,第一节 粪便检验
课堂训练,(一)单项选择题(A)型题
1.粪便呈褐色或黑色,质软,富有光泽,常见于
A 服用铁剂 B 服用活性碳 C 上消化道出血
D 下消化道出血 E 进食大量绿色蔬菜
2.米泔样便主要见于
A 霍乱 B 胆道阻塞 C 急性胃肠炎
D 急性细菌性痢疾 E 阿米巴性痢疾
3.阿米巴痢疾时,粪便呈
A 脓血便 B 柏油样便 C 鲜血便
D 胨状便 E 米泔样便
4.婴儿腹泻患者的粪便外观最可能是
A 米泔样便 B 脓血便 C 蛋花样便
D 果酱样便 E 鲜血便
5.使粪便隐血试验(化学法)结果出现假阴性的是
A 铁剂 B VitC C 动物血 D 素食 E 牛肉,6.植物细胞与寄生虫卵的主要鉴别要点是
A 外形 B 胞核 C 大小 D折光性 E 内容物
7.粪便隐血试验阴性可见于
A 消化不良 B 消化道出血 C 胃溃疡 D 十二指肠溃疡 E 胃癌
8.邻甲苯胺法在消化道的出血量在多少时能检查出
A 5-10ml B 10-20 ml C 1-5 ml D 0.2-1 ml E 0.1-0.2 ml
9.镜检脂肪小低大于多少可视为脂肪排泄过多
A >6个/高倍视野 B >10个/高倍视野 C>3个/高倍视野
D >15个/高倍视野 E >20个/高倍视野
10.粪便显微镜检查细胞报告方式为多数时,是指
A 10个视野中最少可见5个,最多可见10个
B 10个视野中细胞数大多数超过10个以上
C 10个视野中细胞均匀分布难以计数
D 10个视野中最少可见2个,最多可见8个
E 以上答案都不对,答案,1-5 CAACBE
6-10 EAEBB,思考题,隐血试验的临床意义?,世事如书,我偏爱你这一句,愿做个逗号,呆在你脚边。
但你有自己的朗读者,而我只是个摆渡人。,——张嘉佳《从你的全世界路过》,谢 谢!,
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