定量分析课件.ppt

第一节 样品分析的前处理,一、几类典型药物 1、有机卤素药物 所含卤原子均直接和碳原子相连，但不同药物中卤素所处位置不同，则与碳原子结合的牢固程度就有差异，与芳环相连则结合牢固，与脂肪链相连则结合不牢固。,在药物定量分析前，一般需要根据分析方法的特点和化学原料药的结构与性质及药物制剂的处方组成采用不同的方法对试样进行前处理，以满足所选分析方法对试样的要求。,碘番酸（iopanoic acid）：,三氯叔丁醇（chlorobutanol）,2、含金属有机物,酒石酸锑钾：,金属原子不直接与碳原子相连，通常为有机酸及酚的盐或配位化合物，称为金属的有机药物。其分子结构中的金属原子结合不牢固，在水中即可离解出金属离子。,卡巴胂（carbarsone）：,金属离子直接与碳原子以共价键的形式相连接，结合状态比较牢固，称为有机金属药物。在溶液中其金属离子一般不能解离成离子状态。,二、前处理的方法,分析含金属和卤素的有机药物之前，应经过适当的处理，使金属和卤素转变为适于分析的状态，方可进行鉴别和含量测定。 1、不经有机破坏的分析方法 ⑴直接测定法 凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些C-M键结合不牢固的有机金属药物，在水溶液中可以电离，因而不需要有机破坏，可直接选用适当的方法进行测定。,如：①富马酸亚铁的测定： 富马酸亚铁 溶于热稀矿酸（不溶于水） 分解放出Fe2+ 硫酸铈滴定 领二氮菲作指示剂 指示剂与 Fe2+形成红色配位化合物 （2） 经水解后测定法 ① 直接回流后测定法： 适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物； 方法：将含有卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中，加NaOH溶液或AgNO3溶液后，加热回流使其水解，将有机结合的卤素经过水解作用转变为无机的卤素离子，然后用间接银量法进行测定，如：三氯叔丁醇的测定：,,,,,,原理： 三氯叔丁醇+NaOH CL-解离下来 与硝酸银生成氯化银沉淀 过量硝酸银用硫氰酸铵液回滴定 ②硫酸水解后测定： 如：硬脂酸镁，与定量的硫酸溶液共沸，水解生成硬脂酸和硫酸镁，剩余的酸以NaOH液滴定。,,,,（3）经氧化还原后测定法 ① 碱性还原后测定： 卤素结合于芳环上时，由于分子中碘的 结合较固定，需在碱性溶液中加还原剂（如锌粉）回流，使C-I键断裂，形成无机碘化物后测定。如碘番酸、泛影酸的测定。 ② 酸性还原后测定： 碘番酸在醋酸酸性条件下用锌粉还原，使C-I键断裂，形成无机碘化物后用银量法测定。,③ 利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量。 a、含锑药物：利用五价锑有机药物中可游离的Sb5+的氧化性，在酸性液中氧化碘化钾，并定量析出碘，可用硫代硫酸钠滴定。 b、含铁药物：将含铁药物加酸溶解后，便游离出Fe3+，利用在酸性溶液中氧化碘化钾，析出的碘可用硫代硫酸钠液滴定以测定含量。,2、经有机破坏的分析方法,含金属有机物及有机卤素药物结构中的金属原子、卤素与碳原子结合牢固者，用上述方法难以将有机结合的金属原子及卤素转变为无机的金属化合物及卤素化合物，此时必须采用有机破坏的方法将药物分子破坏，使有机结合状态的金属及卤素转变为可测定的无机化合物，方可选用适合的分析方法进行测定。,(1) 湿法破坏法 ①、硝酸-高氯酸法（HNO3-HCLO4） 破坏能力强，反应比较激烈。本法适用于血、尿、组织等生物样品的破坏。所得到的无机金属离子一般为高价态。 ②、硝酸-硫酸法（ HNO3-H2SO4 ） 本法适用于大多数有机物质的破坏，如染料、中间体或药物等。无机离子为高价态。 ③、硫酸-硫酸盐法（H2SO4-MSO4）： 本法适用于含砷和锑有机药物的破坏分解，最后得到低价态的金属离子。 ④、其它湿法,（2） 干法破坏 本法适用于含有卤素、硫、磷等有机药物定量分析的前处理。 ①高温灼烧法 本法是将含有待测元素的有机物经高温灼烧灰化，使有机物结构分解，而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐的前处理方法。 适用于湿法不易破坏完全的有机物以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物；不适用于含易挥发性金属有机药物的破坏。 常加无水碳酸钠、硝酸镁、氢氧化钙、氧化锌等辅助灰化。,②氧瓶燃烧法 a、原理：将有机药物放入充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的待测物质吸收于适当的吸收液中，然后根据待测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、检查或测定含卤素有机药物或含硫、氮、硒等其他元素的有机药物。,b、仪器装置： 燃烧瓶为500、1000或2000ml磨口、硬质玻璃锥形瓶，瓶塞应严密、空心,底部熔封铂丝一根（直径为1mm），铂丝下端作成网状或螺旋状，长度约为瓶身长度的2/3。,例：碘苯酯的测定方法： 取样品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏。用NaOH 试液2ml与水10ml为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液（取醋酸钾10g，加冰醋酸适量使溶解，加溴0.4ml，再加冰醋酸使成100ml）10ml，密塞，振摇，放置数分钟，加甲酸约1ml，用水洗涤瓶口，并通入空气约3-5min以除去剩余的溴蒸汽，加碘化钾2g，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/ml）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的硫代硫酸钠滴定液（0.02mol/ml）相当于1.388mg的C19H29IO2.,三、生物样品中药物的分析前处理：,生物样品：包括各种体液和组织，但实际上最常用的是比较容易得到的血液（血浆、血清和全血）、尿液和唾液，在特定情况下运用乳汁、脊髓、精液等。 药物及其代谢物从血浆或尿中分离的实验步骤： （1）药物从蛋白结合物或缀合物中释出 ①、蛋白变性：如应用三氯醋酸、HCLO4、有机溶剂（乙醇、丙酮、乙氰）使蛋白沉淀。 ②、盐酸水解 ③、酶消化法（最常用的是蛋白水解酶——枯草菌溶素）,（2）净化 ①、溶剂提取加盐或其他试剂 ②、固相提取柱法：离子交换树脂、氧化铝、XAD-2型树脂、活性炭、凝胶、ODS（十八烷基硅烷。） （3）测定 ①、薄层色谱 ②、柱色谱CC（column chromatogr） ③、衍生化后进行气相色谱GLC：,第二节 药物含量测定方法,一、重量分析法 基本原理： 称取一定重量的样品，用适当的方法将待测组分与样品中其他组分分离，根据被测组分和供试品的重量比计算组分的百分含量。,优点 准确度高，精密度好,缺点 操作繁琐、费时 灵敏度低,方法：,挥发法 萃取法 沉淀法,（1）挥发法,利用被测组分具有挥发性或将其转化为挥发性物质，称取挥发前后供试品的重量，计算被测组分的含量。,,,a 直接挥发法 称得的重量或增加的重量就是被测组分的重量,①. 用高氯酸镁吸收挥发的结晶水 计算其增加的重量,,,②. 炽灼残渣测定法,b 间接挥发法 样品减少的重量是被测组分重量,干燥失重测定法,,（2）萃取法（提取重量法）,将待测组分从一种溶剂萃取到另一易挥发的溶剂中，挥去溶剂，称量干燥物的重量进行计算,如： 苯巴比妥中“中性和碱性物质”的检查,（3）沉淀法,将待测组分以沉淀形式从溶液中分离，并转化成称量形式，称定其重量进行计算。,,,①基本原理,操作步骤：,取样,滤渣,沉淀,,过滤,洗涤,称重,沉淀形式,称量形式,沉淀形式： 沉淀时物质的化学组成形式,称量形式： 称量时物质的化学组成形式,如 Fe(OH)3·nH2O,如 Fe2O3,对沉淀形式的要求： 溶解度小，纯净，易过滤洗涤，易转化为称量形式。,对称量形式的要求： 组成固定，化学稳定性高，分子量大。,2、沉淀条件的选择,（1）晶形沉淀 稀、搅、热、慢、陈,（2）无定形沉淀 浓、热、电解质、不陈化,3、计算,①. 被测组分与称量形式的组成 相同时,如 SiO2,②. 被测组分与称量形式的组成不同时,如 Fe Fe2O3,×a ×b,换算因数 被测组分的摩尔质量（或原子量）与称量形式摩尔质量的比值。,如 Fe(55.847) O(15.9994),×2,被测物 沉淀形式 称量形式 换算因数 Fe Fe(OH)3·nH2O Fe2O3 2Fe / Fe2O3 FeO Fe(OH)3·nH2O Fe2O3 2FeO / Fe2O3 SO42- BaSO4 BaSO4 SO4 / BaSO4 MgO MgNH4PO4 Mg2P2O7 2MgO / Mg2P2O7 SiO2 SiO2 SiO2 SiO2 / SiO2,,二、容量分析法（滴定分析法）,根据已知浓度的滴定液与待测组分作用时所消耗的体积来计算待测物的含量的定量分析方法。,等当点（化学计量点） 消耗的滴定液的摩尔数＝被测物摩尔数,滴定终点 指示剂的变色点 （允许与化学计量点的误差≤0.1％）,滴定方式,直接滴定法 剩余滴定法 置换滴定法,,滴定度： 是指每毫升滴定液相当于被测物质的质量（毫克）,T→滴定度(mg/ml) c→滴定液浓度(mol/L) M→被测物质分子量 n→为反应式配平后滴 定液与被测物的摩 尔比或电子转移数,1、酸碱滴定法,基本原理： 利用酸和碱在水溶液中以质子转移为基础的滴定分析方法 。,酸 能给出质子的物质,碱 能接受质子的物质,酸给出质子后剩余部分是该酸的共轭碱,,碱接受质子后，即成为该碱的共轭酸,,,,越容易给出质子的物质酸性越强强酸的共轭碱是弱碱,越容易接受质子的物质碱性越强 强碱的共轭酸是弱酸,（1）强酸强碱的滴定,化学计量点时，溶液呈中性,突跃范围 pH 4.30～9.70,酚酞 （8.3 ~ 10.0）无色→红 甲基红（4.2 ~ 6.3） 红→黄 甲基橙（3.2 ~ 4.4） 红→黄,（2）强碱滴定弱酸,化学计量点时，溶液偏碱性,酚酞 （8.0 ~ 10.0）无色→红 百里酚酞（9.4 ~ 10.6）无色→蓝,c · Ka＞10-8,（3）强酸滴定弱碱,化学计量点时，溶液偏酸性,甲基红 （4.4 ~ 6.2）红→黄 溴甲酚绿（3.8 ~ 5.4）黄→蓝,c · Kb＞10-8,（4）多元酸的滴定,如 甲基橙和酚酞,可选择混合指示剂,酸碱指示剂：,常用的酸碱指示剂是有机弱 酸或弱碱，与其共轭碱或共轭酸 呈现不同的颜色,指示剂变色范围,酚酞 pKIn= 9.1,（8.0 ~ 10.0）,滴定突跃 在化学计量点附近发 生突变的pH范围,选择原则 指示剂的变色范围全 部或部分落在滴定突 跃范围内,滴定液的标定 ：,NaOH滴定液 基准物 邻苯二甲酸氢钾 指示剂 酚酞（无色→粉红）,HCl 滴定液 基准物 无水Na2CO3 指示剂 甲基红-溴甲酚绿(绿→暗紫),H2SO4滴定液 基准物 无水Na2CO3 指示剂 甲基红-溴甲酚绿(绿→暗紫),2 、 氧化还原滴定法,以氧化还原反应（通过电子 转移）为基础的滴定分析法。,氧化还原反应 电子得失,在一个氧化还原反应中,得到电子的物质 → 氧化剂 失去电子的物质 → 还原剂,氧化剂,还原剂,电位越高 氧化态的氧化能力越强电位越低 还原态的还原能力越强,氧化剂 可氧化电极电位比它低的物质 还原剂 可还原电极电位比它高的物质,常见氧化还原滴定方法,碘量法 溴酸钾法 铈量法 亚硝酸钠法 高锰酸钾法 高碘酸钾法 重铬酸钾法,氧化还原反应中常用的滴定液,碘液 硫代硫酸钠液 溴液 溴酸钾液 草酸液 高锰酸钾液 硫酸铈液,（1）碘量法,以碘为氧化剂，或以碘化物为还原剂的滴定法。,直接碘量法 间接碘量法,注 反应摩尔比 以碘原子数计,指示终点 自身指示终点（无→黄） 淀粉指示液（无→蓝紫）,a、 直接碘量法,用碘滴定液直接滴定的方法,测定条件,A、pH条件 酸性、中性、弱碱性,B、避光、立即滴定,b、间接碘量法,①、剩余碘量法,②、置换碘量法,,A、需用碘量瓶,,测定条件 :,B、需做空白滴定,C、pH条件 弱酸性、中性、弱碱性,水解,加大 I- 浓度,A、增加 I2溶解度，并减少 I2 挥发,B、降低 I2/I -氧化电位，反应完全,配制碘滴定液时 加大量碘化钾,滴定液的标定：,碘滴定液 基准物 三氧化二砷 指示剂 淀粉指示液（无→蓝紫）,硫代硫酸钠滴定液 基准物 重铬酸钾 指示剂 淀粉指示液(蓝紫→亮绿),（2）溴量法（剩余溴量法）,原理：,,指示剂 淀粉指示液（蓝紫→无）,测定条件：,B、反应摩尔比 以溴原子数计,C、需空白滴定,A、溴酸钾与溴化钾在盐酸条件 下反应产生新生态溴,溴滴定液的标定：,加入碘化钾，被剩余的溴氧化生成碘，再用硫代硫酸钠液滴定 指示剂 淀粉指示液（蓝紫→无),（3）铈量法,指示剂 邻二氮菲亚铁 还原型 → 氧化型 （红色） （浅蓝色）,原理：,优点：,A、硫酸铈滴定液稳定,B、pH条件 HCl（防止Ce4+水解）,C、干扰因素少 适用于糖浆剂、片剂 如 硫酸亚铁 高锰酸钾法 硫酸亚铁片 铈量法,硫酸铈滴定液的标定:,基准物 三氧化二砷 指示剂 邻二氮菲亚铁 （红→淡绿）,(4) 亚硝酸钠滴定法,原理:,利用亚硝酸钠在盐酸存在下可与具有芳伯氨基的化合物发生重氮化反应，定量生成重氮盐，根据滴定时消耗亚硝酸钠的量可计算药物的含量,具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具芳酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。,测定条件:,a、pH条件 过量HCl,稳定重氮盐，防止偶氮氨基 化合物生成,1:2.5～6,b 反应温度,t ↑→ v↑,10 ~ 30℃,t ↑ 重氮盐易分解,t ↑ HNO2易分解逸失,c 催化剂 KBr,比 [ NO+ · Cl- ] 多300倍,快速滴定法： 滴定管尖插入液面下2／3处，在搅拌下一次性放下大部分滴定液，近终点前才提出滴定管，冲洗管尖，再缓缓滴定至终点。,d 滴定方式,ν↑ 来不及反应,ν↓ 亚硝酸分解逸失,e 指示终点的方法,A、永停滴定法 ChP（2010）,B、电位法,C、内指示剂法 中性红,D、外指示剂法 KI－淀粉糊剂或试纸,亚硝酸钠滴定液的标定:,基准物 对氨基苯磺酸 指示终点方法 永停法,4、非水滴定法,在水以外的溶剂中进行的滴定反应。,分类 非水碱量法 非水酸量法,对象 酸或碱性较弱的药物 难溶于水的药物,(一)溶剂 非水溶剂,溶剂的分类:,（a）酸性溶剂 冰醋酸 给出质子能力强,（1）质子性溶剂,（c）两性溶剂 甲醇、乙醇 既能给出质子，又能接受质子,（b）碱性溶剂 乙二胺 接受质子能力强,（2） 无质子溶剂 非质子性溶剂 无转移性质子,（b）惰性溶剂 苯、氯仿 与质子性溶剂混合使用 增大溶解度、滴定突跃,（a）偶极亲质子溶剂 二甲基甲酰胺 与被测组分形成氢键,溶剂的性质,①、溶剂的离解性,仅惰性溶剂不能离解,溶剂的自身离解常数越大，突跃范围越大，终点越敏锐,弱酸性药物 溶于碱性溶剂时可增 加其相对酸性,弱碱性药物 溶于酸性溶剂时可增 加其相对碱性,②、溶剂的酸碱性,③、溶剂的介电常数,化合物在介电常数大的溶剂中易离解,化合物在介电常数小的溶剂中难离解， 多形成离子对,均化效应与区分效应:,均化效应： 将不同强度酸或碱拉 平到同一强度的效应。,均化性溶剂 具有均化效应的溶剂,均化性溶剂,均化效应,共轭碱,（液氨）,碱性溶剂 是酸的均化性溶剂,酸性溶剂 是碱的均化性溶剂,区分效应 能区分出酸或碱的不同强 度的效应,区分溶剂 具有区分效应的溶剂,HClO4 ＞ HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3,,酸性溶剂 是碱的均化性溶剂,碱性溶剂 是酸的均化性溶剂,酸性溶剂 对酸有区分效应,碱性溶剂 对碱有区分效应,(二)、碱的滴定 （非水碱量法）,（1）溶剂 酸性溶剂 （冰醋酸、醋酐） （2）滴定液 高氯酸（冰醋酸） 基准物 邻苯二甲酸氢钾 （3）指示剂 结晶紫、电位法 （4）测定对象 弱碱性药物,有机弱碱 胺类、生物碱类 有机酸的碱金属盐 枸橼酸钾 有机碱的氢卤酸盐（加醋酸汞）盐酸麻黄碱 有机碱的硫酸盐 （硫酸在冰醋酸为一元酸） 硫酸奎宁 有机碱的硝酸盐 （电位法指示终点） 有机碱的有机酸盐 重酒石酸去甲肾上腺素,(三)酸的滴定 （非水酸量法）,（1）溶剂 乙二胺 二甲基甲酰胺 （2）滴定液 甲醇钠（甲醇-苯） 基准物 苯甲酸 （3）指示剂 溴酚蓝、百里酚蓝 （4）测定对象 有机弱酸性药物,DMF,有机弱酸类药物,芳酸类 苯甲酸 酚类 苯酚 磺酰胺类 磺胺嘧啶 巴比妥类 苯巴比妥,（四）滴定液的标定,高氯酸滴定液 基准物 邻苯二甲酸氢钾 指示剂 结晶紫（紫→蓝）,甲醇钠滴定液的标定 基准物 苯甲酸 指示剂 麝香草酚蓝（ 黄→蓝）,5、 沉淀滴定法,以沉淀反应为基础的滴定分析法,应用较广的是银量法,银量法,铬酸钾法（Mohr法） 铁铵矾指示剂法（Volhard法） 吸附指示剂法（Fajans法）,,（1）铬酸钾法（Mohr法）,原理（AgNO3滴定液）,终点时:,终点前:,铬酸钾指示剂,测定条件,①、指示剂用量: 25 ~ 50ml 溶液中 + 1ml 5%铬酸钾,②、溶液的酸度: pH6.5~10.5,③、滴定时要剧烈振摇 防止 AgCl 胶体吸附 Cl-,④、不宜测定 I- 和 SCN- (AgI↓)I- (AgSCN↓)SCN-,（2）铁铵矾指示剂法（Volhard法）,原理（NH4SCN滴定液）,终点前,测定条件：,①、测 Cl- 时要防止沉淀转化,,防止沉淀转化的措施,A、将沉淀过滤除去后再回滴 B、用有机溶剂包裹沉淀 邻苯二甲酸二丁酯、硝基苯 C、高浓度的硫酸铁铵 指示剂 0.2mol/L 的 Fe3+,②、在强酸性介质中滴定,③、测 I- 时，指示剂须后加,④、除去干扰性物质 能与SCN-作用的强氧化剂等,（3）吸附指示剂法（Fajans法）,原理（AgNO3滴定液）,测定条件:,①、要保护AgCl胶体 淀粉或糊精,I - ＞ 二甲基二碘荧光黄 ＞ Br - ＞ 曙红 ＞ Cl- ＞ 荧光黄,②、胶体颗粒对指示剂阴离子的吸 附应小于对被测离子的吸附,③、选择合适的pH 要保证指示剂电离，故常选在 指示剂的电离常数附近 荧光黄 pH7 ~ 10 曙红 pH2 ~ 10,④、避免光照 AgX易感光变色,AgNO3滴定液 基准物 NaCl 指示剂 荧光黄（黄绿→微红）,NH4SCN滴定液 基准液 AgNO3滴定液 指示剂 硫酸铁铵(无色→淡棕红),（4）滴定液的标定,6、配位（络合）滴定法,基本原理： 以配位反应为基础的滴定分析法 配位剂中应用最广的是乙二胺四乙酸（EDTA） 配位滴定主要是指EDTA滴定，它可滴定数十种含金属离子的药物,（1）滴定剂 EDTA,四元酸（H4Y）,,,,,两个羧基上的H+转移到两个碱性氮原子上，形成双偶极离子，故实际上它只是一种较强的二元酸（H2Y2-）,由于EDTA难溶于水，通常制成二钠盐（NaH2Y·2H2O），简称EDTA或EDTA二钠盐,EDTA与金属离子络合的特点,①、EDTA能与大多数金属离子 形成稳定的络合物 ②、反应摩尔比1 ：1 ③、络合物大多数易溶于水 ④、络合物大多数无色,滴定条件的选择 ①、化学计量点的pM ②、滴定条件的判断 ③、最高酸度控制 缓冲液,（2）金属指示剂,终点前,原理（以络黑T为例）,对指示剂的要求：,① 、MIn 与 In 的颜色应不同 ② 、MIn 的稳定性应＜EDTA－M ③、MIn 应易溶于水 ④、In 应稳定,（3）滴定液的标定,锌滴定液 EDTA滴定液  指示剂 络黑T（紫→纯蓝）,乙二胺四醋酸二钠滴定液 基准物 ZnO  指示剂 络黑T（紫→纯蓝）,例：下列测定中选择的指示剂为 A. 硫酸铁铵 B. 结晶紫 C. 淀粉 D. 二甲酚橙 E. 酚酞 86. 以K2Cr2O7为基准物标定Na2S2O3滴定液 87. 用EDTA滴定液测定氢氧化铝 88. 用HClO4滴定液测定盐酸麻黄碱 89. 用NaOH滴定液测定十一烯酸 90. 用AgNO3滴定液测定三氯叔丁醇,C,D,B,E,A,例：错误的操作有 A.将AgNO3滴定液装在碱式滴定管中 B.将K2Cr2O7滴定液装在碱式滴定管 C.以K2Cr2O7标定Na2S2O3溶液时用碘量瓶 D.上述滴定（C）中，淀粉指示剂宜在近 终点时加入 E.用EDTA滴定液直接滴定Al3+时，滴定速 度应快,,,,例：配位滴定法中，EDTA和金属离子 配位的特点为 A、形成的配位物稳定 B、形成的配位物溶于水 C、形成的配位物多无色 D、EDTA和金属离子比为1:1 E、形成的配位物应具颜色,,,,,三、仪器分析法,（一）光谱分析法 1、紫外-可见分光光度法 2、荧光分析法 （二）色谱分析法 1、高效液相色谱法 2、气相色谱法,第三节 分析方法的验证,1、药品质量标准分析方法验证的目的与范围： 目的：证明采用的方法适合于相应的检测要求； 适用范围：药品质量标准的制定；药物生产方法变更，制剂的组分（主要指辅料）变更，原分析方法进行修订时。 2、具体内容： （1）准确度（accuracy）： 指测得结果与真实值（或参考值）接近的程度，表示分析方法测量的正确性。通常用回收率试验来表示。,2、制剂的含量测定,1、原料药的含量测定 可以用已知纯度的对照品或供试品进行测定，并按下式计算回收率；或用本法测定的结果与已知准确度的另一方法测定结果进行比较。,数据要求： ①、做高中低3个浓度：100%±20% ②、n=9次（样本数为9，每个浓度取3个样） ③、当只有一个浓度时，n=6（即取该浓度下的6个样） 回收率越接近100%表明分析方法准确度越高,（2）精密度（precision）： 指用该法测定同一均匀供试品的一组测量值彼此接近的程度，它们越接近就越精密。在药物分析中用标准偏差（s）和相对标准偏差（RSD）表示：,（3）重现性（ruggedness）： 利用相同的方法在各种正常实验条件下对同一样品进行分析所得结果的重现程度。 分析方法的重现性的测定是通过不同实验室由不同的实验者对同一样品的分别测试而获得的。重现性是指不同实验室中使用此分析方法的精密度。 （4）专属性（specificity）： 指一种分析方法仅对一种分析成分产生唯一信号。 鉴别反应、杂质检查和含量测定方法，均应考察其专属性。,（5）检测限（limit of detection，LOD）： 指分析方法能够从背景信号中区分出药物时，所需样品中药物的最低浓度，无需定量测定。 ①、非仪器分析目视法：用已知浓度的被测物，试验出能够被可靠地检测出的最低浓度或量作为LOD。 ②、信噪比法：当用仪器分析方法时，可用已知浓度的样品与空白试验对照，记录测得的被测物药物信号强度S与噪音（或背景信号）强度N，以能达到S/N=2或S/N=3时的样品浓度最低药物浓度为LOD。 （6）定量限（（limit of quantitation，LOQ）： 指在保证具有一定可靠性的前提下，分析方法能够测定出的 样品中药物的最低浓度。（即能准确定量的最低浓度或量） 用非仪器分析方法时，与（5）相同的确定方法；用仪器分析时S/N=10/1。,（7）线性： 分析方法的线性是在给定范围内获取与样品中供试物浓度成正比的试验结果的能力。即；供试物的浓度变化与试验结果成线性关系：A=ac+b（或y=ax+b）相关系数r越接近1，表示线性越好。 （8）范围（range）： 线性范围：指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围，其最大量与最小量之间的间隔，可用mg/l ～ mg/l；或μg/ml ～μg/ml表示。若有C1 ，C2 ，C3 ，C4 ，C5五个浓度，当r越接近于1，则范围为C1～ C5。 （9）耐用性（robustness）： 指在测定条件有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。,