1、,生物安全管理与防护,主要内容,实验室感染史生物安全管理现状与意义这几个概念你了解吗生物安全柜的分类和正确使用几个误区要关注生物安全防护的要点,实验室感染简史,1886年 Koch报告第一例霍乱病的实验室感染：德国柏林的一名学生在处理霍乱弧菌培养物时被感染并发病 1893年 Reincke报告第一例实验室伤寒感染 1899年 Birt和Lamb报告第一例布氏杆菌引起的实验室获得性感染 1905年 Johnston报告第二例布氏菌实验室感染并作了评价,1931年 Findlay报告第一例实验室感染肝炎的 病例1932年 有报告实验室工作人员被恒河猴咬伤 后患猿猴疱疹病毒性脑炎，这是该病毒感染人类
2、的第一例1943年 在巴西的黄热病实验室，两周内8名 实验室人员发生了委内瑞拉马脑炎1967年 在德国有26名实验室人员因接触黑尾 长猴的血液和组织而感染一种病毒 (马堡病毒)，最终有9人死亡,实验室感染简史,1969年 尼日利亚北部一家医院3名护士感染砂粒 病毒，其中2人死亡。这是该病毒感染人的首次报 告（1951、1965、1976）美国实验室相关感染调查5000个实验室累计感染总数：3921例 与已知事故相关的80%（气溶胶？）最常报告的感染：乙型肝炎、肺结核、伤寒、委内瑞拉马脑炎、布鲁氏菌病,实验室感染简史,1999年 Walker等报告实验室人员感染率19941995年为16.2人/
3、10万年19881989年为82.7人/10万年2003年后 新加坡、台湾和北京先后发生了实验 室人员感染SARS-CoV的报告2004年 中国CDC病毒所形态室SARS-CoV感染 事件导致9人感染，其中1人死亡，747人被隔离,实验室感染简史,实验室感染的证据分析,宋、杨均在同一实验室工作，该室一直从事SARS-CoV工作封锁病毒所后，未再出现任何SARS病人第二代病例魏某胸水中分离到SARS-CoV，其全基因序列与实验SARS-CoV高度同源宋、杨从未接触过野生动物宋、杨潜伏期内北京没有任何其他SARS病例主要原因：病毒灭活不彻底，灭活方法没有进行有效的评评价，没有规定对每一批病毒的灭活
4、效果进行监测和质控责任追究：13名处级以上领导被免职名处级以上领导被免职,遗传修饰微生物有生物活性的载体不仅可能影响实验室人员的生物安全，还可能引起使用后废弃于环境后的生物污染问题其影响更是深远而不易察觉,事故频发的背后是“海恩法则,关于飞行安全的“海恩法则” 一起重大的飞行安全事故背后有个事故征兆 每个征兆背后有个事故苗头 每个苗头背后还有个事故隐患 几乎所有的灾难都是多个漏洞的叠加。只要认真落 实已有的规则、规定，很多事故完全可以避免,生物安全目标,促进致病微生物/化学毒物/放射线/ 基因的安全操作并教育人们在下述环 境安全操作：实验室生产设施医疗卫生设施最终目标：实验室安全事件零发生！,
5、实验室生物安全管理,1、实验室生物安全管理组织生物安全委员会2、实验室人员的管理（1）职责明确实验室主任实验室技术人员（2）安全培训培训计划、内容、方式（3）健康监测（4）业务档案3、实验室制度管理4、实验室仪器设备管理,1、生物安全管理组织,单位法定代表人生物安全领导小组单位生物安全委员会实验室负责人-第一责任人,2、实验室人员管理（1）相关职责,最高管理者 单位法定代表人对实验室生物安全负总责，负责建立安全防护实验室管理体系 组织并授权生物安全领导小组和生物安全委 员会负责实验室生物安全工作 批准和发布生物安全手册。,单位生物安全委员会,审议实验室管理规章制度 生物危险评估，审查和批准实验
6、项目 审查突发事故应急预案， 审查操作程序，监督和检查法规和规程的执行 实验室事故评估，提出处理和改进意见 对实验室人员实施医务监督 指定实验室技术和生物安全负责人的代理人等。成员由单位负责人、生物安全管理人员、临床医生担任。,生物安全领导小组,负责领导安全防护实验室的建设、管理、使用维修，协调与实验室生物安全相关科室部门的工作。,实验室主任,一般应由具有副高级以上技术职称，熟悉实验室 生物安全防护知识和有关法规、制度、规程的人员担任；（为什么是第一责任人？） 负责实验室的日常管理、实验技术和生物安全工作；组织生物安全防护知识和有关法规、制度、 规程的宣贯 ；决定进入实验室的工作人员；,监督有
7、关法规和操作规程的执行，纠正出现的违规活动并有权停止实验；定期组织对实验室设备各项技术参数的检查和实验室装备的维护保养；负责实验室紧急情况及事故的处置并向生物安全委员会和生物安全领导小组报告 ；,实验室技术人员,2、实验室人员管理（2）实验室生物安全培训,1、培训计划上岗前培训计划，日常培训计划2、培训内容（1）实验室安全法律、法规（2）实验室安全防范知识个体防护、安全使用设备、水电防火防盗（3）专业安全知识SOP 生物安全手册、应急处理3、人员培训方式,（3）实验室生物安全培训实验室人员健康监测就职前体检每年定期健康监测，监测和报告制度暴露和暴露后监测处理方案,（4）实验室人员业务档案人员、
8、设备,2、实验室人员管理,3、实验室制度管理,（1）实验室安全管理制度（2）菌（毒）种、生物样本管理制度（3）剧毒品、危险品的管理制度（4）实验室废弃物处置制度废弃物分类： 生物废弃物、动物尸体、化学废弃物等等生物废弃物处置按照不同性质、不同的要求采用不得方法灭活后再处置符合相关法律法规要求（5）实验室内务管理制度（6）SOP从取样、质量控制、清洁、消毒、废弃物处理、个人防护、温度、标签等等（7）电气设备安全操作规程,4、实验室仪器设备管理,1、新购仪器设备的安装、调试和验收2、编写操作、使用管理、专项维护保养规程3、仪器设备的封存和报废4、仪器设备的维护保养,实验室生物安全防护分级,一级生物
9、安全防护实验室，简称BSL1或P1二级生物安全防护实验室，简称BSL2或P2三级生物安全防护实验室，简称BSL3或P3四级生物安全防护实验室，简称BSL4或P4,风险源分析,典型的一级生物安全水平实验室,风险源分析,一级生物安全水平实验室要求：1、必须为实验室安全运行、清洁和维护提供足够的空间。2、实验室墙壁、天花板和地板应当光洁、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地板应当防滑。3、实验台面应是防水的，并可耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中等热度的作用。4、应保证实验室内所有活动的照明，避免不必要的反光和闪光。5、实验室器具应当坚固耐用，在实验台、生物安全柜和其他设备之间及其下面要保证有足够
10、的空间以便进行清洁。6、应当有足够的储存空间来摆放随时使用的物品，以免实验台和走廊内混乱。在实验室的工作区外还应当提供另外的可长期使用的储存间。,风险源分析,7、应当为安全操作及储存溶剂、放射性物质、压缩气体和液化气提供足够的空间和设施。8、在实验室的工作区外应当有存放外衣和私人物品的设施。9、在实验室的工作区外应当有进食、饮水和休息的场所。10、每个实验室都应有洗手池，并最好安装在出口处，尽可能用自来水。11、实验室的门应有可视窗，并达到适当的防火等级，最好能自动关闭。12、二级生物安全水平时，应在靠近实验室的位置配备高压灭菌器或其他清除污染的工具。13、安全系统应当包括消防、应急供电、应急
11、淋浴以及洗眼设施。14、应当配备具有适当装备并易于进入的急救区或急救室。,风险源分析,15、在设计新的设施时，应当考虑设置机械通风系统，以使空气向内单向流动。如果没有机械通风系统，那么实验室窗户应当能够打开，同时应安装防虫纱窗。16、必须为实验室提供可靠和高质量的水。要保证实验室水源和饮用水源的供应管道之间没有交叉连接。应当安装防止逆流装置来保护公共饮水系统。17、要有可靠和充足的电力供应和应急照明，以保证人员安全离开实验室。备用发电机对于保证重要设备的正常运转（如培养箱、生物安全柜、冰柜等）以及动物笼具的通风都是必要的。18、要有可靠和充足的燃气供应。供气设施必须得到良好维护。19、实验室和
12、动物房偶尔会成为某些人恶意破坏的目标。必须考虑物理和防火安全措施。必须使用坚固的门、纱窗以及门禁系统。适当时还应使用其他措施来加强安全保障。,风险源分析,典型的二级生物安全水平实验室,一级生物安全防护实验室,安全设施和个体防护：一般无须使用生物安全柜等专用安全设备工作人员在实验室应穿工作服，带防护眼镜工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套,实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境 具有中等潜在危害的微生物包含微生物举例,麻疹病毒 乙型肝炎病毒 衣原体,沙门氏菌 HIV血清学检测 志贺氏菌,二级生物安全防护实验室,BSL-2实验室,二级生物安全防护实验室,设计和建造的特殊要求：消
13、毒设施（高压灭菌锅、化学消毒装置等）洗眼装置可自动关闭的门锁门口有发光指示装置换气装置（3-4次/小时）,满足一级实验室 (标准微生物操作规程) 各款要求，在此基础上特别注意：1. 制定出入制度2. 实验室人口贴上生物危险标志3. 制定实验室特定的生物安全操作规则4. 每年一次最新培训制度,二级生物安全防护实验室特殊微生物操作规程,5. 使用塑料器材代替玻璃器材6. 禁止用手处理破碎的玻璃器具7. 培养基、组织、体液及其它具有潜在危险性的废弃物须放在防漏的容器中储存、运输及消毒、灭菌,8. 用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽，禁止用手直接从注射器取下。9. 用过的针头必须直接放入防穿透的
14、容器中。10.非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特 定区域消毒，最好进行高压消毒,11.工作人员应接受必要的免疫接种和检测 (如乙型 肝炎疫苗，卡介苗等)12.必要时收集从事危险性工作人员的本底血清13.严格执行实验室工作人员年度采血检测 HIV 抗体 和备案制度。每半年进行一次 HIV 抗体检测，并 保留样品14.对从事艾滋病实验室工作的人员，因工作中意外 事故造成HIV 职业暴露者，所在单位应负责解决 抗病毒及其它相应治疗的医疗费用,15.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒16.人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇 报，并记录事故经过和处理方案17.禁止将无关动物带入实验室
15、,二级生物安全防护实验室,安全设施和个体防护：处理以下致病微生物时应在生物安全柜 (级) 中进行 ，包括:高浓度容量有喷溅可能性上述材料的离心操作如使用密封的离心机转子或安全离 心杯，且只在生物安全柜中开闭，可在实验室中进行级生物安全柜必须每年进行一次年度现场检测,当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行时，须使 用面部保护装置应有相应的SOP在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服，不得穿着 外出。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一 洗涤或丢弃当手可能接触感染材料、污染的设备时应戴手套。如 可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。 不得戴着手套离开实验室，工作完全结束后方可除去 手套。
16、一次性手套不得清洗和再次使用,下列操作必须在P2实验室或全排式生物安全柜中进行：1、含漱液、血清和血液等样品的诊断检测2、溶解、固定或用其他方法处理灭活的病毒和(或) 有传染性的病毒基因片段3、常规的细菌和毒素检查4、可能产生气溶胶的样品处理5、临床样品的包装、分装6、离心管和离心机转头的封闭和开启,实验室生物安全事故处理（以 HIV为例）,职业暴露是指实验室、医护、预防保健人员以及有 关的监管工作人员，在从事艾滋病防治工作及相关 工作的过程中意外被艾滋病毒感染者或艾滋病患者 的血液、体液污染了破损的皮肤或非胃肠道粘膜， 或被含有艾滋病病毒的血液、体液污染了的针头及 其它锐器刺破皮肤，而具有被
17、艾滋病病毒感染的可 能性的情况,美国CDC的研究显示，影响针头刺伤后的危险性因素包括：伤口的深度有可见的血液从伤口溢出针头刺破了静脉或动脉污染源来自于晚期艾滋病病毒感染者(病毒载量高),紧急处理措施,皮肤针刺伤或切割伤：立即用肥 皂和大量流水冲洗，尽可能挤出 损伤出的血液，用70%乙醇或其 它消毒剂消毒伤口皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染 部位，并用适当的消毒剂浸泡， 如70%乙醇或其它皮肤消毒剂,问答题,1、哪些实验操作需在生物安全柜内进行？ 答：对可能使病原微生物及其毒素溅出或产生气溶胶的操作，应在生物安 全柜内进行。如无法在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，应加装 负压罩。2、生物安全柜
18、有何要求？ 答：生物安全柜的型号应根据实验的项目和对象确定。生物安全柜的使用 应做好使用记录，包括开机时间、使用时间、消毒方法及时间。 生物安全柜安装后、移位后、更换高效过滤器后应对其生物安全性能进行 检测，正常使用后每年必须由具有专项资质的第三方进行检测，保存检测 记录。3、非工作人员能否进入实验室？ 答：禁止非工作人员进入实验室。特殊情况下，非工作人员进入实验室须 经实验室负责人批准，由专人陪同，并做好登记。4、进入实验室有何防护要求？ 答：进出实验应更换工作服，操作时应佩戴手套、戴防护帽和口罩，必要 时使用面部保护装置。当防护用品破损或污染物泼溅时应立即更换。应着 防护工作鞋。每次实验结束后和离开实验室前应及时洗手和消毒。,结语,实验室生物安全是全球面临的重要公共卫生问题。 在世界范围内，原有的和新发的传染病不断出现，许 多动物源性疾病有向人体转移的可能，还有化学品、 射线、基因遗传毒性带给人类的危害时有发生，突发 公共卫生事件及生物恐怖事件时有出现，这些都给实 验室生物安全提出了严峻的课题！ 实验室生物安全是全世界每个国家都在关心和重视的事，是全球每一个人都应该关心和重视的事！你的安全和健康 我也在关注 让我们一起努力！,谢谢！,
