1、药物分析重点内容绪论药物：是指用于预防、治疗，诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症或者功能主治、用法和用量的物质。药品：通常是指药物经一定的处方和工艺制备而成的制剂产品，是可供临床使用的商品。药物分析：是利用分析测定手段，发展药物的分析方法，研究药物的质量规律。对药物进行全面检验与控制的科学。第一章 药品质量研究的内容与药典概况药品质量研究的目的：为了制定药品标准，加强对药品质量的控制及监督管理，保证药品的质量均一并达到用药要求，保证用药的安全、有效和合理。检查是对药品的安全性，有效性，均一性和纯度四个方面进行验证。制剂的规格：指每一支、片或其他每一个单位制剂中含有主药的重量或
2、含量或装量，即制剂的标示量。标准物质：指供药品检验中使用的，具有确定特性量值，用于校准设备、评价测量方法、给供试药品赋值或者鉴别用的物质。标准品：指用于生物检定或效价测定的标准物质，其特性量值按效价单位 IU 或重量单位ug 计，以国际标准物质进行标定。称取：0.1g , 0.06-0.14g; 2g ,1.5-2.5g;2.0g,1.95-2.05g;2.00g,1.995-2.005g (4 舍 6 入 5 成双)精密称定：准确到所取重量的千分之一约：指取用量不得超过规定量的10恒重：指供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在 0.3mg 以下的重量。空白试验：指在不加供试品或以等量溶剂代替
3、供试液的情况下，按同法操作所得的结果。手性药物用：单晶 X 射线衍射 不同晶型：粉末 X 射线衍射药品中文名须按照中国药品通用名称收载的名称及其命名原则命名。没有 INN 名称的药物，可根据 INN 命名原则进行英文名命名。常用鉴别试验的方法与特点： 化学，色谱，光谱或生物学方法等。1. 要有一定的专属性，灵敏性和简便性2. 尽可能采用药典已收载的方法3. 一般选用 2-4 种不同类型的方法，化学法和仪器法相结合，互相取长补短4. 原料药应侧重于具有指纹性的光谱学方法，制剂应侧重于抗干扰的专属性色谱方法第二章 药物的鉴别实验一般鉴别实验：是依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应
4、来鉴别药物的真伪。 （只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物）1 有机氟化物的鉴别经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸收成无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在 PH4.3 溶液中形成蓝紫色络合物。2 有机酸盐水杨酸盐 与三氯化铁生成配位化合物，中性红色，弱酸紫色。加稀盐酸，析出白色水杨酸沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解。酒石酸盐 加氨制硝酸银试液数滴，水浴加热，试管内壁成银镜。3 芳伯氨基反应加稀盐酸煮沸，加等体积的亚硝酸钠和脲溶液数滴，振摇 1 分钟，滴加碱性 B-萘酚试液数滴，生成由粉色到猩红色沉淀。4 托烷生物碱类发烟硝酸 5 滴，水浴蒸干，得黄色残渣，放冷，加乙醇 2-3 滴湿润，加固
5、体氢氧化钾一粒，显深紫色。5 无机金属盐焰色反应 钠盐鲜黄色 钾盐紫色 钙离子砖红色 钡离子黄绿色 绿色玻璃中透视蓝色铵盐 加过量的氢氧化钠试液后，加热，即分解，发生氨臭；遇到润湿的红色石蕊试纸，变蓝，并能使硝酸亚汞试液润湿的滤纸显黑色。6 无机酸根氯化物 法一：用稀硝酸酸化后，滴加硝酸银，生成白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加氨试液溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀再次生成。法二：加与供试品等量的二氧化锰，混匀，加硫酸润湿，缓慢加热，即产生氯气，能使润湿的碘化钾试纸变蓝。硫酸盐 法一：加氯化钡试液，产生白色沉淀；分离，沉淀在硝酸或盐酸中均不溶解。法二：加醋酸铅试液，产生白色沉淀，分离；沉淀在醋酸铵试液或
6、氢氧化钠试液中溶解。法三：加盐酸，不生成白色沉淀（与硫代硫酸盐区别）硝酸盐 法一：加与供试品等量的硫酸，小心混合，冷却后，沿管壁加硫酸亚铁试液，分层，接界面显棕色。法二：加硫酸与铜丝，加热，发出红棕色的蒸气。法三：滴加高锰酸钾试液，紫色不褪去（与亚硝酸盐区别）专属鉴别实验：是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。区别：一般鉴别试验是以某些类别药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别，以区别不同类别的药物。而专属鉴别试验，则是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，来鉴别药物，以区别同类药
7、物或具有相同化学结构部分的各个药物单体，达到最终确证药物真伪的目的。一、 化学鉴别法1. 呈色反应鉴别法1.酚羟基的三氯化铁呈色反应2.芳伯氨基的重氮化-偶合反应3.托烷生物碱类的 Vitali 反应4.肾上腺皮质激素类的四氮唑反应5.含羰基结构的苯肼反应6.氨基苷及氨基糖苷类的茚三酮反应7.氨基醇结构的双缩脲反应2. 沉淀生成反应鉴别法1.丙二酰脲类的硝酸银反应2.氯化物的银盐沉淀反应3.含氮杂环类的生物碱沉淀剂3. 荧光反应鉴别法硫酸奎宁的稀硫酸溶液显蓝色荧光4. 气体生成反应鉴别法1. 酰胺类药物经强碱加热产生氨气（巴比妥类药物）2. 含硫的药物经强酸处理后加热产生硫化氢气体（盐酸雷尼替
8、丁）5. 使试剂褪色的鉴别法司可巴比妥钠的碘试液反应二、 光谱鉴别法1. 测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长；2. 规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度；3. 规定吸收波长和吸收系数法；4. 规定吸收波长和吸收度比值法；5. 经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特征。三、 色谱鉴别法TLC 薄层色谱第三章药物的杂质检查药物杂质的来源：1 生产过程中引入的杂志 2 贮藏过程中引入的杂质 药物杂质的分类：1 按来源分为一般杂质和特殊杂质一般杂质：是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质。特殊杂质：是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质，也常称为有关物
9、质，这类杂质随药物的不同而不同。2 按毒性分为毒性杂质（重金属和砷盐）和信号杂质（信号杂质一般无毒，但其含量可反映出药物的纯度、生产工艺水平以及生产过程中的问题。 ）杂质限量：是指药物中所含杂质的最大允许量。杂质限量的控制方法：限量检查法 采用对照法 灵敏度法 比较法定量测定法 杂质的常用检查方法：色谱方法1 薄层色谱法 TLC （1 ） 杂质对照品法：适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况。（2 ） 供试品溶液的自身稀释对照法：适用于杂质的结构不确定；或者虽然杂质结构已知，但是没有杂质对照品的情况。（3 ） 两法并用法：当药物中存在多个杂质时，若已知杂质有对照品，则采用杂质对照品法检查；共存
10、的未知杂质或没有对照品的杂质，则可同时采用供试品溶液的自身稀释对照法检查。（4 ） 对照药物法：当无适合的杂质对照品，或者是供试品显示的杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异，难以判断限量时，可采用与供试品相同的药物作为对照。2 高效液相色谱法 （1 ）外标法：适用于有杂质对照品，而且进样量能够精确控制的情况。（2 ）加校正因子的主成分自身对照法：仅适用于已知杂质的控制。（3 ）不加校正因子的主成分自身对照法：仅适用于没有杂质对照品的情况。3 气相色谱法 药物中挥发性杂质的检查4 毛细管电泳法 多肽，酶类药物中杂质的检查。药物中一般杂质的检查：一、 氯化物检查法1. 原理：药物中的微量氯化物在硝酸
11、酸性条件下与硝酸银反应，生产氯化银胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度进行比浊。2. 方法：供试品加水溶解加稀硝酸加水稀释加入硝酸银试液，比浊适量标准氯化钠溶液加稀硝酸加水稀释3. 注意事项：加硝酸可避免弱酸银盐的干扰，且可加速氯化银沉淀的生成并产生较好的乳浊；供试品若带有颜色，可采用内消色法消除干扰（供试品硝酸银后过滤标准氯化钠作为对照）二、 铁盐检查法1. 原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性的硫氰酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。2. 方法：供试品加水溶解加稀盐酸和过硫酸铵加水稀释适量标准铁溶液加稀盐酸和过硫酸
12、铵加水稀释 分别加过量硫氰酸铵溶液，加水定量后比色3. 注意事项：在盐酸酸性条件下，可防止三价铁离子的水解；加入过硫酸铵氧化剂既可将供试品中的二价铁氧化为三价铁，又可以防止由于光线使硫氰酸铁还原或分解褪色；加入过量的硫氰酸铵，不仅可以增加生成配位离子的稳定性，提高反应灵敏度，还能消除其他阴离子与铁盐形成配位化合物而引起的干扰。三、 重金属检查法第一法 硫代乙酰胺法：适用于溶于水，稀酸或与水互溶的有机溶剂，并且不含有可与金属离子强配位基团的药物。1. 原理：硫代乙酰胺在弱酸性 PH=3.5 条件下水解，产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色
13、比较。2. 方法：甲管（标准管）：准铅溶液加入醋酸盐缓冲液（PH3.5）加水稀释定容乙管（供试品管）：供试品溶液稀释定容丙管（标准加样管）：供试品加水溶解标准铅溶液加入醋酸盐缓冲液（PH3.5）加水稀释定容分别加入硫代乙酰胺试液比色结果：当丙管颜色不浅于甲管使，乙管的颜色与甲管比，不得更深。3. 注意事项：加硝酸防止铅盐水解，便于保存；供试品若带有颜色，用外消色法消除影响（在加硫代乙酰胺试液前，在甲管滴加少量稀焦糖溶液或其他带颜色无干扰的溶液，使之与乙管，丙管保持颜色一致。 ） ；供试品若用强酸溶解，在加硫代乙酰胺试液前应先加氨水至溶液对酚酞指示液显中性，在加醋酸缓冲液调节酸度。第二法 炽灼后
14、的硫代乙酰胺法：适用于难溶于水，稀酸或与水互溶有机溶剂的有机药物，以及含有可与金属离子强配位基团的芳环，杂环药物。1. 原理：重金属可能会与含有强配位键的芳环、杂环药物形成牢固的价键作用，影响直接溶样检查；或者提供试品不溶解，可能包裹重金属。这时，需要将供试品炽灼破坏为重金属的氧化物残渣，并加硝酸进一步破坏，蒸干。加盐酸转化为易溶于水的氯化物，再按第一法进行检查。2. 方法：供试品炽灼破坏后，加硝酸进一步破坏，蒸干，加盐酸转化为易溶于水的氯化物，再按第一法检查。3. 注意事项：温度越高，重金属损失越多；加硝酸加热处理后，必须蒸干，除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化硫化氢析出硫，影响比色。第三法 硫化
15、钠法：本法适用于溶于碱性水溶液而难溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的药物。原理：在碱性介质中，以硫化钠为沉淀剂，使铅离子生成硫化铅微粒的混悬剂，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，判断供试品中重金属是否符合限量规定。四、砷盐检查法砷盐为毒性杂质，须严格控制其限量古蔡氏法1. 原理： 金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的砷斑，可用于砷盐的检查。2. 方法：标准砷斑的制备 标准砷溶液加盐酸，水加碘化钾试液，酸性氯化亚锡试液加入锌粒水溶 45min样品砷斑的制备：供试品溶液加盐酸，水加碘化钾试液，酸性氯化亚锡试液加入锌粒水溶 45
16、min比较砷斑颜色3. 注意事项：碘化钾及氯化亚锡的催化作用：1.加入碘化钾及氯化亚锡将五价砷还原为三价砷；2.产生的锌离子能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；3.氯化亚锡可与锌作用，在锌粒表面形成锌锡齐，起去极化作用，从而使氢气均匀而连续的发生；4.氯化亚锡与碘化钾可抑制锑化氢的生成；醋酸铅棉花吸收硫化氢气体；含硫药物的预处理：供试品若为硫化物，亚硫酸盐，硫代硫酸盐等，在酸性溶液中生成硫化氢或二氧化硫气体，干扰砷斑检查。预先加硝酸湿法消化处理，使硫化物氧化成硫酸盐，可消除干扰。五、干燥失重测定法1. 常压恒温干燥法：本法适用于受热较稳定的药物 1052. 减压干燥法与恒温减
17、压干燥法：本法适用于熔点低或受热分解的供试品减压干燥器 恒温减压干燥箱3. 干燥剂干燥法：本法适用于受热分解或易升华的供试品。常用干燥剂：变色硅胶 五氧化二磷 硫酸六、水分测定法1. 费休氏法原理：碘氧化二氧化硫为三氧化硫时，需要一定量的水分参与反应，根据定量反应关系和消耗碘的重量，可计算出参与反应的水分含量。无水吡啶和无水甲醇既参与反应又发挥溶剂的作用；反应完毕后多余的游离碘呈现红棕色，即可确定为终点。2. 费休氏试液的配制：碘+二氧化硫+无水吡啶+无水甲醇七、炽灼残渣检查法炽灼残渣是指有机药物或挥发性无机药物，在硫酸存在的条件下，进行炭化和炽灼后，所残留的非挥发性的硫酸盐灰分。通常用于有机
18、药物中非挥发无机杂质的检查与控制。1. 方法：取供试品，置已炽灼至恒重的坩埚中，加硫酸使润湿，缓缓低温加热至炭化，放冷至室温，精密称定后，再在 700-800炽灼至恒重，即得。2. 注意事项：一般应使炽灼残渣量为 1-2mg,残渣限量一般为 0.1-0.2 八、易炭化物检查法药物中存在的遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质称为易炭化物。第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析基本结构： 1.邻羟基苯甲酸类（水杨酸类）水杨酸 阿司匹林2.芳基丙酸类 布洛芬3.吲哚乙酸类 吲哚美辛 4.其他甾体类 对乙酰氨基酚理化性质：1.酸性游离的羧基2.水解性：阿司匹林和双水杨酯具有酯键，对乙酰氨基酚具有酰胺键
19、3.吸收光谱特征4.基团或元素特征：酮洛芬的二苯甲酮可与二硝基苯肼缩合显色鉴别实验：一、 与三氯化铁反应1. 水杨酸反应 水杨酸的水溶液加三氯化铁试液，即生成紫堇色配位化合物。中性或弱酸性（PH=4-6）条件下进行；本反应极为灵敏，宜在稀溶液中进行。2. 酚羟基反应 对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液即显蓝紫色。二、 缩合反应酮洛芬具有的二苯甲酮结构，在酸性条件下可与二硝基苯肼缩合成橙色偶氮化合物。三、 （水解后）重氮化-偶合反应对乙酰氨基酚具有潜在的芳伯氨基，在稀盐酸中加热水解生成氨基酚，后者具有游离的芳伯氨基，在酸性溶液中与亚硝酸钠试液进行重氮化反应，生成的重氮盐再与碱性B-萘酚偶合生成红
20、色偶氮化合物。四、 其他反应（一） 水解反应阿司匹林与碳酸钠试液加热水解，得到水杨酸钠及醋酸钠，加过量稀硫酸酸化后，则生成白色水杨酸沉淀，并发出醋酸的臭气、（二） 元素反应1. 氯元素 双氯芬酸钠与碱共热产生氯化物2. 硫元素 美洛昔康高温分解产生硫化氢气体，遇醋酸铅生成硫化铅黑色沉淀。有关物质的检查：（游离水杨酸）简答题ChP2005 曾用稀硫酸铁铵溶液显色反应检查游离水杨酸。但由于在供试品溶液制备过程中阿司匹林可发生水解产生新的游离水杨酸，所以 2010 年药典采用 1冰醋酸甲醇溶液制备供试品溶液，以防阿司匹林水解，同时采用高效液相色谱法检查。用十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)为填充剂，按外
21、标法以峰面积计算，游离水杨酸不得过 0.1。含量测定：(一)直接滴定法（原料药测定法）1.原理：将药物溶于中性乙醇、甲醇或丙酮中，以酚酞、酚红或酚磺酞为指示剂，用氢氧化钠滴定液直接滴定。2.注意事项：(1)滴定在不断振摇下稍快进行，防止局部碱液浓度过高导致阿司匹林水解；(2)受阿司匹林水解产物水杨酸和醋酸干扰，故不适用于水杨酸含量高的样品。(二)水解后剩余量滴定法1.方法：加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使酯键水解后，再用酸滴定液回滴定剩余的氢氧化钠滴定液，可显著提高测定的准确度和精密度。第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析基本结构：肾上腺素 麻黄碱理化性质：1.酚羟基特性：邻苯二酚结构，可
22、与重金属离子配位呈色，不稳定。2.弱碱性：烃氨基侧链 3.旋光性 4.紫外吸收特征鉴别实验：一、与铁盐的反应具有酚羟基取代的本类药物，可与三价铁离子配位显色(大多为绿色 )；加入碱性溶液即变色(大多为紫色)，随即被高铁离子氧化发生颜色变化(大多为紫红色)。选择1.肾上腺素：加盐酸溶解，三氯化铁(翠绿色) ，再加氨试液(紫色) ，最后变成紫红色2.盐酸异丙肾上腺素：三氯化铁(深绿色) ，加新制的 5碳酸氢钠溶液，即变蓝色，然后变红色3.重酒石酸去甲肾上腺素：三氯化铁(翠绿色) ，再缓缓加入碳酸氢钠试液，即显蓝色，最后变成红色盐酸去氧肾上腺素：三氯化铁(紫色)二、与甲醛-硫酸反应具有酚羟基取代的本
23、类药物，可与甲醛在硫酸中反应，形成具有醌式结构的有色化合物。肾上腺素-红色；异丙肾上腺素-棕色，暗紫色；去甲肾上腺素-淡红色；去氧肾上腺素-玫瑰红 橙红 深棕红三、还原性反应易被碘、过氧化氢、铁氰化钾等氧化剂氧化而呈现不同的颜色。1.肾上腺素+双氧水 肾上腺素红+放置棕红色多聚体2.异丙肾上腺素+ 碘 异丙肾上腺素红+硫代硫酸钠淡红色3.去甲肾上腺素+ 酒石酸氢钾饱和液 +碘试液+硫代硫酸钠无色或微红色或淡紫色四、氨基醇的双缩脲反应盐酸麻黄碱+硫酸铜与 20氢氧化钠显蓝紫色 加乙醚放置乙醚层显紫红色，水层变成蓝色。盐酸去氧肾上腺素+ 硫酸铜与氢氧化钠 显紫色加乙醚放置 乙醚层应不显色。五、脂肪
24、伯胺的 Rimini 试验ChP2015 重酒石酸间羟胺 +亚硝基铁氰化钠+丙酮+固体氢氧化钠，60 水浴 1min显红紫色盐酸多巴胺也可用此方法鉴别杂质检查：酮体杂质用紫外分光光度法含量测定：一、非水溶液滴定法基本原理：肾上腺素等为游离碱，直接与高氯酸反应。盐酸多巴胺等盐类药物的高氯酸滴定过程，实际上是一个置换滴定，即强酸(HClO4)置换出与有机碱结合的较弱的酸 (HA)。注意事项：1.适用范围：适用于 pKb8 的有机弱碱性药物及其盐类的含量测定； pKb为 8-10 时，宜选用冰醋酸为溶剂；pKb10 时，冰醋酸，醋酐为溶剂；pKb 12 时，醋酐为溶剂。2.酸根的影响：高氯酸氢溴酸硫
25、酸盐酸硝酸磷酸在非水介质中，高氯酸的酸性最强，有机弱酸碱均用此反应。测定卤醛盐时，置换出的氢卤酸相当强，影响滴定终点。可加入醋酸汞冰醋酸溶液，使其生成醋酸中难解离的卤化汞沉淀。3.滴定剂的稳定性：供试品与滴定液温度差在 10ChP2015 中硫酸沙丁胺醇的含量测定，要注意有机碱的硫酸盐，因硫酸在滴定液中酸性很强，只能滴定至硫酸氢根。二、溴量法ChP2015 盐酸去氧肾上腺素用此方法。第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析结构：对氨基苯甲酸酯类(盐酸普鲁卡因，盐酸丁卡因无芳伯氨基) 酰苯胺类( 盐酸利多卡因，盐酸罗哌卡因)理化性质：1.芳伯氨基特性：对氨基苯甲酸酯具有芳伯氨基，有重氮化-
26、 偶合反应；酰苯胺类药物在酸性溶液中，芳酰胺基可水解为芳伯氨基。2.水解性：对氨基苯甲酸酯有酯键，易水解3.弱碱性：脂烃胺侧链为叔胺氮原子(除苯佐卡因)4.与重金属离子反应特征：酰胺基上的氮可与水溶液在铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于三氯甲烷等有机溶剂而呈色。5.吸收光谱特性鉴别实验：一、重氮化-偶合反应橙黄色-猩红色沉淀盐酸丁卡因无此反应，但在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成 N-亚硝基化合物的乳白色沉淀。可与苯佐卡因，普鲁卡因，普鲁卡因胺区别。二、与金属离子反应利多卡因的鉴别：1.ChP2015 盐酸利多卡因 +碳酸钠试液+硫酸铜 蓝紫色配位化合物转入三氯甲烷中显黄
27、色。2.在酸性条件下与氯化钴试液反应，生成亮绿色细小钴盐沉淀。3.利多卡因的水溶液加硝酸酸化后，加硝酸汞煮沸，显黄色。对氨基苯甲酸酯类药物显红色或橙黄色，可与之区别。盐酸普鲁卡因胺的鉴别：可被浓的过氧化氢氧化成羟肟酸，再与三氯化铁作用形成配位化合物羟肟酸铁。紫红色暗棕色至棕黑色。含量测定：亚硝酸钠滴定法1.原理：芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示反应终点。2.测定的主要条件：(1)加入适量溴化钾加快反应速度，使得 NO+浓度增大(2)加过量盐酸加速反应：有利于 1.重氮化反应速度加快 2.重氮盐在酸性溶液中稳定 3.防止生
28、成偶氮氨基化合物而影响测定结果。但是，酸度过大 1.阻碍芳伯氨基的游离 2.使亚硝酸分解。所以，芳胺类药物与酸的摩尔比为 1：(2.56)(3)反应温度高，加快反应速度，但重氮盐分解也会加快。可在室温(1030 )下进行，其中 15结果较准确。(4)滴定速度：为避免亚硝酸挥发和分解，滴定速度不宜太快；滴定时宜将滴定管尖端插入液面下约 2/3 处，一次将大部分亚硝酸钠滴定液在搅拌条件下迅速加入；将滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗，再缓缓滴定；在近终点时，须在最后一滴加入后，搅拌 15 分钟，再确定终点是否真正达到。永停滴定法（指示终点滴定法）实验装置第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析结构：基
29、本母核-苯基-1,4-二氢吡啶理化性质：1.二氢吡啶环的还原性2.硝基的氧化性：可被还原剂(锌粉) 还原为芳伯氨基3.二氢吡啶环氨基质子解离性4.光不稳定性5.旋光性6.吸收光谱特征鉴别试验：一、化学鉴别法(一)与亚铁盐反应( 苯环硝基氧化性)尼莫地平+乙醇 +新制的硫酸亚铁铵 +硫酸(二)与氢氧化钠试液反应( 二氢吡啶环氨基质子的解离性)硝苯地平+丙酮 +20氢氧化钠 橙红色(三)沉淀反应( 弱碱性)与重金属盐类形成沉淀。尼莫地平+氯化汞 白色沉淀；尼群地平 +碘化铋钾橙红色沉淀(四)还原后重氮化- 偶合反应可用于鉴别硝苯地平，显红色。含量测定：铈量法(硫酸铈法)原理：二氢吡啶的还原性强酸
30、硫酸铈滴定四价铈离子黄色 三价铈离子无色自身可作指示剂，但不灵敏，常用邻二氮菲作指示剂，终点敏锐。终点时微过量的四价铈离子将指示液中的二价铁离子氧化成三价铁离子，使橙红色消失，以指示终点。特点：标准溶液稳定；反正简单，副反应少；专属性强；终点敏锐；适用范围广。第十章 巴比妥及苯二氮卓类镇静催眠药物的分析第一节 巴比妥类药物的分析结构：环状酰脲类镇静催眠药理化性质：1.弱酸性：1.3-二酰亚胺基团，酮式-烯醇式互变异构2.水解反应：酰亚胺结构，与碱液共沸，释放出氨气，可使红色石蕊试纸变蓝。用于鉴别异戊巴比妥和巴比妥。3.与金属离子的反应：丙二酰脲（-CONHCONHCO-）或酰亚胺基团与某些重金
31、属离子，生成有色沉淀。（1）与银盐的反应：巴比妥类药物分子中的酰亚胺基团，在碳酸钠溶液中，生成钠盐而溶解，再与硝酸银溶液反应，首先生成可溶性的一银盐，加入过量的硝酸银溶液，则生成难溶性的二银盐白色沉淀。（2 ）与铜盐的反应：巴比妥类药物与铜吡啶试液反应呈紫堇色或生成紫色沉淀，含硫巴比妥类药物则呈现绿色。（3 ）与钴盐的反应：生成紫堇色配位化合物，在无水条件下更灵敏。常用溶剂：无水甲醇或乙醇；钴盐为醋酸钴、硝酸钴或氯化钴；碱以有机碱为好，一般采用异丙胺。（4 ）与汞盐的反应：生成白色沉淀，此沉淀能在氨试液中溶解。4.与香草醛（Vanillin）的反应巴比妥类药物分子结构中，丙二酰脲基团中的氢比较
32、活泼，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，生成红棕色产物。BP2009 戊巴比妥的鉴别：戊巴比妥+ 香草醛+硫酸混合水浴显棕红色+乙醇颜色先变为紫色，再变为蓝色。4. 紫外吸收光谱特征：（1）在酸性溶液中，5,5-二取代和 1,5,5-三取代巴比妥类药物不电离，无明显的紫外吸收峰；（2）在 PH10 的碱性溶液中，发生一级电离，形成共轭体系结构，在 240nm 波长处有最大吸收峰；（3）在 PH13 的强碱性溶液中 5,5-二取代巴比妥类药物发生二级电离，引起共轭体系延长，导致吸收峰红移至 255nm;1,5,5-三取代巴比妥类药物，因 1 位取代基的存在，故不发生二级电离，最大吸收波长仍位
33、于 240nm。鉴别试验：（一） 丙二酰脲反应1. 银盐反应：加碳酸钠，滤过，滤液中加入硝酸盐试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀溶解；继续加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。 （异戊巴比妥）2. 铜盐反应：供试品加吡啶溶液溶解后加铜吡啶试液，显紫色或生成紫色沉淀。硫喷妥钠在吡啶试液和铜吡啶试液中，显绿色。（二） 特征基团反应1.利用硫元素的鉴别试验 硫代巴比妥类分子中含有硫元素，可在氢氧化钠溶液中与铅离子反应生成白色沉淀；加热后，沉淀转变为硫化铅的黑色沉淀。本试验可供硫代巴比妥与巴比妥类的区别。CHP2015 对注射用硫喷妥钠采用此法鉴别。2.利用不饱和取代基的鉴别试验 （1）与碘试液的反应：加碘
34、试液显棕黄色在 5 分钟内消失。司可巴比妥钠与溴试液，也可以发生加成反应，使溴试液褪色。（2 ）与高锰酸钾的反应：司可巴比妥钠分子中的烯丙基可将紫色的高锰酸钾还原为棕色的二氧化锰。3.利用芳环取代基的鉴别试验 （1 ）硝化反应：与硝酸钾和硫酸共热，生成黄色硝基化合物。（2 ）苯巴比妥+ 硫酸-亚硝酸钠 橙黄色橙红色苯巴比妥+ 甲醛- 硫酸玫瑰红色含量测定：银量法原理：在滴定过程中，巴比妥类药物首先形成可溶性的一银盐，当被测供试品完全形成一银盐后，继续用硝酸银滴定液滴定，稍过量的银离子就与巴比妥类药物形成难溶性的二银盐沉淀，使溶液变浑浊，以此指示滴定终点。巴比妥类药物：硝酸银+ 碳酸钠形成银盐再加硝酸银形成二银盐滴定剂：硝酸银（1:1 反应）溶剂系统：甲醇+3%无水碳酸钠终点指示：电位法（银-玻璃电极）溴量法注意事项：（1 ） 防止溴和碘的逸失，平行条件进行空白试验，立即密塞，微开瓶盖。（2 ） 淀粉指示液，近终点时加淀粉指示液，继续滴定至颜色消失。第二节 苯二氮卓类药物的分析
