1、组织基因组 DNA 提取试剂盒（磁珠法）使用说明书（Cat#Yu-TD02-1）【产品介绍】 组织基因组 DNA 提取试剂采用国内领先的专利技术合成的纳米磁珠颗粒和多次实验优化的缓冲液体系，能从样品中分离纯化高质量 DNA。在一定条件下，磁珠表面修饰的基团高效吸附目的 DNA，而当条件改变时，磁珠释放吸附的 DNA，达到快速分离纯化 DNA 的目的。整个过程安全、无毒、便利，提取的 DNA 质量稳定、纯度高。纯化后的 DNA 适用于多种后续实验。本试剂盒可以从少量动物组织中分离纯化出高质量、高浓度的 DNA。【产品特点】1. 效率高： DNA 提取得率高，操作简便。2. 安全、无毒害：整个操作
2、过程无需使用苯酚、氯仿等有毒物质，提取环境更加安全。3. 高纯度： OD260/230 在 1.5 左右，OD260/280 在 2.0 左右。可直接用于各种分子生物学实验。【试剂盒组成】试剂盒组成 数量 保存条件裂解吸附液 50mL1 瓶 室温避光保存Buffer AW1 12mL1 瓶 室温避光保存Buffer AW2 9mL1 瓶 室温保存洗脱液 5mL1 瓶 室温保存磁珠 0.5mL1 管 室温保存使用说明书 1 份【规格】50T/盒【自备试剂】无水乙醇，异丙醇【贮藏与有效期】裂解吸附液和 Buffer AW1 必须室温（15-25）避光保存；磁珠室温保存；其他所有试剂室温保存，有效期
3、为 1 年。【注意事项】1、Buffer AW1 使用前，加入 18mL 无水乙醇，混匀，使乙醇含量为 60%。2、Buffer AW2 使用前，加入 21mL 无水乙醇，混匀，使乙醇含量为 70%。3、磁珠使用前必须充分混匀。4、组织最好置于组织核酸（DNA/RNA）保存液（Cat#Yu-TP01）或液氮中保存。【操作步骤】1、样本的处理1.1、液氮中保存的组织 将组织在液氮中磨成粉末后，使液氮充分挥发。再以50-100mg 组织中加入 1mL 裂解吸附液，充分研磨 。以下进入步骤 2。1.2、组织保存液中保存的样本 取出在组织保存液中保存的组织，加入 1mL无水乙醇洗涤组织两次。再以 50
4、-100mg 组织中加入 1mL 裂解吸附液，充分研磨。以下进入步骤 2。2、吸取 400L 研磨后的裂解吸附液转入 1.5mL 的 EP 管中，加入 5L 蛋白酶K，601500rpm10 分钟。3、取出 EP 管，加入 250L 异丙醇和 10L 混匀的磁珠，闭盖，充分混匀。室温 1500rpm 振荡 10min。4、取出 EP 管，瞬时离心，将 EP 管放于磁力架上，吸附磁珠 4 分钟。5、在磁力架上，打开 EP 管盖，吸弃液体，保留磁珠。6、加入 600L Buffer AW1，闭盖。从磁力架上取下 EP 管，充分混匀使磁珠完全分散至洗液中。注：可以在漩涡振荡仪上 3000rpm 振荡
5、 20 秒，使 EP 管壁上的磁珠完全分散至洗液中。7、将 EP 管放回磁力架，吸附磁珠 3 分钟至液体清澈（吸附磁珠 2 分钟后，颠倒磁力架 3 次，使 EP 管盖上残留的磁珠被充分回收） 。打开 EP 管盖子，吸弃液体，保留磁珠（需吸干 EP 管底和管盖中的残留液体） 。注：由于各个实验室磁力架磁力不尽相同，吸附时间可以延长，直至液体清澈。8、加入 600L Buffer AW2，闭盖。从磁力架上取下 EP 管，充分混匀使磁珠完全分散至洗液中。注：可以在漩涡振荡仪上 3000rpm 振荡 20 秒，使 EP 管壁上的磁珠完全分散至洗液中。9、将 EP 管放回磁力架，吸附磁珠 2 分钟至液体
6、清澈（吸附磁珠 1 分钟后，颠倒磁力架 3 次，使 EP 管盖上残留的磁珠被充分回收） 。打开 EP 管盖子，吸弃液体，保留磁珠（需吸干 EP 管底和管盖中的残留液体） 。注：由于各个实验室磁力架磁力不尽相同，吸附时间可以延长，直至液体清澈。10、加入 600L 无水乙醇，闭盖。从磁力架上取下 EP 管，充分混匀使磁珠完全分散至无水乙醇中。注：可以在漩涡振荡仪上 3000rpm 振荡 20 秒，使 EP 管壁上的磁珠完全分散至无水乙醇中。11、将 EP 管放回磁力架，吸附磁珠 1 分钟至液体清澈（吸附磁珠 30 秒后，颠倒磁力架 3 次，使 EP 管盖上残留的磁珠被充分回收） 。打开 EP 管
7、盖子，吸弃液体，保留磁珠（需吸干 EP 管底和管盖中的残留液体） 。注：由于各个实验室磁力架磁力不尽相同，吸附时间可以延长，直至液体清澈。12、开盖，37金属浴晾干 3 分钟。13、在 EP 管中加入 50-100L 洗脱液，充分吹打混匀磁珠。闭盖， 50金属浴1500rpm 振荡孵育 5min。注：洗脱液的量可以根据需要调整。50振荡洗脱后不能离心收集磁珠，离心会导致 EP 管中的残留物进入洗脱液，从而抑制后续实验。14、将 EP 管放入磁力架上，吸附磁珠 2 分钟至液体清澈。打开盖子，吸取洗脱液转移至新的 EP 管（RNase-free）中。洗脱液即可直接用于下游实验，也可-80保存备用。注：提取过程中必须全程使用 RNase-free EP 管和 Tip 头。为了避免磁珠分离后的洗脱液中微量磁珠的残留，洗脱液转移至新的 EP 管后，可以10,000g 离心 1 分钟，以彻底去除磁珠。
