1、（20届）本科毕业设计乳制品中部分营养成分及元素检验技术TECHNIQUESOFPARTSNUTRIENTSANDELEMENTSINDAIRYPRODUCTS所在学院专业班级化学学生姓名学号指导教师职称完成日期年月I摘要【摘要】目的从元素角度和蛋白质含量方面来判断乳制品中的营养价值。方法采用凯氏定氮法要想准确测定出蛋白含量,可以先测定出总含氮量。再用三氯乙酸将样品溶液中的蛋白沉淀除去,然后测定溶液的非蛋白含氮量,最后从总含氮量中扣除非蛋白含氮量就可以比较准确地测定出样品的真正蛋白含量。采用分光光度发测定乳粉中的磷元素。采用沉淀滴定法测定乳粉中的氯元素。采用ICPAES测定奶粉中的微量元素CA
2、、FE、ZN。结果经各种方法测得的个样品的平行性良好，回收率和精密度在要求内，不合格样品所占比例极小。结论所用方法在现阶段符合国家要求，但细节处仍需注意。【关键词】乳制品；蛋白质；ICPAES；营养元素；检验技术。IITECHNIQUESOFPARTSNUTRIENTSANDELEMENTSINDAIRYPRODUCTSABSTRACT【ABSTRACT】OBJECTIVEMETHODSRESULTSCONCLUSION。【KEYWORDS】DARIYPRODUCTSPROTEINICPAES；NUTRIENTELEMENT；TECHNIQUES。III目录摘要IABSTRACTII目录III
3、1引言111食品安全112乳制品安全113常用蛋白质检测方法114乳制品中营养元素的测定现有的方法32凯氏定氮法测蛋白质和非蛋白氮421蛋白质的测定4211实验原理4212实验试剂4214仪器和设备5215样品处理与消化过程5216样品测定5217分析结果的表述622非蛋白氮的测定6221实验原理6222实验试剂6224仪器和设备7225样品处理与消化过程7226样品测定7227分析结果的表述73分光光度计法测磷731磷及日常所需量732实验原理833实验试剂834仪器设备835实验步骤836分析结果的表述94沉淀滴定法测氯1041氯1042实验原理1043实验试剂1044仪器设备1045实验
4、步骤1046分析结果的表述115ICPAES法测定奶粉中的微量元素1251待测的微量元素12511钙元素12512铁元素12513锌元素12IV52实验原理1354仪器设备136结果与讨论1661实验结果167结论18参考文献19致谢错误未定义书签。附录2111引言11食品安全随着生活水平的提高，人们对吃的要求越来越高，现在要求吃得营养均衡、全面，绿色食品、生态食品、无公害蔬菜、各种保健品层出不穷。人们不仅仅关注吃什么，更加关注怎么吃。然而随着生活节奏的加快，许多由吃引发的疾病也开始备受瞩目。食品安全已经成为一个社会性问题。12乳制品安全乳与乳制品，含有丰富的高质量蛋白、乳脂肪、糖类、维生素、
5、矿物质、免疫活性因子等营养成分。营养学研究表明，乳的生物学价值人体生理上的利用率为85，消化率为98。因其营养全面且易被吸收，乳与乳制品被认为是“接近完善的食品”。乳制品一直是饮食业的一大块，随着乳制品产业的发展早餐喝牛奶更是开始成为常识。近年来乳制品事故出了不少，使得大家将研究方向都集中到奶粉上去，三聚氰胺制造最初被用来提高乳制品中的蛋白质含量，各种食品添加剂制造最初也是为了增加各种营养和保鲜等功能。奶粉的主要食用对象是婴幼儿和老年人，所以乳制品的安全在食品安全中占有很大的一部分。无机营养成分就是平常所说的矿物质、无机盐或无机元素。无机营养元素CA、FE、ZN、MG、CU等在人机体内部代谢过
6、程中起着极其重要的生理作用,对维持正常的生命活动,预防疾病都有重要的生物化学价值。各种无机元素的缺乏或过盛都会引起人体生理机能的失调和紊乱，甚至会导致各种疾病。牛乳及乳制品是无机元素含量比较丰富的食品。如何从元素的角度来分析评价乳制品的安全就是我们实验的意义乳制品的种类很多包括乳粉、酸乳、高温灭菌乳、巴氏杀菌乳、纯牛奶等，我们主要研究测定乳粉的钙铁锌、氯、磷、非蛋白氮、蛋白质、脂肪等的含量的方法，以及如何用最简便的方法测得最多的结果各种不同元素测定时消解方法的不同，重点是蛋白质和非蛋白氮的测定，现在通常用的测定方法就是凯氏定氮法，市场上出售的各种蛋白质仪也多是以这种方法为原理。13常用蛋白质检
7、测方法蛋白质的测定方法分为两大类一类是利用蛋白质的共性,即含氮量,肽链和紫外吸收测定蛋白质含量,另一类是利用蛋白质中的特定氨基酸残基以及酸、碱性基团和芳香基团测定蛋白质含量。由于食品种类很多,食品中蛋白质含量又各不相同,特别是其他成分,如碳水化合物,脂肪和维生素的干扰成分很多。方法凯氏定氮法KJEDAHL法双缩脲法BIURETFOLIN2酚试剂法LOWRY紫外吸收法考马斯亮蓝法BRADFORD法2法法灵敏度灵敏度低，适用于0210MG氮，误差为2灵敏度低120MG灵敏度高约5LG较为灵敏50100LG灵敏度最高15LG时间费时810小时中速2030分钟慢速4060分钟快速510分钟快速515分
8、钟原理将蛋白质转化为氮，用酸吸收后滴定测定，再转换成蛋白质含量肽键与碱性CU2生成紫色络合物,通过紫外测定双缩脲反应磷钼酸2磷钨酸试剂被TYR和PHE还原蛋白中的酪氨酸和色氨酸残基在280NM的光吸收考马斯亮蓝染料与蛋白质结合时,其KMAX由465NM变为595NM干扰物质非蛋白氮（可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离）硫酸铵K、NA、MG2TRIS缓冲液某些氨基酸硫酸铵TRIS缓冲液甘氨酸各种硫醇各种嘌呤和嘧啶各种核苷酸强碱性缓冲液SDSTRITONX2100说明用于标准蛋白质含量的准确测定；干扰少；费时长用于快速测定,但不太灵敏不同蛋白质显色相似费时较长操作要严格计时颜色深浅与蛋白有关用于层析柱检
9、测核酸吸收可以校正干扰物质少颜色稳定颜色深浅与蛋白质有关方法凯氏定氮法KJEDAHL法双缩脲法BIURET法FOLIN2酚试剂法LOWRY法紫外吸收法考马斯亮蓝法BRADFORD法灵敏度灵敏度低，适用于0210MG氮，误差为2灵敏度低120MG灵敏度高约5LG较为灵敏50100LG灵敏度最高15LG时间费时810小时中速2030分钟慢速4060分钟快速510分钟快速515分钟原理将蛋白质转化为氮，用酸吸收后肽键与碱性CU2生成紫双缩脲反应磷钼酸2磷钨蛋白中的酪氨酸和色氨考马斯亮蓝染料与蛋白质结合时,3滴定测定，再转换成蛋白质含量色络合物,通过紫外测定酸试剂被TYR和PHE还原酸残基在280NM
10、的光吸收其KMAX由465NM变为595NM干扰物质非蛋白氮（可用三氯乙酸沉淀蛋白质而分离）硫酸铵K、NA、MG2TRIS缓冲液某些氨基酸硫酸铵TRIS缓冲液甘氨酸各种硫醇各种嘌呤和嘧啶各种核苷酸强碱性缓冲液SDSTRITONX2100说明用于标准蛋白质含量的准确测定；干扰少；费时长用于快速测定,但不太灵敏不同蛋白质显色相似费时较长操作要严格计时颜色深浅与蛋白有关用于层析柱检测核酸吸收可以校正干扰物质少颜色稳定颜色深浅与蛋白质有关食品中蛋白质含量常用凯氏定氮法来测定，因其通用性强,测定费用低,仪器简单,且比较准确，通常测定总氮量,然后乘以氮换算为蛋白质的系数得到蛋白质含量,实际上这样测定的蛋白
11、质含量包括核酸、生物碱、含氮类脂、卟啉和含氮色素等非蛋白质含氮化合物,故称为粗蛋白质。该方法的缺点是耗时长,灵敏度低,样品中的含氮化合物会影响蛋白含量的测定。要想准确测定出蛋白含量,可以先测定出总含氮量。再用三氯乙酸将样品溶液中的蛋白沉淀除去,然后测定溶液的非蛋白含氮量,最后从总含氮量中扣除非蛋白含氮量就可以比较准确地测定出样品的真正蛋白含量。14乳制品中营养元素的测定现有的方法营养元素指在人体中的含量不多，却与人类生存密切相关的微量元素。已被确认的与人类生命有关的必需微量元素有18种。每种微量元素都有一定的生理功能，这些元素的过量摄入、不足、或缺乏都会引起人体的异常。本实验测定的微量元素为钙
12、、铁、锌三种元素。常用的检测微量元素的方法有火焰原子发射光谱法、石墨炉原子发射光谱法等，用三氯乙酸做沉淀剂沉淀乳及乳制品中的有机物如蛋白质、脂肪等物质，滤液直接进样，用连续光源火焰原子吸收光谱仪测定钾、钙、钠、镁、铜、锌的含量。利用火焰原子吸收分光光度计直接进样检测液态乳及乳粉中的微量元素。酶解火焰原子吸收分光光度法AAS法测定乳制品中钙、镁、铁锌4种营养元素的方法。方法以蛋白酶水解样品，稀酸溶解，经过滤后以火焰AAS法测定。结果4种元素的平均回收率为90102RSD11。结论酶解火焰AAS法具有操作简单快速试验成本低对人体损害小等优点与酸消化法相比无显著性差异适用于乳制品中4种营养元素的测定
13、。42凯氏定氮法测蛋白质和非蛋白氮21蛋白质的测定蛋白质是一大类由氨基酸组成的高分子有机化合物，含有氮、碳、氢、氧等主要元素和少量的硫、磷、铁等元素。蛋白质又分为完全蛋白质和不完全蛋白质。食物蛋白质中有20多种氨基酸，其中有8种是机体不能合成而必须由食物供给的，称为必需氨基酸。富含必需氨基酸，品质优良的蛋白质统称完全蛋白质，如奶、蛋、鱼、肉类等属于完全蛋白质，植物中的大豆亦含有完全蛋白质。缺乏必需氨基酸或者含量很少的蛋白质称不完全蛋白质，如谷、麦类、玉米所含的蛋白质和动物皮骨中的明胶等。211实验原理样品中的蛋白质在加热高温的条件下，经浓硫酸和催化剂消化后，分解的氨与硫酸反应生成硫酸铵，然后碱
14、化蒸馏使氨游离。用1硼酸吸收液吸收生成硼酸铵，其反应式为2NH34H3BO4NH42BO45H2O。用硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。212实验试剂除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。硫酸铜（CUSO45H2O）；硫酸钾（K2SO4）；浓硫酸（无N，工业用H2SO4，密度为184G/L）；硼酸（H3BO3）；甲基红（C15H15N3O2）；溴甲酚绿（C21H14BR4O5S）；氢氧化钠（NAOH，工业用）；甲醇溶液，凯氏催化片。213溶剂制备催化剂9硫酸钾（K2SO4）G1G硫酸铜（CUSO45H2O）氢氧化钠溶
15、液（400G/L）称取500G氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释至1L。硫酸标准滴定溶液（00500MOL/L）或盐酸标准滴定溶液（00500MOL/L）。甲基红甲醇溶液称取100MG甲基红，溶于100ML甲醇中。溴甲酚绿甲醇溶液称取100MG溴甲酚绿，溶于100ML甲醇中。硼酸吸收液100G硼酸溶解与10L去离子水中，加入100ML溴甲酚绿溶液加入70ML甲基红溶液，然后用碱液调整PH至42左右，颜色为灰色。取25ML上述步骤配好的硼酸溶液于一个锥形瓶中，加入100ML蒸馏水，此时溶液应该变灰蓝色。如果溶液仍然是红的，则应加碱调节，可用01M的NAOH滴定至灰色。然后可根据下面的公式再调节剩余
16、的硼酸5需用的10M的NAOH体积数01M的NAOH体积数40将计算好的10M的NAOH加入到硼酸溶液中。10ML溴甲酚绿，7ML甲基红1000ML硼酸溶液001MOL/LNAOH15ML。214仪器和设备感量为1MG的天平；瑞士FOSS公司型号为KJELTEC2300自动凯氏定氮仪，FOSS250ML消化管，消化炉，2500ML移液管。215样品处理与消化过程用感量为1MG的分析天平称取02G05G固体样品、半固体样品022G液体样品1025G或120ML（约含3040MG氮，使测定结果在仪器检测范围内）。称取固体样品时用滤纸，称取后将样品和滤纸放入FOSS250ML消化管中，每个样品都做平
17、行双样，样品空白只加滤纸，做两个样品空白。向消化管中加入2片凯尔特催化片，或者加入1G五水合硫酸铜9G硫酸钾作为催化剂。用2500ML移液管加入12ML左右硫酸，同一批次实验加入硫酸量相同。将消化管放在消化炉上，将涤气装置接在消化管架中的消化管上，将水抽气泵水龙头全开。使消化过程产生的酸雾被吸走。消化炉设置为4201H，消化完全的状态是全部样品变为透明的蓝绿色澄清液体，若样品没有消化完全，可适当延长消化时间。消化完毕后，将消化管连同消化管架和涤气罩一起从消化器中取出，冷却1020分钟。在每个消化管中仔细加入50ML蒸馏水。216样品测定检查硼酸吸收液、碱液（NAOH或KOH）、水、标准酸溶液、
18、废液缸的液面是否符合要求。开机，仪器自检，SELECTFUNCTION。进入启动程序，选择手动程序FILLEMPTY两个选项赶走气泡。选择手动蒸馏程序，左右调动PROGRAM，选择方法1【KJEDAHL1】。先RESULT左右选BLANK。先做蒸馏水空白。做两次直到空白值是007ML左右。再做样品空白，得到平均值。开始测定样品，RESULT（左右选TITRANT），将上面的样品空白平均值输入到BLANK的位置，系统可自动扣除空白值。将结果记录下来。将消化管放入蒸馏器，关上安全门。系统自动按设定的程序运行。运行时溶液的状态，开始为蓝色，加碱后变为黑色，滴定过程中颜色不断变化，终点为酒红色。结束后
19、，用蒸馏水洗涤两次，关机后加蒸馏水至滴定缸刻度。方法1【KJEDAHL1】6将2530毫升吸收液加入锥形吸收瓶，放入蒸馏器，使馏出液出口浸入吸收液中。将50毫升3540NAOH加入消化管蒸汽阀和蒸馏循环自动控制。当蒸馏结束时，有一个分隔阀阻止液体倒吸。本实验用的标准酸溶液为标定过的01021MOL/L的HCL溶液。217分析结果的表述试样中蛋白质的含量按式（1）进行计算。XVV0F0140C/M式中X试样中蛋白质的含量，（）；V试液消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（ML）；V0试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（ML）；C硫酸或盐酸标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升（M
20、OL/L）；0014010ML硫酸C1/2H2SO41000MOL/L或盐酸CHCL1000MOL/L标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克（G）；M试样的质量，单位为克（G）；F氮换算为蛋白质的系数。纯乳与纯乳制品为638。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，蛋白质含量1G/100G时，结果保留三位有效数字；蛋白质含量1G/100G时，结果保留两位有效数字。22非蛋白氮的测定乳与乳制品中的非蛋白氮MPN，是指乳与乳制品中非蛋白状态的含氮元素的化合物。在动物饲养业中，非蛋白氮作为反刍动物饲料的蛋白代替物，用做补充反刍动物对日粮蛋白的需要。牛乳中大约含05的含氮化合物，蛋白质占含
21、氮化合物的95，非蛋白氮占含氮化合物的5。221实验原理用15的三氯乙酸溶液沉淀蛋白质，滤液经消化蒸馏后，用001MOL/L的盐酸溶液滴定，计算氮含量，即为样品的非蛋白氮的含量。222实验试剂一级水，蔗糖含氮量质量分数不大于0002，使用之前不能在烘箱中干燥。150G/L三氯乙酸溶液。中速定量滤纸。盐酸为优级纯国药集团化学试剂有限公司；其他试剂均为分析纯国药集团化学试剂有限公司。223溶剂制备7同213。224仪器和设备同214。225样品处理与消化过程液体样品准确称取样品10G，精确至00001G，至已称量的烧杯中待测。固体样品准确称取样品10G，精确至00001G，置于烧杯中。乳粉加入90
22、ML温水，搅拌均匀；干酪加入40ML温水，均质机干浆溶解；黄油温热融化。吸取10ML于预先已称量的烧杯中，称量，待测。量取40ML三氯乙酸溶液，摇匀准确称量，静置5MIN，用中速滤纸过滤，收集澄清滤液。取20G左右滤液于消解管，精确至00001G，再加入01GCUSO45H2O，2GK2SO4及125ML浓硫酸。置于消解仪中，420消解1H。取下放冷，加入50ML去离子水，进行定氮蒸馏。226样品测定样品空白取01G蔗糖于离心管中，加入16ML三氯乙酸溶液。按上法进行处理，并进行定氮蒸馏。定氮蒸馏同216227分析结果的表述X14001C（VV0）M20065M1/（M3M1）X试样中非蛋白氮
23、的含量，（）；V试液消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（ML）；V0试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（ML）；C硫酸或盐酸标准溶液浓度，单位为摩尔每升（MOL/L）；M1试样的质量，单位为克（G）；M2加入40ML三氯乙酸溶液后试样质量，单位为克（G）M3用于消化的滤液质量，单位为克（G）。3分光光度计法测磷31磷及日常所需量磷是机体极为重要的元素之一，磷是人体遗传物质核酸的重要组分，对生物体的遗传代谢、生长发育、能量供应等方面都是不可缺少的。也是人类能量转换的关键物质三磷酸腺苷ATP的重要成8分，磷还是多种酶的组分，生物膜磷脂的组分，是构成骨骼、牙齿的重要成分，对人
24、体生命活动有十分重要的作用。磷也是生物体所有细胞的必需元素，是维持细胞膜的完整性、发挥细胞机能所必需的。磷脂是细胞膜上的主要脂类组成成分，与膜的通透性有关。它促进脂肪和脂肪酸的分解，预防血中聚集太多的酸或碱，磷的功能也影响血浆及细胞中的酸碱平衡，促进物质吸收，刺激激素的分泌，有益于神经和精神活动。由于磷来源广泛，通常饮食中也能获得足够的磷，故我国未制定每日磷的推荐量。美国国家科学研究委员会的推荐量6个月前婴儿每天为240毫克，6个月到1岁360毫克，1岁以上至成年人均为每天800毫克。其中1118岁的青少年因处于发育迅速阶段，每天为1200毫克。妊娠期和哺乳期的妇女每天也需增加400毫克。32
25、实验原理试样经酸氧化，使磷在硝酸溶液中与钒钼酸铵生成黄色络合物。用分光光度计在波长440NM处定吸光度，其颜色的深浅与磷的含量成正比。33实验试剂除非另有说明所用试剂均为分析纯，水为三级水。硝酸优级纯；高氯酸优级纯；钼酸铵（NH4）6MO7O244H2O；偏钒酸铵NH4VO3；氢氧化钠NAOH；磷酸二氢钾标准品KH2PO4；2,6二硝基酚或2,4二硝基酚C6H3OHNO22；硫酸优级纯。34仪器设备感量为01MG的分析天平；电热板；分光光度计。35实验步骤351试剂制备钒钼酸铵试剂A液25G钼酸铵（NH4）6MO7O244H2O），溶于400ML水中。B液125G偏钒酸铵（NH4VO3）溶于3
26、00ML沸水中，冷却后加250ML硝酸，将A液缓缓倾入B液中，不断搅匀，并用水稀释至1L，贮于棕色瓶中。氢氧化钠溶液（6MOL/L）称取240G氢氧化钠，溶于1000ML水中。氢氧化钠溶液（01MOL/L）称取4G氢氧化钠，溶于1000ML水中。硝酸溶液（02MOL/L）吸取125ML硝酸，用水稀释至1000ML。磷的标准贮备液（50G/ML）称取在1051烘干至恒重的磷酸二氢钾标准品02197G，溶于400ML水中，加8ML硫酸，定容至1L。可长久贮存。二硝基酚指示剂（2G/L）称取02G2,6二硝基酚或2,4二硝基酚溶于100ML水中。9352样品制备方法一称取5G左右样品（精确至）于坩埚
27、中，放在电热板上125W加热至不冒烟后5MIN是样品呈灰白状态。转入马弗炉中在500550下消化2H。在坩埚中加入5MLHCL溶液，放在电热板上加热，使充分溶解，过滤后转入50ML螺旋管内，用20HCL定容后充分振荡。稀释10倍。同时做两个样品空白。方法二称取05G固体试样，25G液体试样（精确至01MG），于125ML三角瓶中，放入几粒玻璃球，加10ML硝酸，然后放在电热板上加热。待剧烈反应结束后取下，稍冷却，再加入10ML高氯酸，重新放于电热板上加热。若消化液变黑，取下后再加入5ML硝酸继续消化，直到消化液变成无色或淡黄色，且冒出白烟，在消化液剩下3ML5ML时取下，冷却，转入50ML容量
28、瓶中，定容。同时做空白试验。353标准曲线分别吸取磷的标准贮备液0ML，25ML，5ML，75ML，10ML，15ML，分别放入50ML容量瓶中。加入1000ML钒钼酸铵试剂，定容至刻度。该系列标准溶液中磷的浓度分别为0G/ML，25G/ML，5G/ML，75G/ML，10G/ML，15G/ML。在2530下显色15MIN。用1CM比色皿，于波长440NM处测定吸光值。以吸光值为纵坐标，以磷的浓度为横坐标，绘制标准曲线。354试样测定吸取试液10ML于50ML容量瓶中，加少量水后，加2滴二硝基酚指示剂，先用氢氧化钠溶液调至黄色，再用硝酸溶液调至无色，最后用氢氧化钠溶液调至微黄色。加入1000M
29、L钒钼酸铵试剂，定容至刻度。以空白溶液调零。用1CM比色皿，于波长440NM处测定吸光值。得到当时的磷含量。36分析结果的表述试样中磷的含量按下式计算XCVV2/MV11000100X试样中磷的含量，单位为毫克每百克（MG/100G）；C从标准曲线中查得试样溶液中磷的浓度，单位为微克每毫升（G/ML）；V试样消化后定容体积，单位为毫升（ML）；V1吸取样液体积，单位为毫升（ML）；V2比色液定容体积，单位为毫升（ML）；M样品的质量，单位为克（G）。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。104沉淀滴定法测氯41氯氯是人体必需常量元素之一，是维持体液酸碱和电
30、解质平衡中所必需的，也是胃液的一种必需成分氯离子还参与胃液中胃酸形成，胃酸促进维生素B12和铁的吸收；激活唾液淀粉酶分解淀粉，促进食物消化；刺激肝脏功能，促使肝中代谢废物排出；氯还有稳定神经细胞膜电位的作用等。我国提出中国居民膳食适宜摄入量（AI）为3400MG/D。42实验原理有机酸沉淀样品中的蛋白质，用硝酸银溶液滴定试样中的氯离子，生成氯化银沉淀；过量的硝酸银与指示剂铬酸钾反应生成铬酸银使溶液呈桔红色即为滴定终点。由硝酸银溶液的消耗量计算试样中的氯含量。43实验试剂除非另有说明所用试剂均为分析纯，水为三级水。氢氧化钠（NAOH）；铬酸钾（K2CRO4）；氯化钠标准品（NACL）纯度99；硝
31、酸银（AGNO3）；三氯乙酸溶液（500G/L）；氢氧化钠溶液（50G/L）；硝酸溶液（01MOL/L）；铬酸钾溶液（50G/L）。44仪器设备感量为01MG的分析天平；100ML的容量瓶；125ML的三角瓶；10ML的棕色滴定管。45实验步骤451试剂制备氯化钠标准溶液（01MOL/L）称取经50050烘至恒重的氯化钠标准品58440G于1000ML容量瓶中，用去离子水溶解并定容；硝酸银溶液（005MOL/L）称取850G（精确至001G）硝酸银标准品，于100ML烧杯中，用少量水溶解后转移到1000ML容量瓶中，用水定容，摇匀，避光贮存，或转移到棕色容量瓶中。取10ML01MOL/L氯化钠
32、标准溶液于125ML容量瓶中，加10滴铬酸钾溶液，用上述硝酸银溶液滴定，根据消耗的硝酸银溶液体积，按式计算硝酸银溶液的实际浓度。酚酞乙醇指示剂（10G/L）称取1G酚酞溶于100ML乙醇（95）中。452样品制备称取混合均匀的试样10G（精确至00001G）于小烧杯中，加50ML水溶解后移入100ML容量瓶中，加三氯乙酸溶液10ML混匀定容，静置约1MIN后过滤。吸取滤液10ML于125ML三角瓶中，加三滴酚酞指示剂，用氢氧化钠溶液调节至微红色。11用硝酸溶液回调至红色刚好退去。再加10滴铬酸钾溶液后用硝酸银溶液滴定至桔红色1MIN内不褪色，即为终点，滴定时在底端放一白色纸，更易于辨认终点。同
33、时做空白试验。46分析结果的表述试样中氯的含量按式（5）计算式中X2试样中氯的含量，单位为毫克每百克（MG/100G）；V3滴定样液所消耗的硝酸银溶液的体积，单位为毫升（ML）；V4空白液所消耗的硝酸银溶液的体积，单位为毫升（ML）；C3硝酸银溶液的浓度，单位为摩尔每升（MOL/L）；V5样液体积，单位为毫升（ML）；V6吸取滤液体积，单位为毫升（ML）；M2样品的质量，单位为克（G）。125ICPAES法测定奶粉中的微量元素51待测的微量元素511钙元素钙是人体内含量最多的无机盐正常人体内钙的含量为12001400克，约占人体重量的1520，其中99存在于骨骼和牙齿之中。另外，1的钙大多数呈
34、离子状态存在于软组织、细胞外液和血液中，与骨钙保持着动态平衡。另一方面则可参与各种生理功能和代谢过程，影响各个器官组织的活动。钙的推荐每日供给量标准如下从初生到10岁儿童600毫克，1013岁800毫克，1316岁1200毫克，16L9岁1000毫克，成年男女600毫克，孕妇1500毫克，乳母2000毫克。青春期前儿童生长发育迅速，钙的需要量也相对最大，可达成人需要量的24倍，需要特别注意补充。512铁元素是人体含量的必需微量元素，人体内铁的总量约45克，是血红蛋白的重要部分，这种矿物质而已存在于向肌肉供给氧气的红细胞中，还是许多酶和免疫系统化合物的成分，人体从食物中摄取所需的大部分铁，并小心
35、控制着铁含量。成人体内铁的总量约为45G，其中72以血红蛋白、3以肌红蛋白、02以其他化合物形式存在；其余则为储备铁，以铁蛋白的形式储存于肝脏、脾脏和骨髓的网状内皮系统中，约占总铁量的25。食物中的铁主要以FEOH3络合物的形式存在，人体每日适宜的摄取量日摄入量年龄男女孕妇005岁03MG怀孕早期15MG05岁1岁10MG1岁4岁2MG怀孕中期25MG4岁11岁12MG11岁14岁16MG18MG怀孕后期35MG14岁18岁20MG25MG8岁50岁15MG20MG哺乳期25MG50岁15MG513锌元素锌元素指挥和监督躯体各种功能的有效运作以及酶系统和细胞的维护，是合成蛋白质和DNA的主要物
36、质。它能指挥肌肉的收缩、帮助形成胰岛素，是稳定血液状态、维持体内酸碱平衡的重要物质，使前列腺正常运作，并且是生殖器官发育的重要物质。主要功效加速人体内部和外部伤口的13愈合；消除指甲上的白色斑点；防止味觉丧失；有助于对生殖能力障碍的治疗；有助于预防前列腺疾病；促进生长发育和使思维敏捷；减少胆固醇的蓄积；有助于治疗精神失常。建议日摄取量成人建议每日摄取1215MG。妊娠期和哺乳期的女性需要稍多一些。缺乏症体内缺乏锌元素会导致前列腺肥大、生殖功能减退和动脉硬化、贫血等疾病。大量地摄取锌元素可能会抑制机体的免疫功能，但是不易发生锌中毒。食物来源肉类、肝、海鲜、啤酒、南瓜子、栗子、蛋、乳品、芝麻、芥末
37、等。52实验原理试样消解后，稀释至仪器可测浓度后，用电感耦合等离子体原子发射光谱仪进行测定。53实验试剂除非另有说明所用试剂均为优级纯，水为一级水。盐酸；硝酸HNO3；硝酸溶液（体积比50）；盐酸A（体积比4）；盐酸B（体积比40）；元素标准储备溶液单元素标准储备溶液可按GB/T602方法配制，也可使用有证国家标准物质，其质量浓度为10MG/ML或05MG/ML。54仪器设备电感耦合等离子体原子发射光谱仪；感量为1MG的分析天平；马弗炉；电炉1KW2KW；瓷坩埚。螺旋管，共振仪离心管。55实验步骤551试样制备称取5G试样（精确至0001G）于瓷坩埚中，在电炉上微火炭化至不冒烟，移入马弗炉中5
38、50加热2H，如有黑色炭粒，冷却后加少许硝酸溶液湿润，小火蒸干后再移入马弗炉中550加热半小时，取出冷却，加40盐酸5ML，在电炉上小心加热使灰分充分溶解，冷却后转移至25ML容量瓶中，定容至刻度，若有沉淀需过滤。待测。所有样品都做平行双样，并且做两个样品空白。用加标法来测样品的回收率。552仪器参考操作条件功率120KW，等离子气流量15L/MIN，雾化器压力200KPA，辅助气流量150L/MIN，仪器稳定延时15S，进样延时20S，读数次数2次，各元素推荐使用分析谱线见表二。表二元素推荐使用分析谱线元素名称分析谱线波长（NM）GA315887,31793314FE234350,23820
39、4,259940ZN202548,206200553混合标准溶液的配制由储备液用盐酸逐级稀释配成如表三浓度系列的混合标准溶液。表三混合标准溶液各元素的浓度序号GA（G/ML）FEG/MLZNG/ML100025005503100110042001515052502200650025250线性方程Y7993X39790Y79770X39423Y64030X38818相关系数099980999909993检出限（MG/100G）0700030002554测定参考表二的条件对仪器进行优化后，依次测定标准溶液、空白溶液和试样溶液。若试样溶液中某元素浓度超出工作曲线范围，可用盐酸A对试样溶液进行适当稀释
40、后再测定。56分析结果的表述各元素的含量X式中X被测元素含量，单位为毫克每百克（MG/100G）；C1试样溶液中元素的浓度，单位为微克每毫升（G/ML）；C2空白溶液中元素的浓度，单位为微克每毫升（G/ML）；V试样溶液体积，单位为毫升（ML）；F试样溶液稀释倍数；M试样的质量，单位为克（G）。15以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。精密度在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。检出限钙07MG/100G，镁02MG/100G，铁0003MG/100G，锰0005MG/100G，铜0002MG/100G，锌0002MG/10
41、0G，钾07MG/100G，钠16MG/100G。166结果与讨论61实验结果粗蛋白含量全部在合格范围内。66个样品的非蛋白氮含量在003，20样品的非蛋白氮含量在002，非蛋白氮含量在002003的样品占样品总数的935，001占33，004占22，005占11。94个样品中的钙含量其中小于标准占样品总数的213，超过占样品总数的425。94个样品中的铁含量其中小于标准占样品总数的213，超过占样品总数的531。94个样品中的锌含量其中小于标准占样品总数的319，425超过占样品总数的。62非蛋白氮精密度试验、空白试验和添加回收试验结果滴定平均体积ML非蛋白氮含量平均值平均回收率（）RSD（
42、）空白N5）0655300073/203添加浓度002N5005N5010N500216005080102300216005080102399891016210232223156133使用硫酸铵做添加回收试验，在添加浓度00201范围内，相对标准偏差均低于3，回收率在998910232。63CA、FE、ZN回收率实验元素添加水平（MG）平均回收率（）标准偏差（）RSDCA10925610236050992319552010010865189608FE190566016255926812506311095121059620ZN19969910505598232685021097662865111
43、7对同一种样品进行3种元素加标回收实验每次回收各测3次得出平均回收率。测定计算平均回收率为886610865，RSD在3689。经方法学验证，在实验浓度范围内。R0999以上，回收率在886610865之间。表明该方法符合微量元索检测要求。精密度实验的RSD分别在3689之间。64精密度试验随机取一份样品，做了十一个平行样，按样品的实验方法重复试验，测得元素的RSD。测定次数钙含量（MG/100G14840024804634862744862754821564842174816584792294847010482481148359相对标准偏差为0027各个元素的RSD相对标准偏差为在00212
44、01之间，说明该方法的重现性良好。不同样品的重现性结果不好，需根据漂移值计算结果。187结论实验表明乳粉中的非蛋白氮含量很低，正常情况下可直接用凯氏定氮法测得的粗蛋白来检测蛋白质含量是否达标。ICPAES法测定奶粉中的微量元素的试验方法已经成熟，但是仪器状态不稳定，仪器的最佳工作条件的选择以及稳定性需要进一步研究以使得方法的推广。19参考文献【1】RYUMONHONDA,KENJITAWARA,MUNEKONISHIJO,HIDEAKINAKAGAWA,KYOKOTANEBE,SHIGERUSAITOCADMIUMEXPOSUREANDTRACEELEMENTSINHUMANBREASTMIL
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