1、（20届）本科毕业设计三聚氰胺分析检测方法研究进展THERESEARCHPROGRESSOFMELAMINEANALYTICALMETHOD所在学院专业班级应用化学学生姓名学号指导教师职称完成日期年月I摘要【摘要】三聚氰胺引发的宠物食品事件和婴幼儿配方奶粉事件使人们对食品和饲料中三聚氰胺的关注越来越多。本文主要介绍了三聚氰胺的化学和物理性质、用途，及其对人体健康存在的危害。并且对现有的三聚氰胺的检测方法进行了详细综述，并对各种方法的优缺点进行了比较，最后对三聚氰胺的检测方法进行了展望。【关键词】三聚氰胺；危害；分析检测方法。IITHERESEARCHPROGRESSOFMELAMINEANAL
2、YTICALMETHODABSTRACT【ABSTRACT】MELAMINECAUSINGTHEPETFOODEVENTSANDINFANTFORMULAMILKPOWDEREVENTSINFOODANDFEEDMELAMINEMAKEPEOPLEPAYMUCHATTENTIONTHISARTICLEMAINLYINTRODUCESTHEMELAMINECHEMICALANDPHYSICALPROPERTIESANDAPPLICATION,ANDTHEPOTENTIONHARMTOHUMANHEALTHITDETAILYINTRODUCESTHEEXISTINGDETECTIONMETHODS
3、ANDCOMPARESTHEADVANTAGEANDDISADVANTAGEOFTHESEMETHODSFINALLYPROSPECTSTHEDETECTIONMETHODS【KEYWORDS】MELAMINEHARMANALYTICALMETHODIII目录1引言711三聚氰胺的化学和物理性质712三聚氰胺的用途72三聚氰胺的危害821三聚氰胺的代谢822三聚氰胺的毒性823三聚氰胺的中毒症状和中毒机制824三聚氰胺同系物的毒性93三聚氰胺的检测方法931苦味酸法和升华法932电位滴定法1033气相色谱质谱联用检测方法GCMS1034高效液相色谱法1035液相色谱串联质谱法1136超高效液相
4、色谱与质谱联用1137不同电离方式质谱法1138毛细管电泳技术1339光谱法13391拉曼光谱法13392红外光谱法14393核磁共振法14310化学发光法14311纳米粒子颜色法144结论与展望15参考文献16附录21I1引言三聚氰胺MELAMINE，它的简称是三胺，我们把它俗称为密胺、蛋白精，IUPAC把它命名为“1,3,5三嗪2,4,6三氨基”。三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环的有机化合物，工业上常把三聚氰胺用作化工原料，它的分子式是C3N6H6,是一种白色单斜晶体。11三聚氰胺的化学和物理性质三聚氰胺的酸碱值是8，具有弱碱的性质，三聚氰胺能够和硫酸、硝酸、盐酸、乙酸、草酸等反应生成三聚氰胺
5、盐。三聚氰胺中性或者弱碱性溶液中会和甲醛进行缩合反应而生成羟甲基三聚氰胺，但是在溶液的酸碱性约在5565的范围内，三聚氰胺能够和羟甲基的衍生物进行缩聚反应而生成树脂产物。三聚氰胺在强酸、强碱的水溶液里会发生水解。三聚氰胺的物理性质是三聚氰胺是一种纯白色的单斜棱晶体，它是不易燃、无味，而且几乎没有毒性的物质，三聚氰胺的密度是1573G/CM316。三聚氰胺的常压熔点是354，急剧加热后三聚氰胺会分解，快速加热则会使得三聚氰胺升华。三聚氰胺在水中的溶解度随着温度的升高而溶解增多,在20时，其溶解度是33G/L，即在冷水、乙醇、苯、醚和四氯化碳溶液中基本不溶解，但其能够在热水中溶解，而且能够在甲醇、
6、甘油、吡啶、甲醛、乙酸、热乙二醇溶液中溶解等。12三聚氰胺的用途在有机化工中间产品中三聚氰胺被应用极为广泛，我们可以把它作为生产三聚氰胺甲醛树脂MF的原料。在日常生活里，三聚氰胺还作为减水剂、甲醛清洁剂、阻燃剂等来使用。在硬度方面三聚氰胺甲醛树脂比脲醛树脂高，而且三聚氰胺甲醛树脂不仅具有不易燃、耐电弧、耐化学腐蚀、耐热、耐老化，而且有良好的绝缘性能、机械强度和光泽度等优点，在造纸、纺织、木材、塑料、涂料、电气、医药等行业中三聚氰胺被广泛应用。三聚氰胺的用途主要有以下几个方面1装饰面板在装饰方面我们把三聚氰胺板又叫为三聚氰胺浸渍胶膜纸饰面人造板，这种板的制造过程是先用三聚氰胺树脂胶粘剂浸泡不同纹
7、理的纸，然后把它干燥并固化，在三刨花板、硬质纤维板或中密度纤维板表面铺装三聚氰胺树脂，最后加热制成装饰板。由于它与防潮板紧密结合，所以基本上对环境不产生污染。由于三聚氰胺板生产时就与防潮板紧密粘合，能够制成耐热、抗震、防火的层压板，所以现在在家具、船舶和飞机的贴面板及耐热、抗震、防火的房屋装饰材料方面三聚氰胺板应用比较多。目前，三聚氰胺板可以用来做中高档的家具，而且三聚氰氨面板有着不同的仿木纹款式，其性能和美观都其它粘贴II面板要好很多，所以不需要再贴其他面板了。三聚氰胺板是现在家装用材的一个主流，它彻底打散了原来木材的组织，破坏了各项异性湿胀干缩的特性，它的尺寸极为稳定，不仅克服了实木因单体
8、收缩，容易变形、开裂的缺陷，而且具有良好的尺寸稳定性，也具有不翘曲、耐腐蚀、防虫、不助燃、不变形、容易维护清洗等等优点。2模塑粉通过混炼、造粒等工序能够把三聚氰胺制成为蜜胺塑料，这种蜜胺塑料不仅具有抗污、无毒优点，而且在做耐摔打、洁白的日用器皿、仿瓷餐具、卫生洁具和电器设备等等高级绝缘材料中这种塑料也经常被使用。3涂料在用丁醇、甲醇醚化后，三聚氰胺可以在固体粉末涂料、高级热固性涂料的胶联剂等方面中应用。4纸张因为三聚氰胺可以被用来作纸张处理剂，所以可以用来生产抗缩、不腐烂、抗皱的钞票和军用地图等高级纸。2三聚氰胺的危害21三聚氰胺的代谢三聚氰胺在机体内不会迅速发生任何类型的代谢变化，属于惰性代
9、谢。三聚氰胺对不同成长阶段的动物的毒性具有选择性，不同动物种属间或者动物体内的毒物代谢动力学差异而可能是这种毒性选择性的主要原因。22三聚氰胺的毒性人们常认为三聚氰胺的毒性是微弱性的，基本上无毒。然而，2007年美国发生了宠物食品污染事件，导致了成千上万的宠物死亡，在随机抽取的宠物饲料进行检测发现，宠物中毒的原因是饲料里掺杂了66三聚氰胺的小麦蛋白粉；2008年中国发生了三鹿婴幼儿奶粉事件，在随机抽取的奶粉样品进行检测，结果表明三鹿牌婴幼儿配方乳粉含256300MG/KG的三聚氰胺。OGASAWARAH等1995年给老鼠饲喂含3三聚氰胺饲料，9个月后发现有些老鼠上了患乳头状癌和膀胱过渡型细胞癌
10、，其发病率分别是55和90；而在饲喂1三聚氰胺浓度的这组中，乳头状癌和膀胱过度型细胞癌的发病率分别是42和21。这个结果说明三聚氰胺会导致生成结石。林祥梅等在2008年研究了三聚氰胺亚慢性毒性方面，在他所做的实验结果表明，与对照组相比较，在饲料中添加三聚氰胺后，猫的血清CRE和BUN会不断升高，而实验动物肾衰竭的主要原因可能是血清CRE和BUN过高。30D后，猫的肾脏中可以观察到有淋巴细胞的浸III润，而且其肾小管管腔中有晶体的出现4。23三聚氰胺的中毒症状和中毒机制在进行探究三聚氰胺毒性方面的实验，实验动物可能会出现体重减轻、膀胱结石、饲料消耗量减少、结晶尿症、存活率降低以及膀胱上皮细胞增生
11、等症状。在对2007年美国受害的宠物进行的实验室诊断以及临床症状分析结果表明，这些宠物都患有尿毒症，它们有的呕吐、昏睡；有的多尿、食欲减退；有的患有氮血症。受害动物在远曲小管处都会出现的损伤，而且在集合管或者肾远曲小管处会出现条纹状的特异性结晶。三聚氰胺在体内含量过高会导致肾衰。三聚氰胺在婴幼儿体内会形成颗粒排出了，然后颗粒逐渐积聚变成结石核，再逐渐地积聚形成更大的结石，最终会使得动物患上慢性肾衰症状和尿毒症。有部分学者认为，虽然在实验动物的膀胱和肾脏中都发现了结石，但是实验动物在三聚氰胺摄入后所导致的肾衰竭和肾脏的结晶作用之间是否存在着直接的联系仍然还在探究中。24三聚氰胺同系物的毒性BIR
12、GITPUSCHNER等在2007年研究了三聚氰酸、三聚氰胺以及两者的混合物是否会引起中毒的相关实验，刚开始是单独饲喂一组动物05和1三聚氰胺或者02、05和1三聚氰酸，在连续10天以内没有观察到猫的肾功能有任何变化。但是在饲喂猫的饲料里含有三聚氰酸和三聚氰胺各0，02，05以及1的剂量饲48H后却使得实验动物患上了急性肾衰的症状。对饲喂含有三聚氰胺和三聚氰酸的饲料的实验动物组进行了检查，均发现在实验动物里的肾脏有扇形的双折射晶体。对猫肾脏的组织病理学的局部性检查发现远曲小管存在结晶，皮质髓质的交界处发生出血以及肾间质发生严重的水肿。这些结果表明，猫急性肾衰的发病原因是三聚氰酸和三聚氰胺的混合
13、物6。3三聚氰胺的检测方法目前，在涉及到三聚氰胺的行业中主要的检测手段有以下几种31苦味酸法和升华法苦味酸法的过程是先在苦味酸溶液里滴加适量的三聚氰胺而生成难溶性的苦味酸盐，然后抽滤所获得的沉淀，并用电子天平称该盐的重量，最后通过计算可以求得三聚氰胺的含量。升华法的过程是在减压装置下加热使得三聚氰胺升华，然后等恢复常压后，称量三聚氰胺的重量就能够计算出三聚氰胺的含量。苦味酸法和升华法是传统检测三聚氰胺的方法，由于这两种方法存在分析时间过长，且无法精确的检测出三聚氰胺的含量，所以这两种方法基本IV不再使用。32电位滴定法电位滴定法具有快速准确，定量的检测出三聚氰胺的含量，但是这种方法对操作人员的
14、要求较高，而且步骤繁琐。因此，这种方法使用也较少。袁立勇等7通过利用电位滴定法能够快速准确地测定溶液中三聚氰胺的含量，其RSD小于等于050。该方法的过程是在200ML烧杯里称取15G样品，往烧杯里100ML的蒸馏水，水浴加热，使样品完全溶解，然后用硫酸标液滴定已经溶解的溶液直到溶液的酸碱性达到5。再在烧杯外加入冰块使得溶液冷却至室温，用01ML硫酸标液滴定仪冷却的溶液使得其PH值约为3。最后通过所记录的数值来计算出溶液中三聚氰胺的含量。33气相色谱质谱联用检测方法GCMS王征等8对食品中的三聚氰胺采用了气质联用的方法，该方法能够有效地除去基质干扰，而且选择性也很好。蒋晨阳等9对饲料中三聚氰胺
15、采用了气质联用法，其过程是先是用高效液相色谱法检测样品中三聚氰胺的含量,实验结果显示这批饲料的阳性样品有56批，阳性率是1645，然后用气质联用的方法确认出有8批饲料含有三聚氰胺，阳性率是247。这个结果表明部分饲料中有和三聚氰胺结构相似的物质存在。34高效液相色谱法宫小明10等对植物性原料中三聚氰胺采用了高效液相色谱法。其过程是先用水涡旋混匀样品,然后用超声提取样品后加入乙酸锌沉淀蛋白和亚铁氰化钾乙酸锌进行净化。杨云霞16等通过利用高效液相色谱法测定了小麦谷元粉中三聚氰胺的含量。其过程是先在乙腈水萃取样品并提纯,然后用KROMASL1005C8柱和50体积分数乙腈水溶液庚烷磺酸钠001MOL
16、/L，PH33体积比1585作流动相，最后得到的实验结果是三聚氰胺样品回收率达到了9196，RSDN8为005102，检出限S/N3为65G/L。汪辉14等对食品中三聚氰胺采用了高效液相色谱二极管阵列法，这种方法最大的优点是避开了毒性较大的乙腈,其过程是先把002MOL/L硫酸铵和甲醇作为流动相,再用甲醇提取样品,用电吹风吹干后用已配好的混合溶剂进行溶解并定容,然后在二极管阵列检测器下检测已经定溶好的溶液。占春瑞17等对饲料中三聚氰胺采用了反高效液相色谱法。该方法的过程是先用乙腈水提取样品,离心分离后,过02M滤膜,然后采用RPHPLCUV法测定,最后再用外标法定量。陈婷18对饲料中三聚氰胺采
17、用了高效液相色谱法。三聚氰胺在1050MG/L范围内具有良好的线性关系，R2达到了099996,在添加浓度为20100MG/KG的范围内,三聚氰胺的回收率达到了9095,相对标准差小于5。李德良11对食品及饲料中三聚氰胺采用了反高效液相色谱法。其V过程是先用甲醇水或乙腈水提取样品,离心分离后。三聚氰胺在005100MG/L范围内R099994,最低检出限达到了5MG/KG。辜雪英等12对饲料中三聚氰胺残留量采用了高效液相色谱法,其过程是先用经反相柱分离样品，然后在245NM的紫外检测器检测已分离的样品。吴明礼等19对单氰胺中三聚氰胺采用了HPLC法，所使用的色谱柱是日本岛津LCU1UMNODS
18、反相柱,把水氨水高氯酸缓冲液作为流动相,其平均回收率达到了9896，检测波长是215NM,相对标准差为032。俞建君等20对工业上三聚氰胺采用了反相离子对色谱法，该方法所使用的色谱柱是C18ODS,并用水三乙胺高氯酸作流动相,其流速是10ML/MIN,检测波长是215NM。实验最终的结果加标回收率达到了10161056,检测限达到了0044G/L。张美金等21对宠物食品和饲料中三聚氰胺采用了高效液相色谱法。实验结果表明其LOQ是10MG/KG，样品加标回收率达到了81105,相对标准差小于10。赵永彪等22通过高效液相色谱法来检测宠物食品中三聚氰胺含量的方法,把100MMOL/L的庚烷磺酸钠用
19、HCL调节PH30乙腈9010作为流动相,在入236NM波长下测定样品的三聚氰胺含量。35液相色谱串联质谱法丁涛等23对植物源性蛋白中残留的三聚氰胺采用高效液相色谱串联质谱法。其过程是先在样品中加入三氯乙酸溶液使其沉淀,所提取的样品用强阳离子固相萃取柱进行富集和净化再用质谱对样品进行检测。李爱军等24对饲料中三聚氰胺采用了液质联用法。在添加了05100MG/KG的三聚氰胺标准品后的回收率变为9261032；RSD在0820之间；检出限是02MG/KG。冯家望等25对奶制品中环丙氨嗪和三聚氰胺采用了高效液相色谱串联质谱法。冯薇等26对三聚氰胺采用了液质联用法，其过程是先把SCXC18混合填料作为
20、反相色谱柱，然后把10MMOL/L醋酸钠溶液乙腈5050,PH值为30作为流动相。染伟27对宠物食品中三聚氰胺采用了液质联用法,由于在实验过程中使用了三重四极杆,所以基质不会对三聚氰胺产生干扰。在使用这种方法时,不仅不需要进行衍生化,而且也简化了样品步骤的处理。赖碧清等28对饲料中的三聚氰胺采用了用自动固相萃取装置,和高效液相色谱二极杆质谱联用仪。36超高效液相色谱与质谱联用张静等29对宠物食品中三聚氰胺采用了超高效液相色谱电喷雾串联三重四级杆质谱技术。其过程是先在样品中滴加三氯乙酸,使得溶液变浑浊，从而形成蛋白络合物沉淀，然后用超高效液质联用法检测。由于乙酸铅溶液结合含有SO42、SO32等
21、离子的杂质会形成沉淀,如果同时用三氯乙酸作离子对试剂进行液相色谱质谱分析，这样可以进一步提高提取效率。钱振杰等30对饲料中三聚氰胺采用了超高效液质联用法。其过程是先用1二甲基亚砜三VI氯乙酸提取样品,再用WATERSOASISMCX柱对样品进行净化处理,然后用超高效液相色谱对样品进行分离,最终用质谱检测仪测定该样品是否含有三聚氰胺。色谱法和色谱质谱联用法能够达到分析检测的要求，在检测三聚氰胺方面被广泛采用。气质联用法能够准确定量的检测出样品中三聚氰胺的含量；高效液相色谱法具有简便快速，且能够定量分析样品中高含量的三聚氰胺；液质联用法与气相色谱法相比较，具有检测成本低、灵敏度高及色谱柱使用寿命长
22、等优点；超高效液质联用法的优点有分析时间短、准确度高。37不同电离方式质谱法在进入质谱分析器之前,所检测的化合物必须电离。目前新环境电离的方法有解吸大气压化学电离,电喷雾激光解吸电离,大气压化学电离,萃取电喷雾电离,低温等离子电离,大气压辉光放电电离,电晕放电实时分析电离,大气压固体分析探针电离,基质辅助激光解吸电离,辉光放电电离等。瑞士苏黎世理工大学的ZHU等31通过采用超声辅助萃取性电喷雾离子化质谱EESI方式研发出一种可以快速测定没有被处理过的食物样品中三聚氰胺含量的方法。先是利用超声雾化含有三聚氰胺的液体,就能够形成较好的喷雾，然后用萃取性电子喷雾离子化电离喷雾并用质谱分析。这样下来分
23、析每个样品的时间只要30S,就可以检测到PPB数量级的三聚氰胺残留量。普渡大学的HUANG等32采用低温等离子体LTP来电离样品,在短短几十秒内就能够实现对奶制品中低至PPB数量级的三聚氰胺含量的检测。在实验中,氦气气流先通过手持探针直接到样品表面,然后质谱真空部分的吸力把气态离子带入到离子阱质量分析器里。这种方法所分析奶粉的检测限能够达到6PPB,具有不需要样品前处理、快速准确等优点,这些特点使得该方法能够适用于大量样品的检测。利用表面解吸大气压化学电离质谱SDAPCI记录的质子化的三聚氰胺分子M/Z127在串联质谱中的特征碎片M/Z110,85,60实现对奶制品中三聚氰胺含量的快速检测。这
24、种方法不需要任何的样品前处理，样品中三聚氰胺的含量与最丰离子碎片M/Z85的信号响应值在5个数量级内有正比的关系。纯三聚氰胺的检测限达到341015G/MM2,比液奶131012G/MM2和奶粉161011G/MM2中的检测限低得多。YANG等把检测限的不同归结为底物如牛奶制品中的蛋白质和三聚氰胺之间存在相对强大的作用力。这种方法可以用于测定奶制品中的三聚氰胺,单个样品能够在几秒内完成,这为快速测定牛奶制品中的三聚氰胺提供了简便的方法。此外,YANG等还对鸡蛋中的三聚氰胺进行了成像分析,取得了良好的效果。VII基质辅助激光解析电离MALDI是先把待测物与固体基质混合,然后在N2激光照射下吸收辐
25、射能量,产生与结构有关的结构碎片和分子离子,这种方法适合于不宜气化的大分子物质,具有减少物质分子过分破碎的优点。CAMPELL等利用基质辅助激光解析电离结合飞行时间质谱TOFMS对三聚氰胺及相关化合物进行了分析,把CHCA作为基质,能够观察到三聚氰酸和三聚氰胺的复合体,但是把芥子酸作为底物时,却没有观察到类似的情况。TANG等33建立了MALDITOFMS直接分析三聚氰胺氰尿酸盐MC。通过利用常用的三种基质进行实验,CHCA在正相模式下能够显示出它的最高检测灵敏度,SA和DHB只能在负相模式下从MC中解吸或者电离三聚氰胺,但是它们的灵敏度却非常低。这种方法不仅能够清楚地测定出在加入到尿液中低至
26、125G的MC中的三聚氰胺,而且可以成功地被用到快速灵敏检测实际样品。该方法只需要简单的水洗就可以降低尿液底物的干扰，而且能够提高三聚氰胺的离子强度。该方法用于高通量分析时,从样品准备到分析,不超过7MIN,但检测却十分灵敏。实时直接分析电离源CDART通过采用常压电晕放电使得氦形成亚稳态的原子,或者使氮气形成振动激发态的氮分子,这些高能组分在和样品分子接触时就能够通过非弹性碰撞使后者离子化,再将组分引入质量分析器作进一步分析,这样就能够获得所需要的被分析样品的质谱信息,直接分析电离源通常和飞行时间质谱连接,能够在大气压下对不需任何处理的固、液、气体样品的表面进行实时分析,在数秒内就能够得出结
27、果。VAIL等35建立了利用SDART电离技术,连接JEOL公司的飞行时间质谱,对宠物食品中的三聚氰胺进行分析的方法,然后用活性氢原子数目、碰撞活性解离碎片和同位素峰强度三种方式确证CDART的准确性。在生物毒理学上也采用了用飞行时间质谱作为研究结石病或者三聚氰胺毒理学的方法。KIM等通过利用飞行时间质谱分析了老鼠肾脏中的三聚氰胺,并证实了老鼠肾脏中有三聚氰胺三聚氰酸晶体。XIE等36采用超高效液相色谱飞行时间质谱联用法研究三聚氰胺是否会产生急性肾病,并分析了三聚氰胺可能存在的代谢途径。质谱法虽然能够快速、准确、定量分析三聚氰胺，而且检测限能够达到PPB数量级，但是质谱法所使用的仪器都是昂贵精
28、密的大型仪器,不仅不能满足便携化、检测成本低的要求,而且对操作人员的技术要求也比较高。38毛细管电泳技术毛细管区带电泳是一种分离效率很高的分离分析技术,在分离扩散系数较小的大分子蛋白质样品时,它的分离效率非常高，所以它在分离复杂基质方面有着广泛的应用前景。YAN等37通过利用毛细管区带电泳二极管阵列检测器来检测三聚氰胺的含量。该方法是利用三聚氰胺在简单的毛细管电泳模式中的强极性来实现干扰物和三聚氰胺的基线分离,并利用三VIII聚氰胺对紫外有着非常好的吸收的特点,实验所得出的定量检测限是005MG/KG。CHEN等38也用类似的方法检测牛奶中的三聚氰胺,获得了0047PPM的检测限。39光谱法光
29、谱法包括拉曼光谱法、红外光谱法，以及核磁共振法，拉曼光谱法进行样品预处理过程不需要净化、过滤和离心，且分析时间短；红外光谱法的优点有无需或者只需少量样品处理，而且分析时间短，可在5MIN中内完成检测；核磁共振法能够定量的检测出三聚氰胺。然而光谱法所使用的仪器昂贵，且不满足便捷的要求。391拉曼光谱法拉曼光谱法是通过利用光散射来检测特定的分子振动,在某些区域会形成吸收产生该物质的指纹谱带。该方法只需要三步就能够实现样品检测先是把三聚氰胺提取液滴加到底物上,然后蒸发有机溶剂，最后用拉曼光谱测定。在989CM1和682CM1处有位移，而682CM1处则与浓度有关。LIN等3940建立了利用表面强化拉
30、曼光谱分析了在金纳米颗粒底物上的三聚氰酸,三聚氰胺以及三聚氰胺三聚氰酸混合物的振动特征光谱。在金纳米颗粒上，三聚氰胺的拉曼光谱信号被放大至约30000倍，结合最小二乘法分析，用表面强化拉曼光谱定量痕量和快速分析三聚氰胺及其三聚氰胺的同类物质。基于三聚氰胺浓度的对数值以及682CM1处的特征峰的拉曼光谱强度,表面强化拉曼光谱分析方法的检测限达到26107MOL/L约为33PPB数量级。392红外光谱法由于振动能级有所不同,所以化学键具有不同的频率。振动频率或共振频率取决于原子质量、分子等势面的形状等。普渡大学的LISAMAUER等41利用中红外和近红外光谱法漫反射傅立叶红外光谱DRIFT和衰减全
31、反射傅立叶红外光谱FTIRATR来定量分析和测定婴幼儿配方奶粉中三聚氰胺的含量。通过对三聚氰胺浓度和光谱数据的最小二乘法进行拟合,R2大于099，根据这个可以分析出添加有1PPM三聚氰胺的奶粉。393核磁共振法DVORTSAK等42通过利用400HZ下1H的核磁共振NMR模式,能够检测出受三聚氰胺污染的奶粉,然后通过对图谱的叠加,就可以作为定量手段。在研究受三聚氰胺污染的蛋糕及配方奶粉时,核磁共振法可以获得和采用固相萃取液质分析同样的结果。这种方法还能够用于筛分食品中的未知污染物。310化学发光法IXWANG等43研发出一种基于鲁米诺肌红蛋白系统的灵敏的化学发光检测的新方法。实验发现,三聚氰胺
32、可以和溶液中的肌红蛋白反应形成一种复合体,这种复合体会强烈地抑制肌红蛋白与鲁米诺反应产生的化学光的强度。三聚氰胺的浓度与化学发光强度的降低值在10PG/ML50NG/ML范围内有着正比例的线性关系,检测限达到了3PG/ML。这种方法用于检测牛奶制品中的三聚氰胺时,其回收率达到了9341065。GUO等49利用分子印迹固相萃取与电化学发光法联用MISPEECL高灵敏度检测奶制品中三聚氰胺含量。分子印迹固相萃取对奶制品进行前处理，增加了此方法的抗干扰能力，基于三聚氰胺在强碱性条件下增强RUBPY32的ECL，高灵敏度奶制品中三聚氰胺含量，检测限达到PPT数量级，可与目前最灵敏的检测方法质谱法相媲美
33、。电化学发光法法灵敏度高，检测线能够达到了PPT数量级，但是该方法还处于实验室研发阶段，距离实际应用还需要很长一段时间。311纳米粒子颜色法三聚氰酸和三聚氰胺可以通过NHN和NHO两种氢键形式进行分子组装，从而形成稳定的复合体三聚氰酸和三聚氰胺的比例为31。如果将三聚氰酸进行衍生,和有极好光学特征的贵金属纳米颗粒形成稳定的复合体,然后加入三聚氰胺,这时候三聚氰酸与三聚氰胺的结合,就会改变纳米颗粒的光学特征,而这一特征变化就我们能够从颜色上辨别出来。中科院长春应化所电分析化学国家重点实验室的LU和AI等44基于这一考虑,合成了一种含有巯基官能团的三聚氰酸衍生物MTT,然后通过配体交换反应合成了和
34、12NM金纳米颗粒形成的稳定颗粒MTTAU。刚开始MTTAU在水中可以很好地分散,从而形成酒红色的均一胶体。但是当加入三聚氰胺后,胶体变成蓝色。颗粒颜色变化明显,用肉眼就可分辨出来。这种方法可以检测低至25PPB数量级浓度的三聚氰胺。纳米粒子颜色法的检测限达到了PPB数量级，能够准确的检测出样品三聚氰胺的含量，但是该方法仍然需要进一步的研究才能被广泛应用。4结论与展望1苦味酸法和升华法虽然操作步骤比较简单，但是这两种方法的分析时间比较长，大约需要68个小时，甚至更长，不能及时的检测出样品是否含有三聚氰胺，所以工业上这两种方法已不再采用。2电位滴定法对操作人员有较高的要求，需要操作人员能够准确的
35、滴定硫酸标液，而且该方法后续处理实验数据也比较繁琐，所以这种方法使用的也比较少。3色谱法包括高效液相色谱法、气相色谱质谱联用法、液相色谱与质谱联用、超高效液质联用法，高效液相色谱法具有快速、简便，且能适用于三聚氰胺高含量分析的优点；气X质联用法的优点有准确度高和抗干扰能力强；液质联用法具有检测过程简便、检测成本低、色谱柱、灵敏度高和色谱柱使用寿命长等优点；超高效液质联用法的优点有分析时间短、灵敏度高。总体来说色谱法和色谱质谱联用法具有高灵敏度、低检测限、高度专一、成本低廉及少量或者不用预处理程序，在检测三聚氰胺方面上被广泛采用。4质谱法虽然能够快速、准确、定量分析三聚氰胺，且检测限可达到PPB
36、数量级，但是质谱法所使用的仪器都是昂贵精密的大型仪器,不仅不能满足便携化、检测成本低的要求,而且对操作人员的技术要求也比较高。5光谱法包括拉曼光谱法、红外光谱法，以及核磁共振法，拉曼光谱法进行样品预处理过程不需要净化、过滤和离心，且分析时间短；红外光谱法的优点有无需或者只需少量样品处理，而且分析时间短，可在5MIN中内完成检测；核磁共振法能够定量的检测出三聚氰胺。然而光谱法所使用的仪器昂贵，且不满足便捷的要求。6毛细管电泳技术分离效率很高，灵敏度也较高，但是该方法的有效性仍然需要进一步的探究。7一些三聚氰胺的新型检测方法如电化学发光法、纳米粒子颜色法，电化学发光法法灵敏度高，检测线甚至达到了P
37、PT数量级；纳米粒子颜色法的检测限也能够达到PPB数量级；但这些方法还处于实验室研发阶段，距离实际应用还有相当长时间。本文总结了各种三聚氰胺的检测方法，这些方法基本上能够满足科研人员日常检测三聚氰胺的需要，但是随着科技的进步，科研人员的三聚氰胺检测手段的进一步探究，人们将寻求更为简便快速、高灵敏度、分析时间短及成本低廉的方法。因此，实现三聚氰胺及其相关化合物的灵敏、简易、快速、经济分析,仍然需要进一步的努力。I参考文献1邵静君,温家琪,徐世文三聚氰胺毒理学研究进晨J现代畜牧兽医,2007,1252542OKUMURAM,HASEGAWAR,SHIRAIT,ETA1RELATIONSHIPBET
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