1、浅析婴儿配方乳制品中维生素 A 酯类的分布情况及稳定性摘要：目的 对婴儿配方乳制品中维生素 A 酯类的分布情况以及稳定性进行分析探讨。方法 建立高效液相色谱法，结论 采取高效液相色谱法对婴儿配方乳制品中维生素 A 脂类分布和稳定性考察结果准确可靠，值得关注并推广。 关键词：高效液相色谱法 婴儿配方乳制品 维生素 A 醋酸酯 维生素A 棕榈酸酯 研究证实，维生素 A 属于一种脂溶性维生素，可以维持视觉和骨骼健康，并参与了细胞分裂、细胞识别、生长发育、维持免疫系统完整性等诸多生理功能。目前婴儿配方乳制品中对微生素 A 含量做出了明确规定，允许添加维生素 A 醋酸酯、维生素 A 棕榈酸酯等酯类成分1
2、。本次研究中出于对婴儿配方乳制品中维生素 A 酯类的分布情况以及稳定性进行分析探讨的目的，建立了高效液相色谱法，现汇报实验结果如下。 1. 材料与方法 1.1 仪器与试剂 本次实验中所需仪器为我实验室现有高效液相色谱仪以及相配套的紫外检测器等，除此外还需用到氮气吹干仪、低速台式离心机等。 所需试剂包括：甲醇、乙醇、三氯甲烷为色谱纯，氯化钠为分析纯，维生素 A 醋酸酯、维生素 A 棕榈酸酯标准品。实验中样品为市售不同厂家同一配方的婴儿奶粉。 1.2 方法 1.2.1 标准溶液的制备 精密称取 10mg 的维生素 A 醋酸酯和维生素 A 棕榈酸酯，经甲醇定容至 100ml 容量瓶内，制成浓度为 1
3、00ug/ml 的标准储备液液。取 1ml 维生素 A 醋酸酯、维生素 A 棕榈酸酯标准储备液，在 50ml 容量中经家传溶解后定容，制成质量浓度为 2ug/ml 的标准溶液。 1.2.2 样品处理 取 0.25g 样品精密称定后放置在 10ml 离心管中，10ml 温水溶解，加入体积为 2.5：1 的三氯甲烷和甲醇混合溶剂 7ml，充分溶解后漩涡震荡5 分钟，静置 5 分钟后加入 1ml 饱和氯化钠，反复震荡，在 2500r/min 条件下离心处理 5 分钟，在氮气下降三氯甲烷吹干，经甲醇溶解后过0.22um 微孔滤膜，棕色瓶收集。 1.2.3 色谱条件 色谱柱为 TC-C18 柱，柱温为
4、30，流动相为甲醇-三氯甲烷=80：20，等度洗脱，流速为 1.0ml/min，检测波长为 325nm，进样量为20ul。 2.结果 2.1 线性关系考察 实验中分别配制了一系列浓度（1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ug/ml）的维生素 A 醋酸酯、维生素 A棕榈酸酯标准溶液，在 1.2.3 条件下进样检测，以峰面积作为纵坐标，以标准品浓度作为横坐标，的标准曲线 Y=303239X-7112.1，r=0.9998，维生素 A 醋酸酯和维生素 A 棕榈酸酯浓度在 1-5ug/ml 范围内存在良好线性关系。 2.2 重现性考察 取同一样品溶液在 1.2.3 条件下进样检测，连续检测
5、 6 次，观察峰面积，计算 RSD 值，结果发现维生素 A 醋酸酯和维生素 A 棕榈酸酯峰面积 RSD 值分别为 1.2%和 1.5%，在允许范围内，证实重现性良好。 2.3 加样回收实验 表 1 维生素 A 醋酸酯、维生素 A 棕榈酸酯加样回收实验结果 2.4 稳定性考察 取相同浓度的维生素 A 醋酸酯和维生素 A 棕榈酸酯，经乙醇溶解后分别在日光、30W 日光灯以及黑暗处在不同温度的水浴锅中进行保存，对光和温度对维生素 A 酯类稳定性进行考察。定时取样在 1.2.3 条件下进样检测，计算残留率。结果发现，在 25条件下，两种维生素 A 酯类成分均较稳定，5 小时后的吸光度残留率分别为 99
6、.21%和 99.76%，随着稳定的升高，稳定性逐渐降低，且在相同的温度下维生素 A 棕榈酸酯的稳定性高于维生素 A 醋酸酯。维生素 A 酯类在日光条件下不稳定，1 小时后残留率几乎为 0，在日光灯下具有较高的稳定性，5 小时后吸光度残留率分别为 95.32%和 93.41%，在黑暗条件下稳定效果理想，5 小时后残留率分别为 99.13%和 99.89%。 2.5 样品中维生素 A 醋酸酯、维生素 A 棕榈酸酯含量测定 取 1.2.2 配制的样品溶液 20ul，在 1.2.3 条件下进样检测，重复操作 3 次，取平均值，计算维生素 A 醋酸酯和维生素 A 棕榈酸酯含量。结果详见表 2。 表 2
7、 样品中维生素 A 醋酸酯、维生素 A 棕榈酸酯含量测定（IU/100g） 3. 讨论 婴儿配方奶粉为母乳的最佳替代品，对婴儿配方奶粉进行评价的一个重要指标为母乳化程度，要求配方奶粉中各种营养成分含量应与母乳接近2。近几年的研究发现3，在婴儿配方奶粉评价中维生素 A 宏观分布已经成为一项重要指标。本次实验中建立了高效液相色谱法对不同常见婴儿配方奶粉中维生素 A 酯类成分分布和稳定性进行了检测，一系列方法学考察结果发现，本次建立的高效液相色谱法在对维生素 A 醋酸酯、维生素 A 棕榈酸酯进行检测时的线性关系良好，回收率高，重现性理想，精密度良好，在婴儿配方奶粉中维生素 A 酯类成分分布和稳定性考
8、察中可发挥重要作用，结果准确可靠。通过对 3 个厂家同一配方的婴儿奶粉进行检测发现，不同样品中维生素 A 酯类成分分布情况存在一定的差异；维生素 A 醋酸酯和维生素 A 棕榈酸酯对热和光不稳定，应引起重视。 参考文献： 1 任国谱，颜景超.乳制品中维生素 A 稳定性的研究进展J.中国乳品工业，2009，11（10）：142-143. 2 徐烨，顾鑫荣，王瑞菲，等.反相高效液相色谱法同时测定功能饮料中六种 B 族维生素J.理化检验（化学分册） ，2010，11（05）：214-215. 3 李少旦，彭卫芳.反相高效液相色谱法同时测定维生素 B6、烟酰胺和泛酸钙J.理化检验（化学分册） ，2009，14（07）：45-46.
