1、食品中邻苯二甲酸酯的分析方法研究进展摘要：邻苯二甲酸酯是一类广泛应用的增塑剂，具有具有生殖毒性和致畸致癌等危害。本文概述了邻苯二甲酸酯的危害，综述了食品中邻苯二甲酸酯类物质的检测标准、前处理技术与检测方法，并提出检测中存在的问题和研究前景。 关键词：食品 邻苯二甲酸酯 前处理技术 检测 进展 1.邻苯二甲酸酯的危害 邻苯二甲酸酯（Phthalic Acid Esters，简称 PAEs）是一类能起到软化作用的化学品，常见的有邻苯二甲酸二甲酯（DMP） 、邻苯二甲酸二乙酯（DEP） 、邻苯二甲酸二正丁酯（DBP） 、邻苯二甲酸丁基苄酯（BBP） 、邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP） 、邻苯
2、二甲酸二异壬酯（DINP）和邻苯二甲酸二正辛酯（DNOP） 。自上个世纪 70 年代以来，PAEs 作为一种化工原料，得到广泛应用，除了作为增塑剂被应用于玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、乙烯地板和壁纸的生产外，还可作为添加剂用于农药、清洁剂、润滑油、个人护理用品（如指甲油，头发喷雾剂、香皂和洗发液）等数百种产品的生产1。 2011 年 6 月台湾的“起云剂”风波及 2012 年内地的白酒“塑化剂”事件，PAEs 再一次引起人们普遍关注。食品中 PAEs 的来源途径比较广泛，主要包括食品塑料包装迁移、环境体系的污染、人为添加等。Arnold Schecter 研究小组对市售的饮料、乳制品、肉
3、类等食品进行了九种不同PAEs 检测，研究发现，在所有检测的 72 种食品中都存在 PAEs，使得公众对于累积暴露的关注增加2。大量的研究表明，PAEs 对人类的健康危害巨大，具有生殖毒性 3-4。其具有雌激素的特征及抗雄激素生物效应，可通过饮水、进食、皮肤接触和呼吸等途径进入人体内，干扰人体正常的内分泌功能；对男性而言，主要是使男子精液量和精子数量减少，精子运动能力低下、形态异常，严重的会导致睾丸癌5；对女性而言，可能会导致乳房提早发育，缩短妊娠等6-7。而其在体内长期积累还会导致畸形、癌变和突变8。因此，各个国家对于产品中 PAEs 含量做了严格规定。2011 年 6 月，卫生部将 PAE
4、s 列为食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂9。 2.食品中邻苯二甲酸酯的检测标准 目前，我国关于食品中 PAEs 的检测标准有：GB/T 21911-2008食品中邻苯二甲酸酯的测定10，适用于食品中 16 种邻苯二甲酸酯的测定；SN/T 3147-2012出口食品中邻苯二甲酸酯的测定11，适用于食品中 23 种邻苯二甲酸酯的测定；SN/T 2037-2007与食品接触的塑料成型品中邻苯二甲酸酯类增塑剂迁移量的测定气相色谱质谱联用法12，本标准适用于与食品接触的塑料容器及包装制品中邻苯二甲酸酯类增塑剂特定迁移量的测定；而在 2011 年卫生部签发的卫生部办公厅关于通报食品及食品
5、添加剂中邻苯二甲酸酯类物质最大残留量的函13，规定 DEHP、DINP、DBP 的最大残留量分别为 1.5、9.0 和 0.3mg/kg。2013年香港食品安全中心订烈酒中邻苯二甲酸酯成分的行动水平为 DEHP 含量5mg/kg。此外，世界卫生组织规定 DEHP 的每日耐受量为摄入不超过0.025mg/kg/day，而美国环保署（EPA）提出 DBP、DEP、BBzP、DEHP 经口摄入参考剂量（RfD）分别为 0.1、0.8、0.2、0.02mg/kg/day。欧洲食品安全局 EFSA 规定 DBP、DEHP、DiNP 和 DiDP 耐受量为摄入分别不超过0.01，0.05，0.15 和 0
6、.15 mg/kg/day。 3.食品中邻苯二甲酸酯的分析方法 食品中 PAEs 的分析检测包括了样品的准备、提取、净化、分离和检测。而样品的提取和净化，即样品的前处理是食品中 PAEs 分析中最具挑战的部分，同时也是决定方法检测低限的关键部分。 3.1 前处理技术 食品基质复杂，干扰众多，且目标物含量低，因此样品前处理成为决定分析结果好坏的关键环节。传统的溶剂法和液液萃取法是食品，特别是含油脂的食品样品中 PAEs 提取最常用的方法。很多溶剂，如丙酮-正己烷14，正庚烷15，乙腈16 ，乙腈-正己烷17等，被用于最初的样品提取。但是此法需消耗大量的有机溶剂，且费时，对于痕量分析还需使用高纯度
7、的溶剂，分析成本高，而且大量有机溶剂的使用又造成了新的环境污染及增加处理废水的操作和成本。 而对于含油脂的样品以及复杂基质的样品，通常需要对提取液进行更进一步的净化处理。而样品的提取净化方法除了液液萃取外，还有超声提取（UAE）18-20、微波辅助溶剂提取（MAE）21，固相萃取（SPE）14，16，22-25、凝胶色谱（GPC）20以及近年来新兴的萃取与净化技术，固相微萃取（SPME）26-28和分散液液微萃取（DLLME）29-30。固相萃取法采用高效、高选择性的固定相，对样品中的有机污染物的吸附富集，溶剂用量少，且分析时间少，易于自动化。固相微萃取技术是在固相萃取的基础上发展起来的新的萃
8、取分离技术，它不需有机溶剂，样品用量少，易于自动化。 PAEs 在环境中存在的广泛性使得测定基质具有复杂多样性，这给样品的前处理过程带来了一定的困难。在实验的过程中，待测样品可能会被所用的实验试剂和器皿所带的 PAEs 污染，导致样品的背景值高，造成假阳性结果。因此，在实验过程中应使用玻璃器皿而非塑料制品，所用玻璃器皿需经过清洁剂清洗，再用水洗、溶剂洗，再在高温下进行烘焙。同时，还需尽可能减少实验步骤，减少溶剂、吸附剂等实验用品的用量，以降低样品中 PAEs 的背景值。 3.2 检测技术 目前 PAEs 检测方法主要采用气相色谱（GC）14，16，22，24，25，27-29，31，34和液相
9、色谱（LC）18-20，23，30，32，33法。PAEs 是具有半挥发性、弱极性或非极性、结构稳定的化合物，因此，LC 法并不是 PAEs 分析的首选方法，较少用于PAEs 分析。 近年来，随着 LC-MS 技术的发展，LC-MS 也逐渐应用于 PAEs的分析检测19，23，32，33。LC-MS 在 PAEs 的测定中可通过特征离子对 C6-C10 同分异构体混合物进行定量，解决了 GC-MS 法分离同分异构体混合物时出现的分辨率较低，异构体基团间保留时间重叠的问题，但在分离单组份化合物时，GC-MS 的检出限要低于 LC-MS23，35。 气相色谱是目前 PAEs 类物质分离最常用的方法
10、，而质谱检测器则几乎是PAEs 分析检测的首选检测器，其他检测器如氢火焰离子化检测器、电子捕获检测器也有用于 PAEs 的检测15，28。GC-MS 是目前 PAEs 分析检测的常规方法，其可同时进行定性和定量分析 14，16，22，24，25， 27，29，31，36。对于未知样品的定性分析，GC-MS 通常是在扫描（SCAN）模式下预设质量范围获得整个质谱图，通过与标准谱图库的谱图进行比对而定性。GC-MS 通常是在选择离子扫描（SIM）模式下进行对样品中的目标化合物进行定量分析，灵敏度比 SCAN 模式的高几十到上百倍，从而获得比 SCAN 模式低的检出限。在 SIM 模式下，化合物的基
11、峰通常被选为目标离子进行定量，而化合物中的其他两个较小的碎片离子也被选择为参考离子。表 1 中是近年来国内外检测分析 PAEs 的 GC 和 HPLC方法。 4. 结论与展望 综上所述，食品中 PAEs 的检测技术已比较成熟，但就当前的研究情况而言，以下几个方面的问题仍需进一步完善和提高：（1）在食品样品的检测过程中样品污染是 PAEs 分析中需要重视的问题。这就需要仔细清洗实验所用到的器皿，避免器皿及试剂中的 PAEs 污染样品，尽量使背景值降到最低；（2）PAEs 在环境中存在的广泛性使得测定基质具有复杂多样性，这给样品的前处理过程带来了一定的困难。探索更为简单、快速、高效的前处理方法将是
12、今后研究的重点和方向；（3）目前我国食品中PAEs 的限量缺少判定的依据，在 2011 年卫生部签发的卫生部办公厅关于通报食品及食品添加剂中邻苯二甲酸酯类物质最大残留量的函中也只规定 3 种 PAEs 的最大残留量，限量标准还存在很多空白。我国的检测标准还需不断完善，对现有标准中的不足进行改进。 参考文献： 1 姚卫蓉.食品包装污染物研究进展J.现代食品科技，2005， 21（1）：150-153. 2 Arnold Schecter， Matthew Lorber， Ying Guo，et al. Phthalate concentrations and dietary exposure f
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16、：中华人民共和国卫生部公告 2011 年第 16 号. S 10 GB/T 21911-2008 食品中邻苯二甲酸酯的测定S 11 SN/T 3147-2012 出口食品中邻苯二甲酸酯的测定S 12 SN/T 2037-2007 与食品接触的塑料成型品中邻苯二甲酸酯类增塑剂迁移量的测定气相色谱质谱联用法S 13 中华人民共和国卫生部.卫生部办公厅关于通报食品及食品添加剂中邻苯二甲酸酯类物质最大残留量的函. 卫办监督函2011，551 号S 14 Page BD， Lacroix GM.The occurrence of phthalate ester and di-2-ethylhexyl a
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