现代生物制药技术A120题版.doc

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1、 20172018 学年 第二学期2015 级药物制剂专业现代生物制药技术期末考试试卷一、名词解释:(本大题共 10 小题,每小题 2 分,共 20 分)1. 生化分离 2. 固定化酶 3. 抗体 4.单克隆抗体 5.分子诊断试剂 6.色谱法7.贴壁培养 8.灭菌9.超临界流体萃取10.抗生素二、选择题:(本大题共 100 小题,每小题 0.5 分,共 50 分)(请将正确答案填写在下面表格内)1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011 12 13 14 15 16 17 18 19 2021 22 23 24 25 26 27 28 29 3031 32 33 34 35 36 37 38

2、 39 4041 42 43 44 45 46 47 48 49 5051 52 53 54 55 56 57 58 59 6061 62 63 64 65 66 67 68 69 7071 72 73 74 75 76 77 78 79 8081 82 83 84 85 86 87 88 89 9091 92 93 94 95 96 97 98 99 1001.氨基酸药物中产量最大的,占 80%的氨基酸( ) 。A.谷氨酸 B.赖氨酸 C.蛋氨酸 D.天冬氨酸2. 下列哪个酶不能用于消炎( ) 。A.溶菌酶 B.糜蛋白酶 C.菠萝蛋白酶 D.尿激酶3.根据分子大小、形状不同的分子进行分离方法

3、,称( ) 。A.排阻层析 B.吸附层析 C.等电点分离 D.离子交换层析4. 具有抗凝血、降血脂、抗病毒、抗肿瘤、增强免疫功能与抗衰老等药理作用的是( ) 。A.脂类药物 B.糖类药物 C.酶类药物 D.氨基酸类药物5.( )是现代生物制药技术发展的基础与核心。A.基因工程技术 B.细胞工程技术 C.发酵工程技术 D.酶工程技术6.下列哪个抗生素应用化学合成法生产( ) 。A.氯霉素 B.青霉素 C.链霉素 D.四环素7. 用于制造加酶洗涤剂、丝绸脱胶和制革等轻化工领域的酶是( ) 。A.中性蛋白酶 B.酸性蛋白酶 C.碱性蛋白酶 D.青霉素酶座号题号 一 二 三 四 五 六 总分 合分人得

4、分得分 评卷人得分 评卷人系、部 班级 姓名 学号 考场 -密-封-线-8. 以下( )不适合含菌丝细胞的破碎。 A.珠磨法 B.匀浆法 C.酸碱法 D酶解法 9. 生物碱主要存在于( )中。A.藻类植物 B地衣植物 C被子植物 D裸子植物10.下列哪种细胞的培养需要采用贴壁培养技术( ) 。A. 细菌 B.酵母 C.动物细胞 D.植物细胞11.按照 Fr 的大小对离心机分类, ( )为高速离心机。A.Fr3000 B. Fr= 3000 5000,C.Fr5000 D.Fr=21041 0 6 12.组织自溶法属于细胞破碎方法中的( ) 。A.化学法 B.生物法 C.机械法 D.物理法13.

5、界面沉降法属于固定化酶技术中的( ) 。A.吸附法 B.包埋法 C.共价结合法 D.交联法14.胰岛素是( )类药物。A.核酸 B.糖 C.蛋白 D.脂15.( )主要进行皮肤表面、器皿及无菌区域的灭菌,不能用于培养基的灭菌。A .干热法 B.湿热法 C.辐射法 D.化学法16.黄酮类化合物主要分布于( )中。A.蕨类植物 B被子植物 C苔藓植物 D种子植物17.从蛇床子中分离得到的蛇床子素属于( ),具有抗炎、平喘、抗骨质疏松的功能。A.萘醌类 B萜类 C香豆素类 D植物甾醇类18. ( )分子中含有 20 种必需氨基酸,在维持胶体渗透压方面有很好的作用。A. 红细胞悬液 B. 白蛋白 C.

6、 免疫球蛋白 D. 洗涤红细胞19.( )在临床上应用于多次输血的患者。A. 红细胞悬液 B. 去白红细胞悬液 C. 冰冻红细胞 D. 洗涤红细胞20.( )通常作为血细胞比积和红细胞渗透脆性试验较理恕的抗凝剂。A. 枸橼酸钠 B.二乙胺四乙酸盐 C.肝素 D. 草酸钠21.下列( )药物能降低血糖从而治疗糖尿病。A.胸腺素 B.胰岛素 C.胃膜素 D.干扰素22.( )是血液细胞分析仪最适合的抗凝剂。A. 枸橼酸钠 B.二乙胺四乙酸盐 C.肝素 D. 草酸钠23.( )常用于红细胞沉降率的测定,也可用于凝血因子的检测。A. 枸橼酸钠 B.二乙胺四乙酸盐 C.肝素 D. 草酸钠24.下列酶类药

7、物( )具有抗肿瘤作用。A.淀粉分解酶 B.青霉素酶 C.谷氨酰胺酶 D.胰岛素25.属于不饱和脂肪酸的药物是( ) 。A.胆固醇 B.前列腺素 C.熊去氧胆酸 D.卵磷脂26.下列药物( )属于脂类药物。A.前列腺素 B.肝素 C.透明质酸 D.胰岛素27. 多糖广泛存在于各种动植物材料中。根据多糖取代基的不同,多糖包括有普通多糖、酸性多糖等。以下( )是酸性多糖。A香菇多糖 B柴胡多糖 C壳聚糖 D银耳多糖28.盐析过程中使用最多的中性盐是( ) 。A.硫酸钠 B.硫酸铵 C.硫酸镁 D.氯化钠 29.下列关于生物药物原料描述不正确的是( ) 。A.来源广泛 B.多样性好 C.有效成分含量

8、高 D.杂质多30.下列哪个抗生素能抑制细胞壁合成( ) 。A.红霉素 B.青霉素 C.链霉素 D.鱼素31.具有两性性质,可用等电点沉淀的抗生素是( ) 。A.青霉素 B.四环素 C.红霉素 D.链霉素32.( )是青霉素发酵生产中使用的前体物质。A.苯乙酸 B.苯 C.乙酸 D.甲酸33.中国科学院微生物所和北京制药厂发明的 Vc 的生产方法是( ) 。A.莱氏法 B.一步发酵法 C.两步发酵法 D.基因工程法 34.从茶叶中提取咖啡因时,可将茶叶放于大小适宜的烧杯中,上面用圆底烧瓶盛水冷却,然后直接加热到一定温度时,咖啡因可凝结于烧瓶底部,此种方法是( ) 。A.水蒸气蒸馏 B.渗漉 C

9、.升华 D.结晶35.浸泡药酒使用的是( )提取方法。A.浸渍 B.渗漉 C.煎熬 D.回流提取 36.生命活动所必需但需要量却很少的一类元素,能够影响生物体的生命活动,下列哪个不是( ) 。A.Zn B.Fe C.Cu D.P 37.下列哪个细胞可以由一个活细胞发育成一个完整生物体( ) 。A.老鼠细胞 B.紫草细胞 C.肝细胞 D.肾细胞 38.下列哪个不是构成原生质的主要元素( ) 。A. C B.P C.S D.Fe39糖类药物的特点是具有( )。 A.肽链结构 B.多糖结构 C核苷结构 D醇基和羧基结构 40按照制造原料的不同,疫苗又分为( )。A.菌苗和疫苗 B.类毒素和免疫球蛋白

10、 C.基因重组疫苗和细胞因子 D.预防性疫苗和诊断试剂41.( )是喷雾干燥设备的核心部件。A.干燥室 B.雾化器 C.加热器 D.分配室42.下列细胞具有无限繁殖能力的是( ) 。A.原代细胞 B.二倍体细胞 C.连续细胞 D.体细胞43.蒽酮法测定是( )物质的含量。A.蛋白质类 B.脂类 C.糖类 D.氨基酸类44.纯 RNA 溶液的 A260 /A280 值为( )。 A.1.8 B.1.5 C2.0 D2.545.( )用干燥的气体作为热载体和介质,传递热量,带走蒸发的水汽。A.对流干燥 B.红外干燥 C. 接触干燥 D.辐射干燥46.现代生物技术诞生的标志是( )。A.建立青霉素发

11、酵工业 B建立细胞学说与孟德尔遗传定律 C建立 DNA 双螺旋结构模型 D建立重组 DNA 和淋巴细胞杂交瘤技术47.超声波处理法属于细胞破碎方法中的( ) 。A.化学法 B.生物法 C.机械法 D.物理法48.戊二醛与酶反应制备固定化酶属于固定化酶方法中的( ) 。A.吸附法 B.交联法 C.包埋法 D.液膜法49.世界上第一个抗肿瘤基因治疗药物是( )。 A.腺苷脱氢酶 ADAB重组人胰岛素 C重组人 p53 腺病毒注射液 D人集落刺激因子50.20 世纪 70 年代发现的( ),为基因工程的发展提供了有力的工具。 A. DNA 双螺旋结构模型 B限制性内切酶 C遗传信息中心法则 D重组人

12、胰岛素 51.壳聚糖是( ) 。A.普通多糖 B酸性多糖 C氨基多糖 D络合多糖52.( )是医药工业合成甾体激素的原料。A.薯蓣皂苷元 B.多糖 C黄酮 D蛋白质53.具有强致泻、止血、影响血小板细胞和肝细胞及脑细胞内游离钙浓度等多种活性的番泻苷 A 及其类似物属于( )药物。A.皂苷类 B.多糖 C二蒽酮 D蛋白质54. 软紫草根中分离的抗菌、抗炎、抗癌的活性成分紫草素及其衍生物属于( )药物。A.皂苷类 B.多糖类 C苯醌类 D蛋白质类55.当归根挥发油中分离当归内酯属于( ),具有抗肿瘤、调节免疫的功能。A.萘醌类 B萜类 C香豆素类 D植物甾醇类56. 海洋生物( )含有丰富的伊胡萝

13、卜素。A.虾蟹 B海绵 C珊瑚 D.盐藻57. 许多陆地植物含有皂苷,而目前在动物界中只发现海洋棘皮动物的海参和海星含有皂苷,皂苷是它们的毒性成分,均具有( )功能。A.抗血栓 B抗肿瘤 C降血压 D.改善微循环得分 评卷人58. 透明质酸可以从( )中获得。A鲸鱼 B扇贝 C海星 D蓝藻59.人体必需的氨基酸有( )种。A.8 B.9 C.10 D.1260.从( )中分离出新的甾醇硫酸盐 A 和 B,都具有体外抗猫白血病毒作用。A.海绵 B.海藻 C.鲸鱼 D.螺旋藻61.苔藓虫素是从海洋苔藓虫中分离的新型( )衍生物A.多肽类 B.青霉类 C.四环类 D. 大环内酯类62.用于面包制作的

14、酵母发酵属于( ) 。A. 微生物转化发酵 B. 微生物菌体发酵 C. 微生物酶发酵 D.徽生物代谢产物发酵63.氨基酸的发酵属于( ) 。A. 微生物转化发酵 B. 微生物菌体发酵 C. 微生物酶发酵 D.徽生物代谢产物发酵64. 下列哪个条件不是发酵工程所用的菌种,必须满足的( ) 。A.菌种不能产生有害成分 B.生产能力大 C.产物有利于分离纯化 D. 生长速度快65.( )是青霉素合成的最好碳源。A. 乳糖 B.蔗糖 C.葡萄糖 D.果糖66. ( )是青霉素合成的最好碳源。A.玉米浆 B.花生饼粉 C.棉籽饼粉 D.麸皮粉67.肌苷发酵过程中需添加氨基酸,其中( )是必需的。A.组氨

15、酸 B.谷氨酸 C.赖氨酸 D.蛋氨酸68.下列酶类药物( )以解除体内或因注射某种药物产生的有害物质。A. 木瓜酶 B. 纤维素酶 C.青霉素酶 D. 葡萄糖氧化酶 69.下列酶类药物( )能够分解发炎部位纤维蛋白的凝结物,消除伤口周围的坏疽、腐肉和碎屑。A. 木瓜酶 B. 纤维素酶 C. 胰蛋白酶 D. 葡萄糖氧化酶 70. 将酶或细胞包埋在高分子半透膜中的称为( ) 。A.网格型包埋 B.凝胶包埋 C. 微囊型包埋 D.离子吸附法71.离子吸附法进行酶的固定化常用的载体为( ) 。A.淀粉 B.凝胶 C.DEAE-纤维素 D.卡拉胶72.网格型包埋进行酶的固定化常用的载体为( ) 。A.

16、淀粉 B.凝胶 C.DEAE-纤维素 D.卡拉胶73.物理吸附法进行酶的固定化常用的载体为( ) 。A.淀粉 B.凝胶 C.DEAE-纤维素 D.卡拉胶74.磷酸二酯酶存在于( )细胞中。A.橘青霉细胞 B.大肠杆菌 C.枯草杆菌 D.羊 75.DL 外消旋混合物通过( )的拆分,产生纯度较高的 L-氨基酸。A.氨基酰化酶 B.青霉素酶 C.蛋白酶 D.淀粉酶76.各种免疫细胞都是从( )中的多能干细胞分化而来的。A.骨髓 B.脾脏 CB 细胞 DT 细胞77.接受抗原刺激产生免疫应答的场所是( )。A.骨髓 B.脾脏 CB 细胞 DT 细胞78.执行体液免疫功能的是( )。A.骨髓 B.脾脏

17、 CB 细胞 DT 细胞79.细胞免疫则指的是( )的免疫作用。A.骨髓 B.脾脏 CB 细胞 DT 细胞80.( )可在不需要预先由抗原致敏,也不需要抗体参与的情况下非特异性地直接杀伤靶细胞。A.NK 细胞 B.K 细胞 C.B 细胞 D.T 细胞81.( )是人体的主要免疫球蛋白,具有较强的抗感染、中和毒素和免疫调理作用。A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD82.( )主要由黏膜相关淋巴组织中的浆细胞产生,分血清型和分泌型两类,具有杀菌和抗病毒活性A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD83.( )主要分布于血液中,具有补体激活功能,在防止发生菌血症、败血症方面起重要作用。

18、A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD84.( )在血清中仅占 Ig 总量的 l%,是 B 细胞的重要标志,在防止免疫耐受方面可能具有一定作用。A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD85.( )常附在肥大细胞与嗜碱性粒细胞表面,可引起型超敏反应。A.IgG B.IgA C.IgM D.IgE 86.下列哪个物质只具有反应原性而没有免疫原性( ) 。A.青霉素 B.细菌 C.病毒 D.异种动物血清87.下列哪个物质既具有反应原性又具有免疫原性( ) 。A.异种动物血清 B.青霉素 C.类脂 D.磺胺 88.具有无限增殖能力的一种细胞系是( ) 。A. 原代细胞系 B. 二倍体细胞

19、系 C. 连续细胞系 D.干细胞系89.用减毒或弱化的病原体制成的,称为第一代疫苗,下列哪个不是( ) 。A.百日咳杆菌疫苗 B.结核杆菌疫苗(卡介苗) C.脊髓灰质炎病毒疫苗 D.核酸疫苗90.用减毒或弱化的病原体制成的,称为第一代疫苗即( ) 。A.百日咳杆菌疫苗 B. 多价疫苗 C. 抗原蛋白疫苗 D.核酸疫苗91.微生物具有生理上的特殊性,往往需要一些特殊的营养物才能生长,结核杆菌需以( )作为碳源。A.甘油 B.乙醇 C.氨基酸 D.蛋白质92.有基因操作的“分子剪刀” 、 “分子手术刀”之称酶是( ) 。A.限制性核酸内切酶 B.DNA 连接酶 C.DNA 聚合酶 D.DNA 修饰

20、酶93.分子杂交的技术基础是( ) 。A.蛋白质分子的肽链结构 B膜脂分子的双分子层结构C核酸分子的碱基互补原则 D遗传信息传递的中心法则94.根据( )的不同,生物芯片可分为基因芯片、蛋白芯片和组织芯片等多种形式。A.芯片的检测对象 B.芯片上固定的探针C芯片的固相成分 D芯片上固定的引物95.PCR 反应过程中需使用( ) 。A.限制性核酸内切酶 B.DNA 连接酶 C.DNA 聚合酶 D.DNA 修饰酶96.携带目的基困进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为( ) 。A.载体 B. DNA 聚合酶 C.宿主细胞 D.目的基因97. ( )不是载体的基本结构。A.复制子 B启动子 C克隆位点

21、 D遗传标记基因98. DNA 修饰酶中的磷酸酶可以( ) 。 A.将末端 5-P 转换成 5-OH B将磷酸基转移到 5-OH 的末端C在 3,-OH 末端逐个添加 dNTP D在 5-P 末端逐个切除 dNTP499.DNA 修饰酶中的 T4 激酶可以( ) 。A.将末端 5-P 转换成 5-OH B将磷酸基转移到 5-OH 的末端C在 3-OH 末端逐个添加 dNTP D在 5-P 末端逐个切除 dNTP4100.DNA 修饰酶中的末端脱氧核苷酸转移酶( ) 。A.将末端 5-P 转换成 5-OH B将磷酸基转移到 5-OH 的末端C.在 3-OH 末端逐个添加 dNTP D在 5-P

22、末端逐个切除 dNTP4三、简答题:(本大题共 9 小题,每小题 2 分,共 18 分)1、生物制药中生化分离纯化的特点是什么?2、作为萃取溶剂的超临界流体必须具备条件是什么?最常用、最理想的超临界流体是啥?3、发酵工程中,菌种的选育条件是啥?4、酶经过固定化后活力大多下降的原因是啥?如何应对?5、制备病毒类疫苗时,需要选择合适的毒种,才能生产出安全有效的疫苗。请简述如何筛选毒种。6、生物制药技术的核心特征是什么?如何理解现代生物技术发展中的生物制药技术体系? 7、当前我国生物制药技术的发展重点方向是什么?(5 分)8.简述发酵液预处理的方法。9、在有机溶剂沉淀过程中,应该控制哪些参数,如何控

23、制?四、论述题:(本大题共 1 小题,共 12 分)1、论述采取物理法进行酶固定化中,物理吸附法与离子吸附法间的区别与联系。得分 评卷人20172018 学年 第二学期2015 级药物制剂专业现代生物制药技术期末考试试卷一、名词解释:(本大题共 10 小题,每小题 2 分,共 20 分)1.生化分离:是指采用适宜的分离、提取、纯化技术,将目标成分从复杂的生物材料(细胞)中分离出来,并获得高纯度的产品的过程。2.固定化酶:是指经物理或化学方法处理,使酶变成不易随水流失即运动受到限制,而又能发挥催化作用的酶制剂。3.抗体:是指机体在抗原刺激下,由 B 淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发

24、生特异性结合反应的免疫球蛋白(Ig)。4.单克隆抗体:是单克隆细胞产生的针对单一抗原决定族的抗体。5.分子诊断试剂:是指检测与疾病相关的各种结构蛋白质、酶、抗原、抗体和各种免疫活性分子,以及编码这些分子的基因的试剂产品。6. 色谱法:利用不同物质在两相介质中具有不同的分配系数,通过两相介质的相对运动实现物质分离的一类方法。7.贴壁培养:必须让细胞贴附于某种基质上生长繁殖的培养方法。8.灭菌:利用物理或化学的方法杀死或除去物料及设备中所有的微生物9.超临界流体萃取:利用超临界流体的特性,通过改变临界压力或临界温度来提取和分种化合物。10.抗生素:生物在生命活动中产生,在低微浓度下选择性抑制他种生

25、物机能的物质二、选择题:(本大题共 100 小题,每小题 0.5 分,共 50 分)(请将正确答案填写在下面表格内)1 2 3 4 5 6 7 8 9 10A D A B A A C B C C11 12 13 14 15 16 17 18 19 20C B B C D B C B B C21 22 23 24 25 26 27 28 29 30B B A C B A B B C B31 32 33 34 35 36 37 38 39 40B A C C A D B D B A41 42 43 44 45 46 47 48 49 50B C C C A D D B C B51 52 53 54

26、 55 56 57 58 59 60C A C C C D B A A A61 62 63 64 65 66 67 68 69 70D B D D A A A C C C71 72 73 74 75 76 77 78 79 80C D A A A A B C D A81 82 83 84 85 86 87 88 89 90A B C D D A A C D A91 92 93 94 95 96 97 98 99 100A A C B C A B A B C三、简答题:(本大题共 9 小题,每小题 2 分,共 18 分)1、生物制药中生化分离纯化的特点是什么?答:(1)生物技术产品产自细胞内,一

27、般来说,目标成分(产品) 在细胞或反应液中的含量都不高,性质往往不够稳定,且含有较多的杂质,不少杂质的性质与目标成分相近,因此产物的分离、提取和精制( 纯化) 的要求比较高,技术复杂。 (2)生化药物成分一般都具有生物活性,对热、酸、碱、重金属及 pH 变化和各种理化因素都较敏感,分离过程中必须注意保护其生理活性。 (3)生化药物成分在提取、分离时,不仅要考虑高产率、低成本,还应注意尽量减少操作步骤、合理安排各步骤的操作次序、选择合适的纯化方法、明确产品的形式和稳定性等方面的因素。2、作为萃取溶剂的超临界流体必须具备条件是什么?最常用、最理想的超临界流体是啥?答:(1)具有化学稳定性,对设备没

28、有腐蚀性;(2)临界温度不能太低或太高,最好在室温附近或操作温度附近;(3)操作温度应低于被萃取溶质的分解温度或变性温度;(4)临界压力不能太高,以便节约压缩动力费;(5)有较好的选择性,容易得到高纯度制品;(6)有较高的溶解度,以减少溶剂用量;(7)萃取溶剂容易获取,价格便宜;(8)对人体没有任何毒性。最常用、最理想的超临界流体是二氧化碳。3、发酵工程中,菌种的选育条件是啥?答:菌种不能产生有害成分、有较大的生产能力、产物有利于分离纯化、具有良好的繁殖能力、原料来源广泛、具有较好的抗性和遗传稳定性。4、酶经过固定化后活力大多下降的原因是啥?如何应对?答:(1)因为酶的活性中心的重要氨基酸与载

29、体发生了结合,酶的空间结构发生了变化,或者酶与底物结合时存在空间位阻效应。包埋法制备的固定化酶活力下降的原因还有底物和产物的扩散阻力增大等。 (2)反应条件要温和,在固定化反应体系中加入抑制剂、底物或产物,可以保护酶的活性中心。5、制备病毒类疫苗时,需要选择合适的毒种,才能生产出安全有效的疫苗。请简述如何筛选毒种。答:毒种必须持有特定的抗原性,能使机体诱发特定的免疫力,以阻止相应疾病的发生。 毒种应有非典型的形态和感染特定组织的特性,并能在传代过程中长期保持生物学特性。 毒种在特定的组织中能大量繁殖。 毒种在人工繁殖过程中,不应产生神经毒素或能引起集体损害的其他毒素。 制备活疫苗时,毒种在人工

30、繁殖过程中应无恢复原致病能力的现象。 毒株在分离和形成毒种的全过程中应不被其他病毒所污染,并有历史记录。6.生物制药技术的核心特征是什么?如何理解现代生物技术发展中的生物制药技术 体系? 答:一切生物制药技术都围绕生物体来进行。生物制药技术的核心特征是生物反应。生物反应,指细胞内的一系列生化代谢反应和细胞内生化物质的提取分离。生物制药技术体系可以用两条反应主线进行描述,一条是将化学材料和动植物材料,通过一系列细胞生化代谢反应后,获得生物药物的原料。另一条是将动物、植物等生物材料,不经过细胞内的生化代谢反应,而是通过提取组织 或细胞内的生化物质而获得生物药物的原料。由上述两条反应主线获得的初级产

31、物,都需要经过下游的生物化工过程进行分离、纯化和精制,获得原料产品,再经过制剂工程的加工,成为各类生物药物制剂。7.当前我国生物制药技术的发展重点方向是什么? 答:疫苗与诊断试剂,创新药物, 微生物制造工艺, 天然药物制备技术的开发 ,生物基材料。8.简述发酵液预处理的方法。答:采用加热、大幅度调 pH 和加入絮凝剂等方法可使蛋白质变性;加入草酸、三聚磷酸钠、黄血盐等可以除去 Ca2+、Mg 2+、Fe 2+等无机离子。采用板框压滤机、鼓式真空过滤机除去发酵液中的菌体。加入 1%10% 的助滤剂,如硅藻土、珠光石可以提高过滤速度。9、在有机溶剂沉淀过程中,应该控制哪些参数,如何控制?答:(1)

32、温度:乙醇与水混合会稀释放热,对不耐热的蛋白质影响较大。生产上常采用在低温下少量多次加入、搅拌的办法,来避免温度的骤然升高。 (2)浓度:因随着有机溶剂(乙醇)浓度的提高,蛋白质溶解度会下降,通过逐步增加乙醇浓度来沉淀不同的蛋白质。(3)pH 值:可以调节 pH 值,选择性不同等电点来沉淀不同的蛋白质。 (4)蛋白质浓度:蛋白质通常在高浓度下比较稳定,所以应避免使用很稀的浓度。四、论述题:(本大题共 1 小题,共 12 分)1、论述采取物理法进行酶固定化中,物理吸附法与离子吸附法间的区别与联系。答:(1)作用机理不同:前者利用水不溶性的固相载体表面直接吸附酶而使酶固定化,后者利用离子键使酶与载

33、体结合而将酶固定。 (2)载体不同:前者常用的固相载体有活性炭、氧化铝、高岭土、多孔玻璃、硅胶、石英砂、羟基磷灰石等无机载体,也有如纤维素、胶原、淀粉及面筋等有机载体;后者的载体是不溶于水的离子交换剂,常用的阴离子交换剂有DEA-纤维素、 TEAL-纤维素、ECTEOLA-纤维素、DEAE-葡聚糖凝胶等;阳离子交换剂有CM-纤维素、纤维素柠檬酸盐等。 (3)制备操作不同:进行前者操作时,可将酶的水溶液与具有高度吸附能力的载体混合,然后洗去杂质和未吸附的酶,即得固定化酶。进行后者操作时,先将解离状态的酶溶液与离子交换剂混合,洗去未吸附的酶和杂质,即得固定化酶。(4)有点不同:前者不会明显改变酶分子的高级结构,因此不易使酶分子活性中心受到破坏。后者操作简便,处理条件较温和,酶分子的高级结构和活性中心很少改变,能得到活性较高的固定化酶。 (5)缺点不同:前者缺点是酶分子与载体间的相互作用较弱,尤其是无机载体,吸附容量比较低,酶容易脱落。后者与前者相比,离子交换剂的蛋白质结合能力较强,但容易受缓冲液种类和 pH 的影响,在离子强度较大的状态下,酶分子容易从载体上脱落。

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