1、骨 髓 检 验(Bone Marrow Examination),临检教研室,一、临床应用,1.用于造血系统疾病的诊断、辅助诊断及病情监控、疗效观察如:白血病、再障、巨幼贫血、血小板减少性紫癜的诊断;缺铁性贫血的辅助诊断,2.用于某些非造血系统疾病的诊断及辅助诊断 如:原虫感染、代谢性疾病、转移性癌肿等。,适应征:原因不明的发热、恶病质;原因不明的肝、脾、淋巴结肿大;原因不明的外周血细胞数量、形态、种类异常疑血液寄生虫感染,禁忌征:血友病患者、妊娠中晚期患者,骨髓检查,骨髓细胞学检查,骨髓活检,细胞形态学检查细胞表面抗原检查细胞遗传学分析,骨穿部位:髂前、髂后上棘;胸骨等抽取髓液量:0.2ml
2、 送检要求:髓片3张,并送血片2张; 详细填写骨髓检查申请单,二、标本采集与送检,骨髓穿刺术录像,三、血细胞分化发育体系及规律 1. 发育体系,原免疫细胞,颗粒:无有,非特异性特异性,核仁: 有无,2. 发育规律,四、骨髓细胞形态学检查程序,1. 观察骨髓涂片的取材、涂片及染色情况 取材满意的标准:骨髓小粒、脂肪滴、骨髓特有细胞2. 判断骨髓增生程度共分五级;按照成熟红细胞与有核细胞的比3. 观察计数巨核细胞4. 观察片尾及边缘有无特殊细胞,(一)低倍镜检查,1.粒红比值(G:E): 骨髓中,粒系与红系所占百分比的比值,分类计数200 500个有核细胞(巨核细胞除外),并观察其形态、注意有无其
3、它特殊细胞及寄生虫。,(二)油镜检查,(三)计算、分析、诊断、书写报告,2.正常成人骨髓像特点,五、常用血细胞化学染色,1.过氧化物酶(peroxidase,POX)染色,用途:鉴别急性淋巴系与非淋巴系白血病结果:粒系(+);单核系(); 淋巴系(),2.中性粒细胞碱性磷酸酶染色(neutrophil alkaline phosphatase,NAP),鉴别:类白血病反应NAP ,慢粒NAP 化脓感染NAP, 病毒感染NAP,3. 非特异性脂酶染色 -醋酸萘酚酯酶(- NAE) ( non specific esterase,NSE ),用途:鉴别急粒与急单结果:粒系(-)或 弱(+)不被Na
4、F抑制 单核系(+) ,可被NaF抑制,4. 铁染色( iron staining),用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断缺铁性贫血:内、外铁均减少铁粒幼细胞贫血:内、外铁均增多MA、HA、AA、地中海贫血:外铁轻度增多,六、细胞免疫分型,(一)临床应用:,2.用于白血病微小残留病的检测,(二)急性白血病细胞免疫表型(表格),2.慢性粒细胞白血病(CGL,CML) 95%以上可出现Ph染色体 核形:46,XY,t ( 9 ; 22 ),(q34,q11) (abl / bcr 融合基因),七、细胞染色体基因分析,1.急性早幼粒细胞白血病(M3) 核形:46, XX, t (15 ; 17) , (
5、q22 , q12) RAR PML易位(阳性率90%以上)(维甲酸受体基因早幼粒细胞白血病基因),骨髓细胞学检验:,一、贫血的骨髓象特征,病因:铁缺乏,Hb生成不足、细胞质发育滞后 推测幼红细胞形态:核老浆幼(核染色质聚集度高,深染;胞浆少而蓝,边缘不整) 幼红细胞成熟时间延长 在骨髓滞留时间长 比例增高 增生性贫血 推测骨髓增生程度:活跃 或 明显活跃,(一) 缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA),病例一:某女性菜农,近期阵发性咳嗽、心慌,偶尔腹泻、排黑便。检体见贫血貌,心率稍快,腹部有轻微压痛,余阴性。,RBC 3.41012/L,Hb 82g/L,WBC
6、8.2109/L,Nsg 52%,E 18%,L 30%。RBC大小不均,呈小细胞低色素。粪便连续三次隐血阳性,查到钩虫卵。,临床资料分析症状、检体:初步检查:,血常规、便常规+隐血,贫血、消化系统、呼吸系统病变,病例一:某菜农近期阵发性咳嗽、心慌,偶尔腹泻、排黑便。检体见口唇苍白,心率稍快,腹部有轻微压痛,余阴性。,能否解释阵发性咳嗽腹泻、排黑便心慌、口唇苍白、心率快,关于缺铁性贫血的确诊方法?,三种,骨髓增生活跃,GE 1.7:1。有核红细胞增生明显,占32%,幼红细胞“核老浆幼”,胞质少、蓝染而不整齐。成熟红细胞表现为小细胞低色素,可见靶形红细胞。粒系占55.5%,其中嗜酸粒细胞占7%,
7、形态及染色大致正常。,病例一髓象:,小 结,1. 名词:G : E2. 正常成人髓象3. 细胞化学染色: POX、NAP、铁染色,骨 髓 增 生 程 度,增生程度 成熟RBC/有核细胞 常见病因极度活跃 1 : 1 白血病明显活跃 10 : 1 增生性贫血增生活跃 20 : 1 正常骨髓、贫血增生减低 50 : 1 慢性再障极度减低 300 : 1 急性再障,返回,返回,1. 增生活跃,G/E为2412. 粒系约50%60%,其中原粒1%,早幼粒5%,中性中、晚幼粒各约15%,杆状核较分叶核多一倍以上;嗜酸粒细胞5%;嗜碱粒细胞1%。3. 红系约占20%,其中原红1%,早幼红细胞5%,中、晚幼红各约10%左右。成熟RBC形态正常。4. 淋巴系约占20%,原、幼淋罕见。5. 在1.53cm2的骨髓膜上,巨核细胞为735个,颗粒巨和产板巨50%;血小板多见,成堆分布。,