1、HIV的检测和治疗,HIV的检测,1.病毒分离培养2.HIV1/2抗体、抗原检测3.病毒核酸测定4.CD4+T淋巴细胞检测5.血清学检测,2.HIV1/2抗体、抗原检测,包括筛查试验（含初筛和复检）和确证试验。HIV1/2抗体筛查方法包括ELISA法、化学发光法或免疫荧光试验、快速检测（斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒快速试验、明胶颗粒凝集试验、免疫层析试验）等，确证试验常用的方法是免疫印迹法（WB）。抗原检测：主要检测HIV1的P24抗原核心蛋白。这种抗原通常出现在急性感染期。处于窗口期的新近感染者筛查试验也可呈阴性反应。,3.病毒核酸测定,有原位杂交、RT-PCR、病毒载量等检测。病
2、毒载量检测常用方法有反转录PCR（RT-PCR）、核酸序列依赖性扩增（NASBANuclisens）、分枝DNA信号放大系统（bDNA）和实时荧光定量PCR扩增（realtime PCR）。先利用反转录酶将病毒RNA反转录成cDNA,再进行荧光实时定量PCR检测。HIV病毒载量检测结果高于检测下限，可作为诊断HIV感染的辅助指标，但不能单独用于HIV感染的诊断。,4.CD4+T淋巴细胞检测,目前常用的CD4+T淋巴细胞亚群检测方法为流式细胞术，可以直接获得CD4+T淋巴细胞数绝对值，或通过WBC分类计数后换算为CD4+T淋巴细胞绝对数。HIV感染人体后，出现CD4+T淋巴细胞进行性减少，CD4
3、+/CD8+T细胞比值倒置，细胞免疫功能受损。如果进行HAART，CD4+T淋巴细胞在病程的不同阶段可有不同程度的增加。意义：了解机体的免疫状态和病程进展、确定疾病分期和治疗时机、判断治疗效果和HIV感染者的临床合并症。,特殊人群：HIV感染母亲的婴儿,HIV阳性母亲的孩子即使没有感染HIV，出生时也会查出HIV抗体。小于18月龄的婴幼儿HIV感染诊断可以采用核酸检测方法，以2次核酸检测阳性结果作为诊断的参考依据，18月龄以后再经抗体检测确认。,HIV治疗药物,1.核苷类似物（NRTIs）2.非核苷类反转录酶抑制剂（NNRTIs）3.蛋白酶抑制剂（PIs）4.融合抑制剂、进入抑制剂（Fusio
4、n/Entry Inhibitors）5.整合酶抑制剂,NRTIs,1.作用靶点：HIV反转录酶。2.作用机制：在体内与核苷酸竞争结合到DNA分子上，磷酸二酯键不能形成，使DNA分子合成中断。需要细胞内活化。3.代表药物： 鸟嘌呤核苷类似物：阿巴卡韦（ABC） 胸腺嘧啶类似物：齐多夫定（AZT）、司他夫定（d4T）、去羟肌苷（ddI） 胞嘧啶类似物：拉米夫定（3TC）、恩曲他滨（FTC） 核苷酸类反转录酶抑制剂： 扎西他滨（ddC）、替诺福韦（TDF）。,NRTIs,4.HAART中药物骨干组合：TDF+3TC/FTC、ABC+3TC、AZT+3TC等。d4T+ddI因为线粒体毒性大而弃用。5
5、.药物毒性：胃肠反应、骨髓毒性、乳酸性酸中毒、多神经病变、胰腺炎、线粒体毒性等。6.核苷类似物有很大程度的交叉耐药。,NNRTIs,作用靶点：反转录酶；机制：与反转录酶的近底物结合点非竞争性结合，形成的复合物阻断反转录酶的催化活性位点与核苷的结合，使聚合降低。不需要细胞内活化代表药物：奈韦拉平（NVP）、依非韦伦（EFV）、地拉韦定（DLV）,PIs,作用机制：HIV蛋白酶将HIVgag-pol蛋白切割成能发挥功能的小蛋白。如果蛋白酶被抑制，蛋白水解功能失去作用将不能再产生具有传染性的病毒颗粒。代表药物：安普那韦（APV）、地瑞那韦（DRV）、福沙那韦（fAPV）、茚地那韦（IDV）、奈非那韦
6、（NFV）、利托那韦（RTV）、沙奎那韦（SQV）、替拉那韦（TPV）。,融合抑制剂,HIV进入CD4+T淋巴细胞有三个关键步骤：结合到表面受体、结合到辅助受体、融合进入细胞。衍生于gp41的多肽的作用机制：这些N-多肽和 C-多肽分别与 GP41的CHR和NHR结合,使二者不能结合 形成六股-螺旋束核心结构,干扰HIV与靶细胞融合,抑制HIV的感染率。,融合抑制剂,直接衍生于gp41的多肽类HIV融合抑制剂：包括衍生于CHR、NHR的多肽衍生于CHR的多肽：T-20、SJ-2176T-20（恩夫韦地，Enfurvitide）,融合抑制剂的原型，是一个分子量系相对较大的多肽，含有36个氨基酸，
7、可以在HIV与靶细胞融合时与gp41的中间结构相结合。衍生于NHR的多肽：DP-107,融合抑制剂,CCR5拮抗剂：它们与CCR5结合后，使CCR5构象发生变化不利于gp120的识别或者导致CCR5的内源化作用（internalization），阻断了HIV-1与细胞包膜蛋白结合，导致HIV-1与CCR5在细胞表面结合的数量减少，从而起到抗感染作用。缺点：可能加快R5嗜性病毒株向X4嗜性病毒株的转变，有明显耐药性。药物：Maraviroc。,整合酶抑制剂,HIV-1整合酶是逆转录病毒复制的必需酶，它催化病毒DNA与宿主染色体DNA的整合，HIV整合酶抑制剂通过抑制HIY整合酶，有效抑制HIV在体内复制，不会伤害正常细胞。药物：拉替拉韦（raltegravir）、埃替拉韦（elvitegravir）、dolutegravir、stribild。,HAART,鸡尾酒疗法，原指“高效抗逆转录病毒治疗”（HAART），由美籍华裔科学家何大一于1996年提出，是通过三种或三种以上的抗病毒药物联合使用来治疗艾滋病。该疗法的应用可以减少单一用药产生的抗药性，最大限度地抑制病毒的复制，使被破坏的机体免疫功能部分甚至全部恢复，从而延缓病程进展，延长患者生命，提高生活质量。缺点：药物副作用、价格昂贵、终身服药依从性差、病毒无法全部清除等。,
