1、“红宝石”萱草的组织培养摘要：采用“红宝石”萱草幼嫩花茎做为外植体，接种在不同培养基上，研究不同浓度的 NAA 和 6BA 对于外植体生长的影响，并探索了最适于产生愈伤组织和生根的培养基配方。 关键词：萱草 组织培养愈伤组织 Abstract: use “ruby“ day lilies tender stems as explants, inoculation in different medium, different concentrations of NAA and 6 ba on the influence of the explant grow, and explores the
2、most suitable for callus and rooting medium formula. Keywords: day lilies callus tissue cultures 中图分类号： Q943 文献标识码： A 1 材料与方法： 1、1 外植体：选用无病虫害植株的幼嫩花茎。 1、2 消毒：外植体在自来水冲洗 1520min ,在无菌条件下 70%酒精消毒 30s，无菌水冲洗一次，0.1%升汞溶液消毒 34 分钟，无菌水冲洗45 次。 1、3 培养基：（1）MS6BA1.0mg/LNAA0.2mg/L（2）MS6BA2.0mg/LNAA0.4mg/L （3）MS6BA3.
3、0/mgLNAA0.2mg/L （4）MS6BA4.0mg/LNAA0.4mg/L（5）MS6BA5.0mg/LNAA0.4/mgL 以 MS 为基本培养基，在培养基中加食用砂糖 3%，琼脂 3.5%，PH 值5.86.0。 1、4 增殖培养 1.4.1 分别接种于愈伤组织诱导培养基 1、2、3、4、5，每个处理15 瓶，每瓶接种 3 块花茎。30d 后统计出愈率，并将愈伤组织继代于相同的培养基，20d 后观察继代愈伤组织的生长情况。 培养条件：接种后置于光照培养箱内，25恒定培养，光照度2000Lx,光照时间 12/d. （一） 、不同培养基上红宝石萱草愈伤组织的诱导和继代后的分化情况 编号
4、 1：接种数（段）:30；出愈率 81%；生长情况：愈伤组织淡黄色，瘤状，继代后分化少量芽，黄绿色；丛芽增殖倍数（倍）：0. 编号 2：接种数（段）:30；出愈率 83%；生长情况：愈伤组织淡黄色，瘤状，继代后不分化芽，有大量愈伤产生；丛芽增殖倍数（倍）：0. 编号 3：接种数（段）:30；出愈率 100%；生长情况：愈伤组织淡黄色，瘤状，继代后个别分化出苗。 ；丛芽增殖倍数（倍）：1. 编号 4：接种数（段）:30；出愈率 100%；生长情况：愈伤组织淡黄色，瘤状，继代后个分化出少量芽；丛芽增殖倍数（倍）：1. 编号 5：接种数（段）:30；出愈率 100%；生长情况：愈伤组织淡黄色，瘤状，
5、继代后分化出大量黄绿色芽；丛芽增殖倍数（倍）：5-10. 从中看出，5 种培养基诱导培养基的愈伤组织诱导率均在 80%以上，在不同激素配比下，均形成瘤状愈伤组织。1 号培养基的愈伤组织继代于相同的培养基上，没有芽的分化。2 号产生大量愈伤组织，适合诱导愈伤组织。3、4 号培养基产生的愈伤组织继代于相同的培养基均能分化出少量的芽和苗，但芽的增殖倍数很低。5 号培养基能分化出大量丛生芽，丛生芽的增殖倍数为 510 倍，适合快速繁殖。 1.4.2 温度条件对增殖效果的影响。 在选定的培养基中，接入丛生芽式愈伤组织块，每瓶接种 3 块（株）分别置于培养箱、培养室，在 22-23 、 25-26 、 2
6、7-28温度条件下培养，20d 天后观察增殖效果。 （一） 、不同温度对红宝石萱草生长的影响 1、温度：2223，接种数（块）：60，增殖倍数（倍）：0，生长情况：没有分化，愈伤组织逐渐发褐，叶片发黄。 2、温度：2526，接种数（块）：60，增殖倍数（倍）：5-8，生长情况：愈伤组织增加，分化丛芽多。 3、温度：2829，接种数（块）：60，增殖倍数（倍）：2-4，生长情况：愈伤组织增加，少量分化芽，玻璃化严重. 从实验过程观察，萱草生长属于温度敏感型，当温度为 22-23是，愈伤组织和植株上无增殖率，从生长过程观察，愈伤组织逐渐发褐，植株上的叶片由外向里死亡，随着温度的升高，当温度 25-
7、26时，愈伤组织块增殖倍数和分化倍数达最大，当温度为 27-28时，植物形成不定芽的量达最高，但玻璃化严重。 1、5 生根培养 外源的激素处理对生根的影响非常明显，当无根苗在培养基中，经15 天培养，不同激素浓度生根率，每株平均根数，平均根长都不相同。生根培养基（6）1/2MSNAA0.2mg/L（7）1/2MSIBA0.6mg/L （8）1/2MSNAA0.4mg/L （9）1/2MSIBA0.4mg/L 在培养基中加食用砂糖 15%，琼脂 3.5%，PH 值 5.86.0。 选用基本培养基为 1/2MS，分别附加 IBA、NAA,进行比较试验，将增殖培养基中的无根丛生芽接入生根培养基，每瓶
8、 5 株，每个培养基接苗30 瓶。 培养条件：置 25的光照培养箱内培养，光照 12h/d，光强1800LX。 （一） 、红宝石萱草生根不同激素浓度处理情况 1、生根培养基：6；生根株数：93；生根率（%）：62%；每株平均生根数：2；平均根长（cm）：0.3。 2、生根培养基：7；生根株数：138；生根率（%）：92%；每株平均生根数：4.1；平均根长（cm）：1.1。 3、生根培养基：8；生根株数：144；生根率（%）：96%；每株平均生根数：4.3；平均根长（cm）：0.7。 4、生根培养基：9；生根株数：123；生根率（%）：82%；每株平均生根数：3.5；平均根长（cm）：0.43。
9、 从以上结果可知，NAA 为 0.4 时，生根率最好，为 96，但苗根数为 4.3 个，根长 0.7，苗基部愈伤组织较多，根粗、短，肉质化程度较高。其次是 IBA0.6 时，生根率 92，平均根数 4.1，根长 1.1，根细，木质化程度高，苗基部无愈伤组织，IBA 还促进苗向上生长。最优选择IBA0.6 为生根的浓度。 移栽 10 后，初步统计成活率，NAA0.4（90.1） ；IBA0.6（97） ，移栽 20 天后 NAA0.4（78） ，IBA（94） 。NAA0.4，根部腐烂，根发褐现象严重，由以上数据可知，在 NAA 的作用下，再生苗基部产生的愈伤组织会影响植株对营养物质吸收，而粗壮的肉质根恢复能力较差。因此，对移栽有影响，故最佳生根培养选择 IBA（0.6） 。 2、结论 建立红宝石萱草快繁体系流程为：幼嫩花茎在MS6BA2.0mg/LNAA0.2mg/L糖 30g/L琼脂粉 3.5/L 培养基上进行愈伤组织诱导与增殖；在 MS6BA5.0mg/LNAA0.4mg/L糖 30g/L琼脂粉 3.5/L 培养基上进行愈伤诱导丛芽；在 1/2MSIBA0.6mg/L琼脂粉3.5/L糖 15g/L 培养诱导生根；最适培养温度为 25-26。
